功能化氧化石墨烯GCF的制备及其增强OVA的免疫原性评价

为制备高效负载、递送和缓释抗原的新型功能化氧化石墨烯衍生材料(GCF)作为佐剂,探索该纳米佐剂对OVA免疫原性影响.以氧化石墨烯(graphene oxide,GO)为母体,采用EDC/NHS共价嫁接壳聚糖(chitosan,CS),并静电吸附泊洛沙姆407(poloxamer,F127)制备出亲水性的氧化石墨烯衍生材料GO-CS-F127(简称GCF).利用XRD、UV-vis、FI-IR、Zeta电位等多种方法对GCF进行理化特性表征,确定材料的形貌、成分及电荷分布.通过BCA法检测GCF对OVA的最大吸附量及释放率,CCK-8法鉴定GCF新材料在体外安全性评价,ELSIA方法评价小鼠血清中特异性抗体水平,并采集小鼠重要组织制备切片以观察病理变化.结果显示,GCF呈片层结构,常温放置30 d仍能稳定存放,带有17.9 mV的正电荷,能快速吸附抗原,其最大吸附量能达到1.9 g/g,且对抗原具有显著的缓释作用.GCF质量浓度在100 mg/L以下,细胞存活率达85％以上,且对心、脾、肾等组织无损伤,具有良好的生物相容性.与单独OVA组及PBS组相比,发现GCF能显著提高小鼠OVA特异性IgG抗体水平.结果表明,以功能化氧化石墨烯GCF作为佐剂,可有效提高抗原的免疫原性.