基于NLRP3炎症小体探讨半夏泻心汤对炎症性结直肠癌小鼠的影响

目的 基于NLRP(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein,NLRP)3 炎症小体探讨半夏泻心汤对炎症性结直肠癌(colorectal cancer,CRC)小鼠的改善作用.方法 小鼠CRC模型采用腹腔注射氧化偶氮甲烷联合口服葡聚糖硫酸钠法制备.100 只小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型组、半夏泻心汤低剂量、半夏泻心汤高剂量组及美沙拉嗪组,每组各20 只,连续给药 14 d.记录各组小鼠一般情况;光镜观察小鼠结肠和脾脏病理改变;TUNEL染色检测结肠组织肿瘤细胞凋亡情况、荧光定量PCR检测结肠组织NLRP3、芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)、三叶因子(trefoil factor,TFF)3 和p53 肿瘤蛋白(tumor protein 53,P53)mRNA表达水平;免疫组化和Western Blot分别检测各组结肠组织中核增殖抗原Ki-67(Ki-67 antigen,Ki67)、AhR及NLRP3、AhR、TFF3 和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9 蛋白表达.结果 与正常对照组比较,模型组小鼠体质量明显减轻,结肠瘤体数目增多,脾脏和胸腺指数升高,血清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(interleukin,IL)-6和干扰素(interferon,IFN)γ含量显著升高(P<0.01),IL-10 含量下降;结肠组织中Ki67、AhR、NLRP3、AhR、MMP-9蛋白以及NLRP3、AhR和P53mRNA表达明显增高(P<0.05);而TFF3 mRNA和蛋白显著降低(P<0.01).与模型组比较,半夏泻心汤和美沙拉嗪组上述指标的变化均发生逆转,均具有统计学差异(P<0.05),且以半夏泻心汤高剂量组变化更为显著.结论 半夏泻心汤可减轻CRC小鼠炎症反应,诱导肿瘤细胞凋亡从而改善肠黏膜屏障功能,其机制与阻断AhR通路活化抑制NLRP3 炎症小体生成有关.