基于TLRs/MAPKs/NF-κB信号通路探讨灰毛党参抗类风湿性关节炎活性及机制

基于TLRs/MAPKs/NF-κB信号通路探讨灰毛党参提取物抗类风湿性关节炎(RA)的活性及机制.采用UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定灰毛党参提取物成分.将48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤片组(MTX)以及灰毛党参提取物低(ZDS-L)、中(ZDS-M)、高(ZDS-H)剂量组,每组8只.采用注射牛Ⅱ型胶原乳液诱发大鼠胶原诱导性关节炎模型.灌胃给药,给药剂量MTX 2.5 mg·kg-1,ZDS-L、ZDS-M、ZDS-H分别为0.3、0.6、1.2 g·kg-1,正常组及模型组灌胃蒸馏水,MTX每3日1次,其余每日1次,连续28d.观察大鼠体质量,足趾肿胀度,关节炎指数,免疫器官指数,各组大鼠滑膜组织病理变化情况,血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠TLR2、TLR4、NF-κB p65、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达情况.UPLC-Q-TOF-MS共鉴定出34个灰毛党参提取物主要成分,其中黄酮类15个、苯丙素类7个、萜类4个、有机酸类4个、酯类2个、多炔类2个.与正常组比较,模型组大鼠体质量显著降低(P＜0.01);足趾肿胀度显著升高(P＜0.05,P＜0.01);关节炎指数显著升高(P＜0.01);免疫器官指数显著升高(P＜0.01);滑膜组织病理损伤明显;血清中的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P＜0.01);滑膜组织中TLR2、TLR4、NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达水平显著升高(P＜0.01).与模型组比较,灰毛党参提取物各剂量组体质量显著升高(P＜0.01);足趾肿胀度显著降低(P＜0.01);关节炎指数显著降低(P＜0.05,P＜0.01);免疫器官指数显著下降(P＜0.01);滑膜组织增生及炎症细胞浸润等病理变化减轻;血清中的促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);TLR2、TLR4、NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK的蛋白表达水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01).含有芹菜素、苜蓿素、绿原酸、秦皮甲素、阿魏酸、咖啡酸和齐墩果酸的灰毛党参提取物具有抗RA作用,其作用机制可能与抑制TLRs/MAPKs/NF-κB信号通路相关.