转录组测序分析昆仑雪菊醇提物黄诺玛苷对胰岛素抵抗小鼠小肠类器官的影响

目的:探讨黄诺玛苷对胰岛素抵抗小鼠小肠类器官转录组的影响.方法:首先建立C57BL/6J和db/db小鼠小肠类器官;采用免疫荧光法检测细胞核核抗原(ki-67)和上皮细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达;将小肠类器官分为3组,分别是以C57BL/6J小鼠小肠类器官为正常组、db/db小鼠小肠类器官为模型组和db/db小鼠小肠类器官黄诺玛苷干预组为给药组(FM组);采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3组小肠类器官胰高血糖素样肽-1(GLP-1)蛋白的表达;并对3组样本进行转录组测序.结果:小肠类器官培养第6天形成围绕管腔周围的环状结构,初步建立了小肠类器官培养模式;免疫荧光检测结果显示小肠类器官均表达ki-67和E-cadherin;Western blot结果显示黄诺玛苷可增加GLP-1蛋白的表达;差异基因表达分析中,模型组与正常组相比差异表达基因共有1 862个,FM组与模型组相比差异表达基因共有2282个;通过蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析 2 组共同表达的差异基因,得到 Nr1i3、Cyp2c44、Ugt2b1、Gsta1、Gstm2、Ptgs1、Gstm4、Cyp2c38、Cyp4a32 和Gpx3 10个Hub基因,这些基因在正常组中高表达,模型组中表达降低,黄诺玛苷干预后回调上述基因的表达.结论:黄诺玛苷可能通过逆转Nr1i3、Cyp2c44、Ugt2b1、Gsta1、Gstm2、Ptgs1、Gstm4、Cyp2c38、Cyp4a32 和 Gpx3 10个 Hub基因的表达水平与相应的信号通路来发挥其改善胰岛素抵抗的作用.