Mangiferin联合硼替佐米对Burkitt淋巴瘤恶性生物学行为的调控机制及对CXCR表达的影响

目的:分析芒果苷(mangiferin)联合硼替佐米对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖、侵袭、凋亡和自噬的作用及对CXC趋化因子受体家族(CXCR)表达的影响,并探究其间存在的分子机制,为Burkitt淋巴瘤基础研究与临床提供科学依据.方法:采用不同浓度Mangiferin、硼替佐米单药或联合干预Raji细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡、自噬及Akt/mTOR通路蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测CXCR家族的表达变化.结果:不同浓度Mangiferin干预Raji细胞不同时间后,可抑制Raji细胞活力,且呈浓度及时间依赖性(r=-0.682,r=-0.836);与单药组相比,Mangiferin联合硼替佐米干预Raji细胞时,细胞增殖与侵袭能力显著下降、凋亡水平显著升高(P＜0.01).Mangiferin联合硼替佐米干预Raji细胞后,可上调促凋亡蛋白Bax表达并显著下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,同时亦使Caspase-3水解活化,继而诱导Raji细胞发生凋亡.Mangiferin联合硼替佐米干预Raji细胞后可上调LC3 Ⅱ蛋白的表达,且细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较单药或对照组显著上调(P＜0.01).Mangiferin联合硼替佐米可显著抑制Akt和mTOR的磷酸化水平,通过抑制Akt/mTOR通路来使Raji细胞增殖及侵袭受抑,并诱导细胞发生自噬与凋亡.Mangiferin及硼替佐米单药干预Raji细胞后,可下调CXCR4、CXCR7 mRNA的表达,当两药联合时CXCR4、CXCR7 mRNA表达下调更为显著(P＜0.01).Mangiferin单药或联合硼替佐米干预Raji细胞后CXCR5 mRNA表达无显著变化(P＞0.05),但两药联合时可使CXCR3表达下调(P＜0.05).结论:Mangiferin联合硼替佐米能协同抑制Raji细胞增殖、侵袭,并诱导其发生自噬与凋亡,机制可能与抑制Akt/mTOR信号通路并通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bax以及使CXCR家族表达受抑等有关.