本文分别对 3 种不同成分市售胶饵防治德国小蠊的杀灭效果和 6 种药剂的室内滞留药效进行评价,以指导现场防治.胶饵室内药效实验采用玻璃方箱法,以死亡率评价杀灭效果;室内滞留药效实验采用果酱瓶药膜法,以德国小蠊与药膜强迫接触 20 min后的死亡率评价室内滞留药效.结果显示,3 种胶饵在施用 96h后,试虫校正死亡率均达到了 100%,3 种药剂药效均达到A级.6 种滞留喷洒用药剂对德国小蠊的实验室杀灭效果均达到100%,持效期90d以上.结果表明,9 种药剂在实验室条件下对德国小蠊均具有良好的杀灭效果,在现场防治中可以根据实际情况合理选用.
本研究以微小隐孢子虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Cryptosporidium parvum glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,CpGAPDH)为对象,研究其亚细胞定位和酶动力学特征.设计特异性抗原多肽并免疫家兔,获得多克隆抗体,利用亲和纯化法获特异性抗体;经Western blot方法验证该抗体特异性,再通过间接免疫荧光法(IFA)进行蛋白定位.通过原核表达获得GST重组蛋白(GST-CpGAPDH),基于GAPDH的酶促反应利用辅酶NAD(H)或NADP(H)为电子受体或供体的原理,通过吸光度比色法监测反应中NAD(H)/NADP(H)的增加或减少鉴定其酶活性.结果显示,成功获得并纯化抗 CpGAPDH 抗体;Western blot分析显示该抗体可识别条带大小为 40 kDa;IFA结果表明该蛋白主要分布于子孢子胞浆内,部分呈现颗粒状.利用重组蛋白确定了CpGAPDH的酶活性;在两种辅酶中,CpGAPDH更倾向于使用NAD(H)进行酶活反应.结果表明,本研究确定了CpGAPDH在虫体细胞的定位及酶活性检测,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
布鲁氏菌病是一种危害严重的自然疫源性疾病,传播方式复杂,病原体在疫区有多种保存形式.近年研究证明,蜱可能是布鲁氏菌储存和传播的重要途径之一,在疫源地的传播和流行中具有重要的流行病学意义.蜱可自然携带布鲁氏菌,并存在经期、经卵传递可能;蜱可能是布鲁氏菌传播媒介,在蜱传播病原体的 2 个重要器官(唾液腺和中肠)中检出了布鲁氏菌;已在蜱中检出B.melitensis和B.abortus两种可致人发病的布鲁氏菌,尤其B.melitensis对人具有高致病性,布鲁氏菌可能存在"家畜—蜱—家畜/人"的传播循环.
本研究根据华支睾吸虫cox1 基因序列设计合成特异性引物和探针,建立基于TaqMan MGB探针的人粪便中华支睾吸虫虫卵实时荧光PCR检测方法,同时评价该方法的特异性、敏感性、重复性.采用建立的荧光PCR方法对临床样本进行检测,并与改良加藤厚涂片法检测结果进行比对.结果显示,本研究建立的方法与形态和种属关系相近的寄生虫无交叉反应;以9.97×107～9.97×100 copies/μL浓度的质粒作为标准品建立标准曲线,检测灵敏度为 9.97 copies/μL;组内、组间重复性试验变异系数均小于 0.4%.采用该方法检测 280 份居民粪便样本,检出阳性 54 份,经对比该方法敏感性高于改良加藤厚涂片法.本研究所建立的方法可用于华支睾吸虫虫卵的检测及诊断.
小亚璃眼蜱Hyalomma anatolicum属于硬蜱科璃眼蜱属,是一种寄生于动物体表的专性吸血寄生虫,其分布范围广、寄生强度大.该蜱种可传播多种人畜共患病原体,对畜牧业造成巨大损失.为研究媒介蜱生物学特性和吸血期蜱类生理学变化,本研究利用实验室F2 代小亚璃眼蜱进行人工饲养和组织器官切片染色,观察小亚璃眼蜱吸血期组织器官的形态学特征.结果显示,小亚璃眼蜱在实验条件下,从虫卵孵化为幼虫,再通过吸血成为若虫,进而吸血蜕皮为成蜱,共需要 50.0 d.吸血期小亚璃眼蜱雌蜱苏木精伊红染色(HE染色)组织切片显示,随着雌蜱从半饱血至饱血状态,唾液腺细胞逐渐溶解消失,中肠腔内消化产生的血红素转移至中肠基底层和血淋巴中,然而卵巢组织并未出现明显变化.本研究首次观察了吸血期小亚璃眼蜱组织器官的变化,丰富了该蜱的生物学特性和组织学形态资料.
弓形虫子孢子表面抗原(SporoSAG)和棒状体蛋白 5(ROP5)是不同阶段虫体表面的特异性抗原,与弓形虫分化及入侵宿主细胞密切相关.本研究表达并纯化重组蛋白rSporoSAG与rROP5,将重组蛋白通过单独、联合等不同方式分别免疫Balb/c小鼠,检测小鼠体液和细胞免疫水平.结果显示rSporoSAG 和rROP5 成功表达,大小分别约为 49.4 和 38.2 kDa.小鼠免疫实验中,rSporoSAG组、rROP5 组、rSporoSAG +rROP5 组、初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5 组总IgG、IgG1、IgG2a水平与对照组相比显著升高(P<0.05),其中,初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5 组的总IgG和IgG2a水平最高.细胞因子检测显示初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5 组IL-2 水平与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),其他组IL-2 水平与对照组相比无显著差异(P>0.05).各实验组IL-4、IFN-γ水平与对照组相比无显著差异(P>0.05).淋巴细胞增殖实验结果显示各实验组与对照组间均无显著差异(P>0.05).结果表明,本实验成功表达rSporoSAG、rROP5.rSporoSAG、rROP5 单独或联合等免疫Balb/c小鼠能够诱导其产生高水平的体液免疫,但不能有效激活细胞免疫应答,仅初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5 组IL-2 水平与对照组具有显著性差异,提示先免疫rSporoSAG再免疫rROP5 蛋白的免疫策略与其他免疫策略相比是一种更有效的方法,可用于预防弓形虫卵囊感染的研究.
寄生虫是人和动物重要的病原,严重危害人类和动物的健康.寄生虫与宿主在长期的共进化过程中,形成了复杂而巧妙的免疫逃避能力,能有效地规避宿主免疫系统的识别和杀伤.本文结合国内外研究结果,从逃避免疫识别、免疫抑制和借力共感染 3 个方面来论述和分析寄生虫感染的免疫逃避机制,以期提高读者对寄生虫感染复杂性和危害性的认识,为人和动物寄生虫病的有效防控提供重要参考和指导.
记述了局限蚊属(丽蚊亚属)一新种,丹珠局限蚊Topomyia(Suaymyia)danzhuensis sp.nov.该新种的主要特征是:雄蚊喙具基白环;腹节第IX-T侧叶端部的刺形鬃膨大呈刀型,内缘小鬃列位于端部而非基部;抱肢基节端腹叶具长鬃丛和背内侧中部具短鬃群,抱肢端节外枝明显比内枝粗大;幼虫下颚宽短,端缘具多个小齿突;梳齿数量较少和仅分布于呼吸管基部腹侧和肛腮粗壮及其末端钝圆等.模式标本采自云南省怒江州贡山县高黎贡山东坡竹林.标本保存于云南省地方病防治所.
为研究致倦库蚊取食前后肠道基因转录组水平的变化,对未取食、取食糖水、吸血条件下的致倦库蚊雌蚊肠道样品进行转录组高通量测序、分析筛选表达差异基因,并采用实时荧光定量PCR方法对结果进行验证.结果显示,在未取食和取食糖水条件下,共筛选出 785 个差异基因;在取食糖水和吸血条件下,共筛选出 840 个差异基因.转录组学分析发现,差异基因主要参与消化代谢、生长繁殖、免疫等过程.雌蚊羽化后与消化代谢、生殖相关的基因即开始表达,取食糖水和吸血后肠道中大部分基因表达量高于未取食状态.实时荧光定量PCR验证得到部分基因调控趋势与转录组测序基本一致.研究还发现细胞色素P450 氧化酶、谷胱甘肽-S-转移酶等与杀虫剂代谢相关的解毒酶基因以及清道夫受体、丝氨酸蛋白酶抑制剂等与蚊虫自身免疫相关基因.本研究将有助于今后高效解毒酶类抑制剂杀虫剂的研发.
本文报道 1 例儿童嗜酸性粒细胞性脑膜炎病例,通过回顾性分析该患儿的临床表现、实验室检查、影像学资料,结合其脑脊液宏基因组二代测序技术(Q-mNGS)检测结果及已发表的文献,综合分析该病的临床特点及诊治方法,同时探讨Q-mNGS在嗜酸性粒细胞性脑膜炎病原学诊断中的应用,以提升临床医师对该病的认识.采集 2022 年贵州地区发现的 1 例 1 岁 1 月幼童的病史资料,病患仅有食用虾类病史而无明确接触史,主要临床症状表现为精神差、发热、抽搐等,在外院曾误诊治疗,后脑脊液Q-mNGS结果明确诊断为广州管圆线虫感染致嗜酸性粒细胞性脑膜炎.该病起病急,病情重且进展迅速;由于其临床症状缺乏特异性,且血清学及脑脊液常规检查特异性欠佳,若非有明确流行病学史,易误诊.需探讨Q-mNGS在该病病原学诊断中的应用,便于早期诊断,以避免延误最佳治疗时机而出现严重并发症及后遗症,治疗上以阿苯达唑联合小剂量地塞米松治疗效果佳.
对北京市 1 例内脏利什曼病病例开展流行病学调查,确定感染来源,制定防控措施.收集病例就诊资料,在其感染地使用诱蛉灯开展白蛉监测、调查病犬信息,对病例和病犬骨髓液样本进行涂片、PCR检测、基因测序;对捕捉到的中华白蛉进行PCR检测.结果显示,病例以间断性发热、乏力就诊,医院以骨髓液涂片可见利什曼原虫无鞭毛体确诊为内脏利什曼病.感染地为门头沟王平镇,在该地区共捕获中华白蛉 4520 只,PCR结果阴性.病例、2 只病犬骨髓液利什曼原虫PCR阳性,且基因序列与婴儿利什曼原虫序列同源性分别为 94.44%、95.6%、93.23%,病犬骨髓液涂片查见利什曼原虫.结果表明,确定门头沟王平镇存在婴儿利什曼原虫感染传播链.需进一步开展白蛉、病犬分布范围调查,开展病例监测,多部门联合采取防控措施,防止内脏利什曼病疫情继续扩散.
了解北京市生态学国家级监测点病媒生物密度、物种构成、季节消长规律情况,为北京市病媒生物科学防控提供数据支撑,及时做好预测预警工作.成蚊采用诱蚊灯法和双层叠帐法,非成蚊分别采用勺捕法、布雷图指数法,蝇类仅采用笼诱法监测成虫,鼠类采用夹夜法和粘鼠板法,蟑螂采用粘捕法,恙螨采用鼠体恙螨采集法,蜱类采用体表检蜱法进行监测.结果显示,2022 年北京地区成蚊密度为 6.40 只/(灯·夜),帐诱指数为 2.71 只/(顶·h),幼蚊勺舀指数为 2.17,布雷图指数为 0.77.淡色库蚊为优势种,其次为白纹伊蚊,蚊类密度高峰期为 7、8 月,公园密度最高.成蝇密度为 3.42 只/笼,以麻蝇为优势物种,密度高峰在 6 月,绿化带密度最高.粘鼠板法鼠捕获率为 0.12%,均为小家鼠,均在重点行业生境捕获.蟑螂侵害率为 3.46%,蟑螂密度为 0.0288 只/张,德国小蠊是优势种,居民区蟑螂侵害率最高.鼠带恙螨率为 45.24%,在 10 月份达到峰值.蜱指数为 1.0,所捕获蜱均为长角血蜱.研究获得了 2022 年北京市主要病媒生物的种类、密度、构成和季节消长特点,为制定综合治理措施,有效降低病媒生物密度提供了依据.
测定湛江市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为登革热媒介防制提供科学用药指导.从湛江市霞山区、雷州市乌石镇和企水镇采集白纹伊蚊幼虫,在实验室繁殖 1～2 代,用WHO推荐的浸渍法测定抗药性指数.结果显示,霞山区白纹伊蚊对残杀威(2.99)、毒死蜱(2.19)、氯菊酯(8.09)和溴氰菊酯(14.32)产生抗性;雷州市乌石镇白纹伊蚊对残杀威(0.67)、毒死蜱(0.76)较敏感但对氯菊酯(5.53)、溴氰菊酯(5.66)产生抗性;企水镇白纹伊蚊对溴氰菊酯(21.68)达到了高抗水平,对残杀威(2.46)、氯菊酯(5.38)具有一定抗性,对毒死蜱(1.25)较敏感.结果表明,毒死蜱药效较好,雷州市乌石镇和企水镇白纹伊蚊都对其敏感;3 个地区白纹伊蚊对溴氰菊酯产生较高抗性,尤其是企水镇达到高抗水平.
2018-2022 年开展常州市蚊媒密度、种群特征及季节性消长研究,为常州市蚊虫密度控制及蚊媒传染病的防制提供科学依据.在全市各区(县)选择不同生境包括:居民区、公园、医院、农户及牲畜棚等,采用诱蚊灯法对成蚊进行监测.结果显示,2018-2022 年常州市各区(县)共捕获蚊虫50833 只,牲畜棚蚊密度最高,为 3.31 只/(灯·夜).不同年份中,2018 年蚊密度最高,达 1.75 只/(灯·夜).2021年蚊密度消长呈单峰曲线形,9 月是高峰,为 2.36 只/(灯·夜),其余年份均呈双峰曲线,高峰为 7、9月.不同生境中蚊种构成比不同,其中居民区、公园、医院优势蚊种为淡色库蚊,农户和牲畜棚以三带喙库蚊为优势蚊种.常州市蚊虫种群总构成比以淡色库蚊最高(43.71%),其次为三带喙库蚊(27.08%).蚊虫密度调查可以为本地区蚊虫防治提供可靠依据,应进一步提高蚊虫密度监测水平,根据监测结果及时采取有针对性的蚊虫控制措施,切实降低本地区蚊虫密度及蚊媒传染病的传播风险.
探讨我国疟疾消除后,输入性疟疾防控策略的应用及保有实验室检测能力的重要性.在接诊国外输入疫情实战中,评价经典的显微镜检与荧光定量PCR检测疟原虫感染效能.2022 年 7 月 28 日几内亚务工归国人员在北京新冠肺炎隔离点集中隔离,8 月 1 日检出首例病例,收集同航班人员抗凝血样,采用流行病学研究方法的筛查一致性检验,对所有人员同时进行显微镜检和荧光定量PCR检测.结果显示,126 名归国人员中,17 例显微镜检发现疟原虫,感染率 13.5%.10 例荧光定量PCR阳性,感染率 7.9%,χ2= 2.03,P>0.05,两种检测方法无统计学差异.粗一致率为 94.4%,Kappa值 0.70,属于中度一致.原虫密度低的感染者荧光定量PCR检测容易漏检.结果表明,我国疟疾消除后,带虫回国人员具有再传播风险.保持显微镜检能力可以做到早发现、早治疗,是控制疟疾输入再传播的有效手段.
教学评价是人才培养质量监测工作的核心.新冠疫情期间,由于线上教学成为人才培养的主要手段,首都医科大学寄生虫学教研室在建设人体寄生虫学在线课程的同时,也建立了相应的在线教学评价体系.本文通过以课堂表现、课后思考题、阶段性单元测试、形态学绘图、设计性实验报告、虚拟仿真在线实验考核等形式为主的过程性评价和以期末在线考试为主的总结性评价相结合的方式对学生进行考核评价,并通过问卷调查反馈学生在线学习效果和教学改进意见.文章就线上教学评价体系的构建和应用的体会进行了总结,以期充分发挥教学评价的评定、反馈和督导功能,提升人才培养质量.
胞内共生菌Wolbachia在昆虫生理生殖和天然免疫方面发挥着重要作用,蚊虫体内的Wolbachia密度与其抗病毒作用有很强的相关关系.本研究建立了一种利用四环素处理幼虫降低致倦库蚊共生Wolbachia密度的方法,并采用实时荧光定量PCR进行了效果评估.结果显示,使用 0.05 mg/mL四环素处理致倦库蚊海口株和温州株,处理后Wolbachia密度中位数分别下降2729 和3507 倍;卵巢及其余组织的Wolbachia密度均下降至 0.001 以下,其中,卵巢中Wolbachia密度下降825629 倍.可见,0.05 mg/mL四环素处理幼虫能显著降低蚊虫体内Wolbachia密度,为后续清除Wolbachia、探究Wolbachia对致倦库蚊感染和传播病毒的影响提供了技术基础.
为测定和分析贵阳厌蚋Simulium guiyangense Chen,Liu and Yang,2016 全线粒体基因组序列,明确蚋科昆虫的遗传多样性,探究其系统地位及蚋科昆虫内部的系统发育关系,本研究对贵阳厌蚋的线粒体基因组进行测序和注释,比较分析了已公布的蚋科昆虫线粒体基因组特征结构,并基于不同的数据集和方法对其系统发育关系进行了重建.结果显示,贵阳厌蚋线粒体基因组序列总长为 16491 bp(GenBank登录号:ON227412),共包含 13 个蛋白质编码基因(PCGs)、22 个tRNA基因、2 个rRNA基因和 1 个控制区.A、T、G、C碱基的含量分别为 37.63%、35.59%、11.18%、15.60%.除COI使用TTG作为起始密码子外,其余均以ATN作为起始密码子.除ND4 使用TAG作为终止密码子外,其余均采用TAA作为终止密码子.蚋科昆虫的蛋白质编码基因具有明显的AT偏向性,tRNASer(AGN)因缺少DHU臂均不能形成典型的三叶草结构,16S rRNA、12S rRNA 多数位点变异率为 0～25%.系统发育结果支持蛙蠓科 Corethrellidae 与蚊科Culicidae为姐妹群关系,奇蚋科Thaumaleidae和蚋科Simuliidae为姐妹群关系,蚋亚属Simulium为并系,与短蚋亚属Odagmia和厌蚋亚属Boophthora构成了布蚋亚属Byssodon的姐妹群.
家蝇是公共卫生和畜牧业的重要害虫,抗药性已成为家蝇有效控制的重要障碍.以往的研究表明,家蝇羧酸酯酶MdαE7 某些位点的突变可以导致对有机磷和拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性,但我国家蝇种群MdαE7 基因突变的类型、分布和不同等位基因的分子进化关系等相关信息还非常缺乏.本研究检测了我国5 个省份家蝇样品的羧酸酯酶MdαE7 基因突变的类型和分布状况,并对普遍存在的 251 位点突变的进化做了起源分析.结果表明,我国家蝇普遍存在MdαE7 G137D和W251L/S抗性突变,不同地区的抗性等位基因频率有所不同.除了常见的G137D和 W251L/S外,在我国家蝇中还发现了 4 个其他氨基酸替换,即Y148F、P157S、S250T和 E273D.基于 55 条MdαE7 基因片段的DNA 序列,鉴定出 8 种不同的单倍型.单倍型的分子进化分析表明MdαE7251 位点的突变具有不同的进化起源.
