CsPPR和CsCPN60-like在茶树白化叶片中的表达分析及互作蛋白验证

本课题组前期通过转录组筛选出 2 个与'白鸡冠'茶树(Camellia sinensis)叶片白化相关的基因(CSS0013384 和CSS0036305),为探明CSS0013384 和CSS0036305 在白化茶树中的表达模式与其互作蛋白,以'白鸡冠'茶树叶片为材料,克隆CSS0013384 和CSS0036305 cDNA全长序列,利用生物信息学、酵母单杂交和酵母双杂交,分析其蛋白理化性质、系统进化树、染色体定位、基因结构、蛋白结构、蛋白调控与互作网络和基因表达模式.生物信息学分析结果表明,CSS0013384 和CSS0036305分别属于三角状五肽蛋白(pentatricopeptide repeat protein,PPR)和伴侣蛋白(chaperone,CPN60-like)家族,其蛋白质编码区(coding sequence,CDS)长度为1893 bp和1752 bp,编码氨基酸个数为631和575,蛋白质质量为71.87 kD和60.79 kD,等电点为8.93和6.21.亚细胞定位预测结果表明,CSS0013384 定位于叶绿体,CSS0036305 定位于线粒体.通过白鸡冠茶树第二叶的遮阴和恢复光照处理与不同叶色茶树品种的RT-qPCR发现,CSS0013384 和CSS0036305 在白化芽叶中高表达.CSS0002807 属于PIF转录因子家族,酵母单杂交结果表明CSS0002807 可以结合CSS0013384 启动子.CSS0013384 和CSS0036305 在白化茶树叶片中可能参与叶绿体和线粒体发育,在叶片白化过程中发挥重要作用,结果可为进一步探究茶树叶片白化机理提供参考.