口蹄疫病毒VP1结构蛋白多个氨基酸的替换对病毒生物学特性和小鼠免疫保护的影响

为探究口蹄疫病毒基因工程毒株(r-FMDV/MYVPl)VPl蛋白中氨基酸的替换对病毒复制特性及小鼠免疫保护的影响,借助反向遗传技术将多个O型FMD疫苗毒株VP1上保守和(或)特有氨基酸引入嵌合Mya-98毒株VP1基因的全长克隆,构建2个重组质粒并拯救FMDV,利用间接免疫荧光、电镜观察、序列分析进行鉴定;采用蚀斑试验和一步生长曲线测定病毒的蚀斑表型和复制性能;应用免疫和攻毒试验评价突变体疫苗对小鼠的保护效果.结果显示:成功拯救到2株病毒突变体;其蚀斑表型和一步生长曲线均与亲本病毒相似.结果表明:FMDVVP1蛋白上7个氨基酸的替换不影响病毒的复制能力;2株病毒突变体免疫小鼠后均能诱导产生良好的抗体水平并能保护多谱系病毒株的攻击.本研究为未来通过反向遗传修饰改造优良FMD疫苗候选毒株提供了理论依据.