Recherche des récepteurs cellulaires et des ligands fongiques impliqués dans la synthèse d’IL-8 par les cellules épithéliales bronchiques infectées par Aspergillus fumigatus

Introduction Aspergillus fumigatus (Af) se propage sous forme de spores qui peuvent pénétrer dans le tractus respiratoire où elles sont éliminées par le système de défense immunitaire innée. En présence d’un déficit immunitaire, les spores peuvent former des filaments. Nous avons montré que les cellules épithéliales bronchiques (CEB) infectées par Af sont activées en présence des filaments et synthétisent, une chimiokine pro-inflammatoire, l’interleukine 8 (IL-8) [1]. Les ligands fongiques et les récepteurs cellulaires impliqués dans cette interaction ne sont pas connus. Une équoipe a mis en évidence que EphA2 (ephrin type-À récepteur 2), un récepteur exprimé par les cellules épithéliales orales, interagissait avec une levure, Candida albicans, et induisait la synthèse d’IL-8 via l’activation de EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) et du facteur de transcription STAT3 [2]. En nous basant sur ces données, notre but est de décrire les voies de signalisation cellulaires et d’identifier les ligands fongiques impliqués dans la réponse inflammatoire des CEB infectées par Af. Méthodes Les CEB de la lignée BEAS-2B, cultivées dans du milieu F12 supplémenté en antibiotiques et sérum de veau fœtal, ont été stimulées par Af (MOI : 0,1) ou des composés pariétaux purifiés de paroi d’Af. Les phosphorylations ont été quantifiées par Western Blot. Des expériences d’ARN interférence ou des inhibiteurs ont été utilisées pour étudier le rôle de récepteurs et de facteurs de transcription dans l’activation des CEB. La synthèse d’IL-8 a été mesurée par Elisa. Résultats Nous avons montré que EphA2 et EGFR étaient significativement phosphorylés après infection des CEB par Af et que leur inhibition était associée à une diminution de synthèse d’IL-8. Nous avons observé que l’inhibition de STAT3 ou de TLR2 entraînait une diminution significative de la synthèse d’IL-8 des CEB infectées par Af. Nous avons mis en évidence le rôle de deux composés pariétaux d’Af, le galactosaminogalactane et l’alpha-1-3 glucane, dans la synthèse d’IL-8 par les CEB. Conclusion Nos objectifs sont maintenant d’étudier l’interaction de ces composés pariétaux avec les récepteurs identifiés et de décrire les voies de signalisation activées lors de cette interaction. Les données obtenues poseront les bases pour l’étude d’autres médiateurs induits par cette interaction hôte-pathogène.