乙酰谷酰胺对脑外伤小鼠脑水肿程度及Omi/HtrA2信号通路的影响

目的 探讨乙酰谷酰胺对脑外伤小鼠脑水肿程度及Omi/HtrA2信号通路的影响.方法 应用C57BL/6小鼠进行实验,随机分为治疗组、模型组和假手术组,每组10只小鼠;模型组和治疗组小鼠麻醉后选择中线旁开2 mm处和右侧冠状缝后1 mm作为撞击点,将其头皮切开,钻1个5 mm直径的骨孔,应用Feeney自由落体损伤装置,找25 cm处应用40 g重击锤自由落体撞击,打击深度为5 mm,将鼠皮缝合;假手术组小鼠仅将其头皮切开,并不进行自由落体击打;造模30 min后治疗组小鼠腹腔注射乙酰谷酰胺,其余2组大鼠注射1mL生理盐水,连续治疗3d;第3d小鼠深度麻醉后断头处死,并将小鼠的海马组织和大脑组织进行分离;对受损侧大脑组织含水量进行检测;对各组小鼠的海马组织的细胞凋亡情况进行检测;应用免疫印迹(Western blot,WB)对小鼠海马组织中的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Polyadenosine diphosphate ribose poly-merase,PARP)、前体半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Precursor caspase 9,Pro-caspase-9),Pro-caspase-3,X染色体连锁的调亡抑制蛋白(X-linked apoptosis suppressor protein,XIAP)以及Omi/TtrA2蛋白水平进行检测;应用四肽荧光底物法对海马组织中Caspase-9和Caspase-3蛋白活性进行检测.结果 小鼠颅脑损伤后损伤侧脑组织的含水量明显升高;与模型组的(82.34±0.28％)比较,治疗组的脑组织含水量(78.28±0.78％)有所降低(P<0.05);假手术组的脑组织含水量为(77.37±0.49％),与治疗组的脑组织含水量相当(P>0.05);模型组的海马神经元凋亡率明显高于假手术组(P<0.05),治疗组小鼠的海马神经元凋亡率要低于模型组(P<0.05);模型组海马组织PARP,Pro-caspase-9,Pro-caspase-3以及Omi/TtrA2水平较假手术组高(P<0.05),模型组海马组织的XIAP蛋白水平相对于假手术组有所降低(P<0.05);治疗组小鼠海马组织PARP,Pro-caspase-9,Pro-caspase-3以及Omi/TtrA2水平相对于模型组有所降低,XIAP蛋白水平有所升高(P<0.05);模型组海马组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-9(Cysteine containing aspartate-specific proteases-9,Caspase-9)和Caspase-3蛋白活性相对于假手术组有所升高(P<0.05);治疗组海马组织中Caspase-9和Caspase-3蛋白活性相对于模型组有所降低(P<0.05).结论 乙酰谷酰胺能够有效降低脑外伤小鼠的脑水肿情况,并且能够通过影响Omi/HtrA2信号通路来减少神经元的凋亡.