重组草鱼干扰素IFNγ原核表达及其抗GCRV效果

近年来,由草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)引发的草鱼出血病给该产业造成了严重的损失.为探究重组干扰素对草鱼(Ctenopharyngodon idella)的免疫保护作用及其作用机制,本研究构建草鱼干扰素γ(interferonγ,IFNγ)的原核表达载体PET-30a-rCiIFNγ,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)Transetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达及镍柱层析法纯化后获得重组蛋白rCiIFNγ;通过细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)检测rCiIFNγ的体外抗病毒活性;进一步在攻毒实验中评价rCiIFNγ免疫对草鱼体内抗GCRV感染的影响.结果显示,重组草鱼IFNγ融合蛋白(rCiIFNγ)分子量约23 kD,纯化复性后的rCiIFNγ抗病毒效价达2.8×103 U/μg;rCiIFNγ不仅能在体外抑制GCRV引起的细胞病变,还可以诱导草鱼肝、脾、肾、肠中IFN、IRFl、IRF7、Mx、PKR和STAT3等干扰素激活基因的表达,并能显著降低GCRV攻毒草鱼的死亡率.上述结果提示重组草鱼IFNγ融合蛋白rCiIFNγ具有明显的体内和体外抗GCRV效果.本研究为草鱼IFNγ在抗病毒方面的应用提供了参考依据.