关白附多糖纯化工艺优化及抑制结肠癌肝转移

目的 采用Box-Behnken法优化关白附粗多糖经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱法分离得到0.2M NaCl部位多糖ACP02的纯化工艺,为该成分的富集和后续的药效开发打下基础.方法 在单因素试验基础上,以上样量、洗脱时间、洗脱流速为影响因素,总多糖含量为评价指标,Box-Behnken响应面法优化纯化工艺.以雄性BALB/C裸鼠注射HT-29单细胞悬液作为结肠癌肝转移模型,分别用多糖低剂量组(100 mg·kg-1)、多糖高剂量组(200 mg·kg-1)处理,观察老鼠体重变化,30天后处死小鼠,取出肝脏和脾脏,观察发生转移的裸鼠个体数量.结果 根据响应面法得出DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱法最优工艺参数,即上样量5.03 g,洗脱时间73.10 min,洗脱流速7.33 mL·min-1;不同质量浓度多糖给药后,裸鼠体重无明显变化,给药组与对照组相比较发生转移的裸鼠个体数量显著性减少.结论 该方法纯化ACP02方便可行、稳定可靠、预测性良好.ACP02对于体内结肠癌肿瘤肝转移有明显抑制作用.