ATF4在衣霉素诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡中的作用
Journal of Yangzhou University(Agricultural and Life Science Edition)（2020）
摘要
为探究活化转录因子4(ATF4)在内质网应激(ERS)诱导剂衣霉素(Tm)诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡中的作用及其分子机制,设计ATF4 CDS区的shRNA片段,并将合成片段连接到慢病毒载体pCD513B-U6上,构建pCD513B-shATF4慢病毒干扰载体;对重组载体进行慢病毒包装并感染小鼠卵巢颗粒细胞;感染后的细胞经Tm处理后,通过流式细胞术、qRT-PCR和Western blot方法检测ATF4在Tm诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡中的作用.结果表明:成功构建了pCD513B-shATF4慢病毒载体并成功包装慢病毒;ATF4慢病毒高效感染小鼠卵巢颗粒细胞,且具有显著抑制ATF4表达作用;抑制ATF4显著下调CHOP、ERO1α和Caspase-3蛋白表达,并降低Tm诱导的卵巢颗粒细胞凋亡,推测ATF4可能通过调控ATF4-CHOP-ERO1a-Caspase-3信号促进Tm诱导的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡.
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