DHAV-3适应鸡胚毒株的培育及特性测定

旨在培育鸭甲型肝炎病毒血清3型(DHAV-3)适应鸡胚毒株并对其特性进行研究.利用鸭胚从临床病料中分离得到的DHAV-3 LC强毒株经卵黄囊接种鸡胚传代、纯化获得适应鸡胚毒株,并对毒株的致病性、毒力稳定性、免疫原性和基因组特征进行测定.结果显示,利用鸭胚接种成功从病料中分离鉴定DHAV-3 LC强毒株,对鸭胚和雏鸭的半数致死量分别为10-6.20/0.2 mL和10-4.25/0.2 mL.经卵黄囊接种鸡胚69代,获得适应鸡胚毒株DHAV-3 CA.CA 株的 F4、F16、F21、F31、F41 和 F51 代病毒液的 ELD50分别为 10-6.44/0.3 mL,10-6.60/0.3 mL,10-7.44/0.3 mL,10-7.80/0.3 mL,10-743/0.3 mL和10-7.25/0.3 mL;各代病毒对1日龄雏鸭不致病,但在体内连续传代出现接种雏鸭死亡.F21代病毒制备的油包水灭活疫苗免疫蛋鸡,血清中和抗体效价达1:500以上;以2.5×104.8ELD50及以上剂量的F31代病毒经颈部皮下接种1日龄雏鸭,攻毒保护率均在90％以上.F21代病毒全基因组序列分析显示,与DHAV-3 LC相比,基因组内无碱基插入或缺失,但有32个位点发生碱基突变;VP0基因的C1410T和A1411G突变与病毒在鸡胚中的传代次数有相关性.本试验成功培育出适应鸡胚毒株DHAV-3 CA,具有良好的免疫原性,但存在致病性返祖现象.