极速热循环荧光定量PCR系统检测流感病毒的效果评价

目的 探讨极速热循环荧光定量PCR系统在甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)和乙型流感病毒(influenza B virus,IBV)检测中的性能.方法 构建1AV和IBV的质粒标准品,浓度梯度稀释,每个浓度重复检测20次后,制作浓度标准曲线,评价系统的最低检出限、线性范围和线性相关系数.收集来自南部战区疾病预防控制中心生物安全科2016年至2018年的临床样本278例(IAV阳性样本88例,IBV阳性样本87例,阴性样本103例),其中男性164人(59％),女性114人(41％),平均年龄24岁,通过重复检测相同IAV、IBV临床样本评价其分析重现性;将系统检测278例鼻/咽拭子临床样本与传统实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)结果比较评价其效果.结果 极速热循环荧光定量PCR系统检测IAV和IBV质粒标准品的最低检出限为1x100 copies/μL;线性检测范围是1×100～1×105 copies/μL;此系统检测流感临床样本的敏感度为92.57％,特异度均为100％,阴、阳性预测值分别为88.79％和100％,与RT-qPCR结果的符合率为95.32％;IAV与IBV之间以及IAV和IBV与其他多种病原体之间无交叉反应;30 g/dL的血红蛋白、3.2 g/dL的甘油三酯和100 μg/mL头孢曲松对检测结果无干扰.结论 极速热循环荧光定量PCR系统体积小、重量轻、无需核酸提取步骤、耗时短、检测性能良好,适用于即时检测(point-of-care testing,POCT).