动态观察顺铂诱发肾精不足证小鼠类固醇激素合成功能异常的研究

目的 研究顺铂诱发药源性虚证性小鼠类固醇激素合成功能的改变.方法 72只雄性ICR小鼠分为对照组32只和顺铂组40只,顺铂组予10mg/kg顺铂腹腔注射,每周1次,共5次(d1、d8、d15、d22、d29).每次造模后1周各组取8只检测相应指标,以ELISA检测睾酮和皮质酮含量、RT-qPCR检测下丘脑、垂体、肾上腺和睾丸类固醇激素合成酶相关基因表达.Western Blot 检测 肾上腺 StAR、CYP11A1、CYP21A2、CYP11B1;睾丸 StAR、CYP11A1、CYP17A1、HSD3B2 蛋白表达.结果 ①顺铂给药4次(d28)后显著下降小鼠体重,胸腺与肾脏萎缩,脾肿大.②小鼠血清皮质酮在顺铂给药2次(d14)及4次(d28)显著上升,末次(d30)显著下降.血清睾酮含量在给药1次后(d7)明显上升,给药4次和末次(d28、d30)明显下降.③随顺铂累积肾上腺皮质束状带明亮细胞增多.④随顺铂累积,曲细精管改变、生精细胞紊乱加重,给药4次(d28)后曲细精管内改变显著,支持细胞减少,间质增厚,间质细胞水肿明显.⑤顺铂组肾上腺在给药1次(d7)后Cyp21a1基因表达和CYP11A1蛋白表达上调,但Cyp11b2基因表达下调;给药2次(d14)后Star、Cyp11a1、Cyp11b1、Cyp11b2和Cyp21a1基因表达均下调;给药3次(d21)Cyp11a1和Cyp21a1基因表达下调;给药4次(d28)Cyp11b1基因表达上调.⑥顺铂组睾丸在给药2次(d14)后Star、Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd17b3和Ar基因表达均下调;给药3次(d21)Hsd3b2和Ar基因表达上调;给药4次(d28)Star、Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd3b2、Hsd17b3和Ar基因表达均显著上调,StAR蛋白表达上调;末次给药(d30)Star、Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd3b2、Hsd17b3和Ar基因表达均上调,StAR、CYP11A1 和 CYP17A1蛋白表达显著增强.⑦顺铂组下丘脑在给药2次(d14)GnRH基因表达增强,给药1次、4次和末次(d7、d28、d30)CRH基因表达均增强.⑧顺铂组垂体在给药1次(d7)Pou1f1基因表达上调而Fshb和Lhb基因表达均下调;给药4次(d28)Pomc基因表达上调.结论 顺铂可损害类固醇激素合成的肾上腺皮质轴与睾丸轴,尤其对睾丸各细胞的累积性损害可能是诱发肾精不足证的主要机制.