甘草减轻雷公藤多苷片所致肝损伤的作用机制

目的:探究肝脏药物代谢关键酶细胞色素P4502D6(CYP2D6)、细胞色素P4503A4(CYP3A4)在甘草水提物对急性肝损伤发挥保护作用的分子机制.方法:将健康雄性昆明种小鼠分为正常组、模型组、甘草水提物低、中、高剂量组(5、10、15 g·kg-1·d-1)及阳性药甘草酸二铵组(75 mg·kg-1·d-1),每组10只.以预防给药1周后采用雷公藤多苷片270 mg·kg-1单次灌胃诱导急性肝损伤模型,作用18 h后采集样本.采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理变化;生化法检测血清中肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)和总胆红素(TBIL)的含量及肝细胞氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肝脏药物代谢关键酶CYP2D6、CYP3A4的mRNA及蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组小鼠肝细胞出现显著水肿及炎性细胞浸润(P＜0.01),AST、ALT、γ-GT、ALP、TBIL明显增高(P＜0.05),MDA升高、SOD降低(P＜0.01),CYP2D6和CYP3A4的mRNA及蛋白表达量明显降低(P＜0.05);正常组小鼠肝组织结构完整未见明显异常,与模型组比较,甘草水提物低、中、高剂量组和甘草酸二铵组可显著减轻肝细胞水肿程度及炎性细胞浸润程度(P＜0.01),AST、ALT、γ-GT、ALP、TBIL 的含量不同程度降低,MDA 降低(P＜0.01),SOD 升高(P＜0.01),CYP2D6 和 CYP3A4 的 mRNA 及蛋白的表达量不同程度升高.结论:甘草水提物对雷公藤多苷片所致急性肝损伤的保护作用,可能与降低血清中AST、ALT、γ-GT、ALP、TBIL的水平;抑制肝细胞中MDA升高,增加SOD酶活力;提高肝脏药物代谢关键酶CYP2D6和CYP3A4的活性进而加速毒性物质代谢有关.