超表达CD163的猪诱导性多能干细胞系构建

CD163作为清道夫受体蛋白,是猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的最重要细胞受体.诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是将外源转录因子导入体细胞后,经重编程获得的具有胚胎干细胞生物学特性的多能干细胞.本研究首先通过慢病毒载体系统将猪(Sus scrofa)源CD163基因转导入猪iPSCs(piPSCs),建立稳定表达CD163的诱导性多能干细胞系,将其命名为CD163OE-piPSC.病毒侵染实验证实,该细胞株对PRRSV高度易感.碱性磷酸酶染色和细胞群体倍增时间检测及5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)细胞增殖检测证实,CD163基因过表达不影响iPSCs的多能性与增殖能力.本研究获得的细胞株可有效应用于PPRSV与宿主互作的致病机理研究及病毒性疾病的靶标分子筛选.