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薄壳山核桃疮痂病菌Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立及应用

Plant Protection(2023)

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摘要
疮痂病是薄壳山核桃上最具毁灭性的病害,带菌植物材料是传播疮痂病的重要来源.准确、灵敏、快速的检测方法可为该病害流行规律调查和防控提供有力的依据.本文通过比较薄壳山核桃疮痂病菌Venturia effusa及其近似种之间的ITS序列差异,设计了特异性引物和TaqMan探针,建立了薄壳山核桃疮痂病菌的荧光定量PCR检测方法.特异性检测结果表明,该方法可以检测不同地区的薄壳山核桃疮痂病菌菌株,而对其近似种以及薄壳山核桃上的其他真菌均没有信号.本研究建立的检测方法对薄壳山核桃疮痂病菌DNA的最低检测限可达0.5 pg/μL.该方法用于田间样品检测时,检测时间仅需1 h,远快于常规的分离培养法.本研究建立的基于TaqMan探针的荧光定量PCR检测方法为薄壳山核桃疮痂病菌的快速检测和监测提供了有力工具.
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