Vero细胞生物反应器微载体无血清培养甲型流感病毒

目的 采用Vero细胞生物反应器微载体无血清培养甲型流感病毒.方法 将Vero细胞分别采用无血清和有血清培养基于生物反应器(pH 7.2,温度37 C,溶氧量50％,转数60 r/min)中培养24 h,均用无血清培养基进行灌流培养至7 d,进行计数,并按MOI=0.1接种H1N1型流感病毒,加入终浓度为1 μg/mL的TPCK-胰酶,于生物反应器(pH7.8,温度33.0℃,溶氧量25％,转数60r/min)中培养18、22、42、48、66h,取样,检测血凝效价.结果 Vero细胞经无血清和有血清培养基培养7 d的细胞数分别为(133.4±2.0)x 104和(193.8±1.3)x 104个/mL,接种H1N1流感病毒66 h后血凝效价几何平均数分别为1∶388和1∶675,前者细胞数及病毒血凝效价几何平均数均显著低于后者(t分别为7.068和4.332,P均＜0.05).结论 采用Vero细胞通过生物反应器微载体无血清培养H1N1型流感病毒的血凝效价可满足流感病毒裂解疫苗制备的要求.