大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂耐药株增殖和凋亡及侵袭与迁移的影响

目的 探讨大蒜素对子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞株Ishikawa/DDP生物学行为的影响.方法 建立子宫内膜癌DDP耐药细胞株,设对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组,通过细胞计数实验(CCK8)、Transwell实验、划痕实验、流式细胞术检测各组细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡,采用RT-qPCR实验、蛋白质印迹实验分别检测各组细胞中多药耐药基因1(MDR1)mRNA、P-gp蛋白表达水平.结果 低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组细胞增殖抑制率分别为(20.92±3.28)％、(31.71±2.82)％和(47.34±3.43)％,随着大蒜素浓度增加,细胞增殖抑制率上升,差异有统计学意义,F=346.231,P=0.007.Transwell实验表明,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组侵袭细胞数分别为(314.00±7.53)、(278.00±6.52)、(203.00±5.46)、(109.00±5.32)和(65.00±3.41)个,随着大蒜素浓度增加,细胞侵袭力下降,差异有统计学意义,F=437.807,P=0.009.对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组48 h划痕宽度相对比例分别为(31.48±9.28)％、(33.76±7.43)％、(42.76±5.34)％、(53.56±7.45)％和(64.431±8.32)％,随着大蒜素浓度增加,细胞迁移能力下降,差异有统计学意义,F=345.126,P=0.005.流式细胞术结果表明,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组细胞凋亡率分别为(11.32±1.13)％、(13.51±0.83)％、(21.30±1.56)％、(37.64±2.21)％和(51.31±2.42)％,随着大蒜素浓度增加,细胞凋亡率显著提高,组间均值差异有统计学意义,F=423.012,P=0.008.RT-qPCR结果显示,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组MDR1 mRNA相对表达量分别为48.16±0.53、42.38±1.52、30.45±0.46、21.34±0.32、12.36±0.41,随着大蒜素浓度增加,MDR1 mRNA表达下降,组间均值差异有统计学意义,F=345.014,P=0.006.蛋白质印迹实验显示,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组P-gp蛋白表达水平分别为0.86±0.04、0.67±0.03、0.49±0.05、0.27±0.04、0.07±0.01,随着大蒜素浓度增加,P-gp蛋白表达下降,组间均值差异有统计学意义,F=445.017,P=0.006.结论 大蒜素能够抑制子宫内膜癌DDP耐药株Ishikawa/DDP增殖、侵袭和迁移的能力,同时促进肿瘤细胞凋亡,可能通过下调MDR1 mRNA以及P-gp表达逆转Ishikawa/DDP细胞DDP耐药性.