天冬酰胺合成酶通过促进β-catenin核转位驱动胆管癌转移

目的:检测天冬酰胺合成酶(ASNS)在胆管癌(CCA)中的表达情况,探讨ASNS在CCA转移中的作用及其机制.方法:通过公共数据库分析各肿瘤组织中ASNS的mRNA表达;收集CCA患者病理组织(n=27),构建硫代乙酰胺诱导的大鼠自发CCA模型和左中位胆管结扎联合二乙基亚硝胺诱导的小鼠自发CCA模型,通过免疫组化、Western blot和免疫荧光法检测ASNS蛋白表达.采用CCK8、划痕和Transwell实验检测ASNS对人CCA细胞HuCCT1和HCCC-9810增殖、迁移和侵袭的影响.构建ASNS稳定敲减的CCA细胞株HuCCT1shNC、HuCCT1shASNS、HCCC-9810shNC和HCCC-9810shASNS,通过肝原位种植和尾静脉注射研究ASNS对CCA细胞肝内生长和肺转移的影响.利用公共数据库富集与ASNS相关的信号通路,并用免疫荧光和Western blot验证相关分子机制.结果:无论在人或动物CCA组织中,ASNS表达水平均高于癌旁组织(P<0.01).ASNS以酶活性非依赖性方式促进CCA细胞HuCCT1和HCCC-9810的增殖、迁移与侵袭.生物信息学分析显示,β-catenin在ASNS高表达的CCA组织中富集,ASNS通过促进β-catenin核转位,启动CCA细胞上皮-间充质转化(EMT).β-catenin抑制剂XAV-939可显著抑制CCA细胞的侵袭与迁移.结论:ASNS在CCA中高表达,通过促进β-catenin核转位,介导EMT,驱动CCA转移.