高产杀粉蝶菌素的链霉菌鉴定及其拮抗水稻白叶枯菌活性研究

[目的]为保证农业生产可持续性发展,研发和使用环境友好的生物农药受到全社会的高度重视.微生物代谢产物农药是我国目前应用最广的生物农药,也是未来发展绿色农药的一个重要方向.[方法]利用包含水稻白叶枯菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)PXO99A的NA培养基琼脂平板,从水稻根际土壤中筛选能抑制Xoo 生长的链霉菌.通过高效液相色谱和质谱分析活性代谢产物的化学结构;采用剪叶法接种Xoo到水稻叶片后,再喷施杀粉蝶菌素溶液(0.1 g/L),2周后测定叶枯症状;采用响应面分析法优化高产杀粉蝶菌素的发酵培养基;采用PacBioSMRT测序平台+Illumina HiSeq X Ten平台开展全基因组测序.平均核苷酸一致性(average nucleotide identity,ANI)用于比较HSW2009与其他链霉菌在全基因组水平的亲缘关系.[结果]分离到一株对Xoo生长有强抑制活性的链霉菌HSW2009,其活性代谢产物为杀粉蝶菌素Al(piericidin Al,简称PIE);喷施PIE可以减轻Xoo在水稻叶片内的侵染;优化HSW2009高产PIE的发酵条件,得到MFM培养基;HSW2009在MFM培养中生长快、PIE发酵效价最高可以达到0.72 g/L;菌落表型分析、PIE生物合成基因簇分析、全基因组测序和ANI分析表明HSW2009与目前有效描述的PIE产生菌不同.[结论]HSW2009是一株高产杀粉蝶菌素Al的链霉菌属候选新种,命名为绍武链霉菌,可作为杀粉蝶菌素产业化研究的出发菌株.