基于网络药理学及实验验证探究通关藤治疗卵巢癌的作用机制

通过网络药理学、分子对接技术和体外细胞实验,探究通关藤Marsdenia tenacissima治疗卵巢癌(ovarian cancer,OC)的主要活性成分和潜在作用机制.文献检索获取通关藤中活性成分,利用SwissTargetPrediction数据库获得药物的潜在靶点;借助Therapeutic Target Database(TTD)、Online Mendelian Inheritance in Man Database(OMIM)、GeneCards、PharmGKB等数据库检索OC相关靶点,并利用韦恩在线分析工具将药物靶点和疾病靶点取交集;运用Cytoscape软件构建"成分-靶点-疾病"网络,依据其节点度值筛选出核心成分;根据筛选出来的药物与疾病交集靶点,利用STRING平台和Cytoscape软件构建交集靶点的蛋白相互作用(PPI)网络,依据节点度值筛选出核心靶点;借助DAVID数据库对潜在治疗靶点进行GO功能富集和KEGG通路分析;并采用AutoDock 等软件对部分活性成分与潜在靶点进行分子对接验证;最后选用SKOV3 细胞在体外对通关藤提取物的抗卵巢癌活性进行验证,并依据GO功能和KEGG通路分析结果,选择PI3K/AKT信号通路进行体外实验验证.结果筛选出山柰酚(kaempferol)、11α-O-苯甲酰-12β-O-乙酰通关藤苷元(11α-O-benzoyl-12β-O-acetyltenacigenin B)、苦绳苷元 Q(drevogenin Q)等39 个有效活性成分,涉及AKT1、VEGFA、EGFR等25 个核心靶点,靶点蛋白富集的通路主要为PI3K/AKT信号通路.分子对接结果显示前 10 位核心成分与前 10 位核心靶点均有较好的结合能力.体外实验结果表明,通关藤提取物对卵巢癌细胞增殖有显著的抑制作用,可通过线粒体途径诱导卵巢癌细胞凋亡,下调PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达.该研究表明通关藤治疗卵巢癌的多成分、多靶点、多途径协同作用的特点,为深入研究其药效物质基础、作用机制以及临床应用提供理论依据.