miR-125a-5p通过靶向HIF1AN调控HIF-1α参与小胶质细胞活化

目的 观察miR-125a-5p通过靶向HIF1AN调控HIF-1α在BV-2小胶质细胞炎症模型中对小胶质细胞的活化作用.方法 首先用LPS 150 μg/L+IFN-γ 20 μg/L建立BV-2小胶质细胞炎症模型;将BV-2小胶质细胞分为对照组(Con组)、小胶质细胞炎症模型组(LPS+IFN-γ组),用实时荧光定量PCR检测miR-125a-5p、HIF1AN mRNA 表达水平,用 Western blotting 检测 iNOS 和 HIF-1α 蛋白的表达.再通过调控 miR-125a-5p、HIF-1α的表达,用荧光定量PCR法检测miR-125a-5p,HIF-1α、促炎因子(包括IL-1β、TNF-α)、M1极化标志物iNOS mRNA表达水平,用Western blotting法检测HIF1AN、HIF-1α的蛋白表达量.结果 与Con组相比,LPS+IFN-γ组miR-125a-5p,iNOS、IL-1β和 TNF-α mRNA 表达升高(P＜0.05),HIFIAN mRNA 表达下降(P＜0.05),HIF-1α、iNOS蛋白表达升高(P＜0.05).上调 miR-125a-5p 后,与 NC agomir+LPS+IFN-γ 组相比,miR agomir+LPS+IFN-γ组 miR-125a-5p,IL-1β、TNF-α 和 iNOS mRNA 表达升高(P＜0.05),HIF1AN 蛋白表达下降(P＜0.05),HIF-1α蛋白表达升高(P＜0.05);下调 miR-125a-5p 表达后,与 NC antagomir+LPS+IFN-γ 组相比,miR antagomir+LPS+IFN-γ组 miR-125a-5p,IL-1β、TNF-α 和 iNOS mRNA 表达下降(P＜0.05),HIF1AN 蛋白表达上升(P＜0.05),HIF-1α蛋白表达下降(P＜0.05);敲低HIF-1α的表达后,结果显示,与NC siRNA+LPS+IFN-γ组相比,HIF-1α siRNA+LPS+IFN-γ 组HIF-1α、IL-1β、TNF-α和 iNOS mRNA 表达下降(P＜0.05).结论 miR-125a-5p通过靶向HIF1AN调控HIF-1α参与了 BV-2小胶质细胞活化.