参附注射液化学成分鉴定及其炔醇类化合物的抗炎活性研究

目的 研究参附注射液中的化学成分及其炔醇类化合物的抗炎活性.方法 经大孔吸附树脂、中压液相色谱、制备薄层色谱和反相半制备高效液相色谱对参附注射液进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;通过RAW 264.7细胞炎症模型评价其中炔醇类化合物的抗炎活性,进一步采用Western blot法评价活性炔醇类化合物对环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达的影响.结果 从参附注射液中共分离鉴定出12个化合物,其中包括8个人参皂苷类化合物,即人参皂苷Rg1(1)、人参皂苷Re(2)、人参皂苷Rb1(3)、人参皂苷Rk1(4)、20(R)-人参皂苷Rh1(5)、20(S)-人参皂苷Rg3(6)、三七皂苷R1(7)、人参三醇(8);4个炔醇类化合物,即(3R,9R,10R)-人参炔三醇(9)、人参环氧炔醇(10)、heptadeca-1,8-dien-4,6-diyne-3,10-diol(11)、人参炔醇(12).4种炔醇类化合物中,仅化合物10有抗炎活性.化合物10对正常的RAW 264.7细胞无毒;其给药浓度为12.5～50.0μmol/L时,可显著逆转脂多糖诱导的细胞上清液中NO含量的升高(P<0.05或P<0.01);在给药浓度为50.0μmol/L时,可显著逆转脂多糖诱导的细胞中COX-2蛋白表达量的升高(P<0.05).结论 化合物4、7、10～12首次在参附注射液中被鉴定并报道,其中人参环氧炔醇具有一定的抗炎作用.