IKKα调控子宫内膜基质细胞cyclin D1的表达及其蜕膜化过程

目的:研究IKKα下调时cyclin D1的表达变化及对体内-外蜕膜化过程和胚胎着床的影响.方法:利用8-Br-cAMP和MPA诱导hESCs体外蜕膜化.构建IKKαsiRNA转染至体外培养的hESCs中,以NC siRNA转染的hESCs作为对照组,并用8-Br-cAMP和MPA对两组进行蜕膜化干预,观察细胞形态变化.Real-time PCR、Western blotting方法分别检测两组中IKKα、特异性周期蛋白-D1 (cyclin D1)、泌乳素(PRL)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP1) mRNA和蛋白表达,采用流式细胞分析仪分析细胞周期.构建假孕子宫内膜蜕膜化小鼠模型并于一侧宫角注射IKKα siRNA干预,另一侧注射NC siRNA作为对照.HE染色观察两侧宫角子宫内膜基质细胞形态和腺管变化,免疫组织化学观察IGFBP1的表达,Real-time PCR和Western blotting分别检测小鼠两侧宫角子宫内膜细胞中IKKα、cyclin D1、PRL和IGFBP1水平.将性成熟雌性昆明鼠与正常雄性昆明鼠合笼后宫角注射IKKα(CHUK)/NC siRNA,记录双侧子宫的胚胎着床位点.结果:8-Br-cAMP和MPA可在体外诱导hESCs蜕膜化.蜕膜化干预组PRL mRNA(339.00±52.25 fold)、IGFBP1mRNA(199.6±9.36 fold)、蛋白(4.86士0.30)均高于对照组.hESCs发生了G0-1到S期的阻滞.体外下调IKKα使Cyclin D1过表达从而阻碍hESCs体外蜕膜化过程.对照组hESCs发生了G0-1到S期的阻滞.假孕小鼠宫角注射蓖麻油可诱导子宫内膜蜕膜化过程.小鼠体内下调IKKα表达并影响子宫内膜蜕膜化和胚胎着床过程.结论:下调IKKα可导致cyclin D1过表达而阻碍体内-外蜕膜化过程,影响胚胎着床.