抑制lncRNA HIF1A-AS1表达对长春新碱耐药视网膜母细胞瘤细胞株裸鼠移植瘤生长及转移的影响

目的 探讨抑制长链非编码 RNA(lncRNA)缺氧诱导因子 1α-反义 RNA1(HIF1A-AS1)表达对长春新碱(VCR)耐药视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株裸鼠的生存期、移植瘤生长和转移的影响.方法 体外培养人 Rb细胞株 HXO-RB44、Y79、SO-RB50,通过逐步增加VCR浓度的方法刺激诱导建立其相应的VCR耐药Rb细胞HXO-RB44/VCR、Y79/VCR、SO-RB50/VCR,以实时荧光定量PCR(qPCR)实验检测上述细胞中lncRNA HIF1A-AS1、缺氧诱导因子 1α(HIF-1α)表达.于裸鼠背部皮下注射Y79/VCR细胞悬液建立VCR耐药Rb细胞株裸鼠模型,随机分为模型组、VCR组、VCR+lncRNA HIF1A-AS1 敲低组、VCR+lncRNA HIF1A-AS1 空载组,以VCR和相应质粒分组干预处理后,检测各组裸鼠移植瘤的肿瘤体积、抑瘤率、转移情况及存活率;qPCR实验检测各组裸鼠移植瘤lncRNA HIF1A-AS1 及HIF-1α、多药耐药 1(MDR1)、乳腺癌相关耐药蛋白(BCRP/ABCG2)mRNA表达;免疫印迹法检测VCR耐药Rb细胞株裸鼠移植瘤HIF-1α、P-gp、ABCG2 蛋白表达.结果 与人Rb正常细胞HXO-RB44、Y79 和SO-RB50 相比,lncRNA HIF1A-AS1、HIF-1α在其相应VCR耐药细胞HXO-RB44/VCR、Y79/VCR、SO-RB50/VCR中的表达均显著升高(P＜0.05).与模型组比较,VCR+lncRNA HIF1A-AS1 敲低组VCR耐药Rb细胞株裸鼠移植瘤肿瘤体积、转移器官数、转移灶总数、lncRNA HIF1A-AS1 及HIF-1α、MDR1、ABCG2 mRNA表达、HIF-1α及P-gp、ABCG2 蛋白表达均显著降低(P＜0.05),裸鼠给药后 30d 存活率、抑瘤率显著升高(P＜0.05);VCR 组、VCR+lncRNA HIF1A-AS1 空载组VCR耐药Rb细胞株裸鼠各指标无显著变化(P＞0.05).与VCR组比较,VCR+lncRNA HIF1A-AS1 敲低组VCR耐药Rb细胞株裸鼠移植瘤肿瘤体积、转移器官数、转移灶总数、lncRNA HIF1A-AS1 及HIF-1α、MDR1、ABCG2 mRNA表达、HIF-1α及P-gp、ABCG2 蛋白表达均显著降低(P＜0.05),裸鼠给药后 30d 存活率、抑瘤率显著升高(P＜0.05);VCR+lncRNA HIF1A-AS1 空载组VCR耐药Rb细胞株裸鼠各指标无显著变化(P＞0.05).结论 下调lncRNA HIF1A-AS1 表达可降低HIF-1α表达,增强VCR耐药Rb细胞株裸鼠移植瘤对VCR的敏感性,抑制移植瘤的生长和转移,提高裸鼠存活率.