Background White-light endoscopy (WLE) is a main and standard modality for detection of early gastric cancer (EGC). The detection rate of EGC is not satisfactory so far. In this single-center retrospective study we developed a convolutional neural network (CNN)-based system to automatically detect EGC in WLE images.Methods An EGC detecting system was constructed based on the CNN architecture EfficientDet. We trained our system with a data set including 4527 images from 130 cases (cancerous images, 1737; noncancerous images, 2790). Then we tested its performance with a data set including 1243 images from 64 cases (cancerous images, 445; noncancerous images, 798).Results For case-based analysis, our system successfully detected EGC in 63 of 64 cases and the sensitivity was 98.4%. For image-based analysis, the accuracy was 88.3%. The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value were 84.5%, 90.5%, 83.2% and 91.3%, respectively. The most common cause for false positives was gastritis (57.9%). The most common cause for false negatives was that the lesion was too small with a diameter of 10 mm or less (44.9%).Conclusion Our CNN-based EGC detecting system was able to achieve satisfactory sensitivity for detecting EGC in WLE images and shows great potential in assisting endoscopists with the detection of EGC.
目的 利用Toll样受体4(TLR4)抑制剂(TAK-242)探讨TLR4在对乙酰氨基酚(APAP)致小鼠急性肝损伤早期中的作用.方法 58只雄性癌症研究所(ICR)小鼠随机划分为对照组(正常对照组、溶剂对照组、抑制剂对照组)和实验组(APAP 4 h组、APAP+TAK-2424 h组、APAP 12 h组、APAP+TAK-24212 h组).实验组小鼠给予单剂量腹腔注射APAP(300 mg/kg),TAK-242(3 mg/kg)于APAP注射前3 h进行腹腔注射.比较各组小鼠的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平和肝指数;HE染色显示肝脏组织病理变化;免疫组化法检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平;Western blot检测TLR4、HMGB1和核因子-κB(NF-κB)蛋白水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6基因水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织IL-6含量.结果 HE染色显示APAP 4 h组小鼠肝组织出现肿大充血,12 h组出现典型的小叶中心性坏死,且APAP+TAK-2424 h和12 h组的肝脏坏死程度均较同时间点APAP组减轻.相较于正常对照组,APAP 4 h组的血清ALT水平、肝指数、TLR4、HMGB1、NF-κB蛋白含量和MCP-1、IL-1β、TNF-α、IL-6基因水平及肝组织IL-6含量升高;APAP 12 h组的血清ALT水平、肝指数、HMGB1蛋白含量和肝组织IL-6含量升高.相较于APAP 4 h组,APAP+TAK-2424 h组的血清ALT水平、肝指数、TLR4、HMGB1、NF-κB蛋白含量和MCP-1、IL-1β、TNF-α、IL-6基因水平及肝组织IL-6含量降低.相较于APAP 12 h组,APAP+TAK-24212 h组TLR4、HMGB1蛋白含量和MCP-1、IL-1β、TNF-α基因水平降低.结论 抑制TLR4可能通过抑制TLR4/HMGB1通路,从而减轻APAP诱导的小鼠急性肝损伤早期的炎症反应.
目的 构建可以稳定负载并有效释放siRNA的叶酸改性聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(FA-TPGS)纳米材料并观测其对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞毒性和剪切型X-框结合蛋白1(XBP1s)表达水平的影响.方法 将FA-TPGS与罗丹明B(RhB)标记的XBP1 siRNA按照5∶1比例混合均匀得到包被XBP1 siRNA的纳米复合物(FT@XBP1).通过透射电镜、动态光散射、紫外可见光谱和荧光光谱分析对FT@XBP1表征,同时计算XBP1 siRNA从FT@XBP1纳米载体中释放的药量.应用扫描电镜(SEM)、CCK-8以及流式细胞术检测FT@XBP1的细胞毒性,并应用Western blot法检测FT@XBP1对小鼠巨噬细胞RAW264.7中XBP1s的抑制作用.结果 FA-TPGS与siRNA具有良好的结合作用,其中FT@XBP1的平均粒径为(200±20)nm.相对释放结果提示,酸性环境(pH 5.0)有利于siRNA从FT@XBP1中释放.CCK-8和凋亡实验均显示,FT@XBP1对RAW264.7细胞的增殖和凋亡影响较小,且FT@XBP1处理可显著抑制RAW264.7中XBP1s蛋白的表达(P<0.001).结论 叶酸修饰的TPGS纳米载体可有效包载XBP1 siRNA,抑制巨噬细胞XBP1s表达且细胞相容性良好.
目的 探索单绒双胎及双绒双胎选择性胎儿生长受限(sIUGR)患者的一般特征、母胎结局的异同点,并针对双绒双胎sIUGR患者不同分型进行组间比较,以期为临床诊疗和预后评估提供有价值的信息.方法 收集住院分娩的符合双胎选择性生长受限诊断的双胎妊娠患者共89例并采集其临床资料信息,通过t检验或秩和检验或卡方检验进行统计学分析.结果 双绒双胎孕妇多行辅助生殖技术,单绒双胎孕妇以自然受孕为主;母体结局方面:双绒双胎分娩孕周显著晚于单绒双胎,且双绒双胎妊娠期糖尿病发病率也高于单绒双胎;胎儿结局方面:双绒双胎孕妇分娩的正常胎儿的新生儿评分(Apgar评分)≥8分占比、体质量、Ⅰ型sIUGR占比显著高于单绒双胎.此外,单绒双胎的脐带帆状附着及小份额胎盘发生率也显著高于双绒双胎.双绒双胎不同sI-UGR分型比较中表明Ⅱ/Ⅲ型sIUGR分型的孕妇中有1例发生宫内死亡,而Ⅰ型中并未发生.Ⅰ型sIUGR分型的孕妇分娩的两个新生儿的Apgar评分≥8分比例及小胎儿体质量显著高于Ⅱ/Ⅲ型.结论 sIUGR中双绒双胎的母胎预后明显优于单绒双胎,在临床管理中应给予单绒双胎更多的关注.双绒双胎中Ⅱ/Ⅲ型的妊娠结局更复杂,应密切监测,及时采取干预措施.
Beckwith-Wiedemann综合征(BWS)是一种过度生长和胚胎性肿瘤易感性疾病,与染色体11p15.5区域印记基因簇表达异常相关.临床上主要表现为巨舌、腹壁缺陷(脐膨出、脐疝)、偏侧增生、内脏肿大、耳朵特殊折痕、新生儿低血糖、胚胎性肿瘤易感等.BWS的诊断主要根据出生后新生儿的临床表型及基因检测,产前诊断存在一定困难,现通过对相关文献的总结与分析,对BWS的产前诊断进行综述.
目的 构建SHP2E76K突变的小鼠模型,利用其间充质干细胞(MSC)研究激活突变引发的SHP2蛋白相分离对其细胞增殖能力的影响及其机制.方法 将Ptpn11E76K-neo/+的C57BL/6J小鼠与Mx1-cre工具鼠杂交,得到所需要的Mx1-cre;Ptpn11+/+和Mx1-cre;Ptpn11E76K/+小鼠,并对后者注射pI-pC以诱导Cre酶的表达,使Ptpn11在骨髓MSC中突变.从Mx1-cre;Ptpn11+/+和Mx1-cre;Ptpn11E76K/+小鼠体内分离培养MSC,通过细胞免疫荧光染色确定所分离的细胞为MSC.以Ptpn11+/+的MSC为对照组,Ptpn11E76K/+的MSC为实验组,通过加药将两种细胞分成6组:Ptpn11+/+组;Pt-pn11+/++SHP099组;Ptpn11+/++ET070组;Ptpn11E76K/+组;Ptpn11E76K/++SHP099组;Ptpn11E76K/++ET070组.免疫荧光染色法观察6组细胞内SHP2蛋白相分离的差异,Western blot法检测6组MSC中SHP2蛋白表达水平的差异.CCK-8检测相分离被影响之后细胞增殖能力的改变.提取实验组与对照组细胞总蛋白通过Western blot法检测ERK/p-ERK、AMPK/p-AMPK、mTOR/p-mTOR等蛋白的表达水平.结果 小鼠基因型鉴定证实得到Mx1-cre;Pt-pn11E76K/+和Mx1-cre;Ptpn11+/+小鼠并分离出原代Pt-pn11+/+和Ptpn11E76K/+骨髓MSC.与Ptpn11+/+组相比,Pt-pn11E76K/+组的SHP2蛋白产生更多的相分离冷凝物;与Pt-pn11E76K/+组相比,Ptpn11E76K/++SHP099组和Ptpn11E76K/++ET070组SHP2蛋白凝聚成的冷凝物在均明显减少;Western blot检测各组SHP2蛋白表达水平差异无统计学意义;与Pt-pn11+/+组相比,Ptpn11+/++SHP099组和Ptpn11+/++ET070组MSC的增殖能力下降,细胞内p-ERK和p-mTOR蛋白表达减少,p-AMPK蛋白表达增加;与Ptpn11E76K/+组相比,Ptpn11E76K/++SHP099组和Ptpn11E76K/++ET070组MSC的增殖能力下降,细胞内p-ERK和p-mTOR蛋白表达减少,p-AMPK蛋白表达增加.结论 SHP2的相分离通过刺激AMPK-mTOR信号通路的表达参与了SHP2E76K激活突变的MSC的增殖能力改变.
目的 调查城市与山村青少年肠道菌群及代谢产物的差异,探究不同生活环境和行为方式的青少年肠道微生态及其对健康的意义,旨在指导青少年建立更为科学健康的生活饮食方式.方法 收集合肥市中学生粪便标本(n=14)和绩溪县山村中学生粪便标本(n=18),两组学生年龄均在13.0～13.5岁.对粪便样本进行16S核糖体DNA鉴定(16S rDNA)、非靶向代谢产物检测(LC-MS),然后进行生物信息学分析.结果 城乡两地青少年肠道菌群差异显著,城市学生以Lachnoclostridium菌、粪厌氧棒状杆菌(Anaerostipes)菌属占优势,这些细菌占比增高与肠癌、动脉粥样硬化以及抑郁症等疾病有关;而在山村青少年,优势细菌是瘤胃球菌属(Ruminococcaceae UCG-002)、巴恩斯菌属(Barnesiella)和真杆菌属(Eubacterium)等,这些细菌与胆汁酸、短链脂肪酸、脂质代谢、碳水化合物分解等代谢相关,对维持免疫平衡和生理功能发挥重要作用.两组代谢产物也存在显著的差异,主要表现在花生四烯酸代谢、血小板激活、5-羟色胺代谢、维生素吸收、初级胆汁酸代谢等通路上.结论 城市和山村青少年肠道菌群和代谢产物具有显著差异;山村青少年因生活饮食方式更合理而拥有更健康的肠道菌群分布和代谢产物.
目的 探讨筛选程序性死亡受体-1(PD-1)/程序性死亡受体配体-1(PD-L1)信号通路表达阳性的骨肉瘤患者的无创检测手段.方法 通过瘤块成瘤方法建立人骨肉瘤细胞(OS-732)皮下荷瘤鼠动物模型,毒性试验验证PD-L1抗体对小鼠脏器的毒性,进一步合成124 I-anti-PD-L1单克隆抗体分子探针,在OS-732荷瘤鼠尾静脉注射18.5 MBq 124 I-anti-PD-L1探针开始进行OS-732骨肉瘤的微型正电子发射断层显像/计算机断层成像(Micro-PET/CT)显像.结果 OS-732骨肉瘤模型成功构建,免疫组化显示OS-732骨肉瘤存在PD-L1蛋白的表达,Micro-PET/CT在不同的时间点(注射探针后2、24、48 h)成功显像OS-732骨肉瘤,实现对骨肉瘤PD-L1的无创实时观测.结论 124I-anti-PD-L1单克隆抗体分子探针可以成功靶向OS-732骨肉瘤的PD-L1受体,并呈现清晰的免疫成像,从而实现无创筛选PD-L1阳性表达的骨肉瘤患者.
目的 探讨miR-26a-3p对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤的影响及其机制.方法 取对数生长期H9c2心肌细胞进行缺氧(1％O2)6 h,复氧不同时间(2、4、8、12 h)建立细胞H/R模型,另设常氧组,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性;比色法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-26a-3p和生存素(Survivin)mRNA表达水平;Western blot检测细胞中Survivin蛋白表达水平.将miR-26a-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor NC、Survivin基因siR-NA干扰质粒(si-Survivin)及其阴性对照si-NC共转染至H9 c2细胞中,随后进行H/R干预,CCK-8检测各组细胞增殖水平;比色法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及上清液中LDH水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平;Western blot检测各组细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)和Survivin蛋白表达水平;双荧光素酶测定miR-26a-3p和Survivin基因的靶向关系.结果 与常氧组细胞比较,随着复氧时间的延长,H9 c2细胞增殖活性、Survivin mRNA和蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),而LDH及miR-26a-3p表达水平逐渐升高(P<0.05).下调miR-26a-3p表达可提高H/R暴露下H9c2细胞增殖活性、SOD活性、Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05),同时降低MDA含量、LDH释放量、凋亡率、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平(P<0.05);而Survivin缺失可明显逆转miR-26a-3p inhibitor对H/R诱导下H9c2细胞的保护作用.双荧光素酶报告基因实验表明Survivin是miR-93-5 p的靶基因.结论 miR-26a-3p在H/R诱导的心肌细胞损伤中高表达,抑制miR-26a-3p表达可通过靶向上调Survivin表达抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激.
目的 筛选对阴道加德纳菌增殖有抑制功能的阴道乳杆菌菌株,探讨阴道乳杆菌菌株抑制加德纳菌的可能机制,为开发用于细菌性阴道病(BV)治疗的益生菌菌株提供先决条件.方法 分别从BV患者和健康女性阴道分泌物中分离阴道加德纳菌菌株和乳杆菌菌株,通过spot on lawn法筛选有抑制阴道加德纳菌增殖的乳杆菌菌株,用双层牛津杯法对比乳杆菌菌液、上清液、菌体对阴道加德纳菌菌株抑制作用的差别.结果 从20例健康女性阴道分泌物中获得62株阴道乳杆菌菌株,分属于6个菌种,其中18株有抑制阴道加德纳菌的作用.通过对18株有抑菌效应的乳杆菌菌株的不同成份(菌液、菌体、上清液)研究表明,其菌液、菌体和上清液均有抑菌效应,菌液的抑菌效应明显大于上清液组.上清液经过蛋白酶K处理之后,8份标本的抑菌效果消失,10份标本的抑菌效果明显减弱.结论 该研究共纯化和鉴定阴道乳杆菌菌株62株,其中18株具有抑制阴道加德纳菌增殖的功能.产生蛋白类抑菌物质可能参与了阴道乳杆菌抑制阴道加德纳菌增殖的机制.
目的 探讨在内吗啡肽2(EM2)的镇痛过程中,μ-阿片受体(MOR)的表达变化及胞内囊泡转运对其变化的影响.方法 成年雄性SD大鼠,随机分为3组:正常对照组、病理性痛组和药物组,病理性痛为坐骨神经分支选择性损伤(SNI)诱导的神经病理性痛(NP).药物组为鞘内注射EM2的NP大鼠.采用免疫荧光单标染色和免疫印迹方法检测MOR总蛋白和磷酸化蛋白以及Rab7蛋白表达量的变化,采用免疫荧光双标染色方法检测MOR/Rab7和MOR/LAMP1免疫阳性标志物的表达变化.结果 与正常对照组比较,病理性痛组大鼠背根神经节(DRG)内MOR总蛋白和磷酸化蛋白的表达量降低(P<0.05),Rab7蛋白的表达量明显增高(P<0.05);MOR/Rab7免疫阳性标志物占Rab7或MOR、MOR/LAMP1免疫阳性标志物占LAMP1或MOR阳性标志物的比例均增高(P<0.05).鞘内多次注射EM2后,病理性痛大鼠的后足缩足反应阈值明显增高(P<0.01),DRG内MOR总蛋白和磷酸化蛋白的表达量增高(P<0.05),Rab7的表达量降低(P<0.05).MOR/Rab7阳性双标产物占Rab7或MOR阳性标志物、MOR/LAMP1阳性双标产物占LAMP1或MOR阳性标志物比例均降低(P<0.05).结论 在镇痛过程中,EM2抑制SNI的NP大鼠DRG内Rab7的表达,减少MOR向溶酶体运输,促进MOR复敏.
目的 探究成人社区获得性肺炎(CAP)患者氧合指数(P/F)对临床结局的预测价值.方法 提取AHCCDM重症数据框中符合入组条件的CAP者493例,根据出院时是否存活分为生存组(n=405)和死亡组(n=88)单因素比较分析;多因素Logistic回归分析影响CAP患者住院死亡相关的独立危险因素;采用限制性立方样条曲线(RCS)评估P/F与住院死亡风险的变化趋势.结果 多因素Logistic回归分析显示影响CAP患者住院死亡的独立危险因素包括:急性及慢性健康评分(ApacheⅡ评分)(OR=1.11,95％CI:1.07～1.15,P=0.02)、P/F(OR=1.70,95％CI:1.03～2.82,P=0.04),血红蛋白(Hb)和HCO3-浓度P>0.05差异无统计学意义;限制性立方样条回归分析显示:P/F与院内病死率呈非线性反应关系(非线性检验P<0.001),P/F为250 mmHg是住院死亡关联分析的切点.P/F<250 mmHg时,P/F每上升1 mmHg,住院死亡风险降低1％,HR:0.99(0.99～1.00),P<0.001;P/F>250 mmHg时CAP患者与住院病死率无关,HR:1.00(1.00～1.01),P<0.001,即其他因素占主导作用.结论 明显降低的P/F对于社区获得性肺炎患者具有较高的死亡预测价值.
目的 探究长链非编码RNA LINC00092对神经胶质瘤增殖、迁移和侵袭的影响.方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因型-基因表达量关联数据库(GTEx),分析LINC00092在泛癌中的表达情况以及对神经胶质瘤预后的影响.另外,构建了LINC00092过表达质粒.通过细胞增殖实验、迁移实验(Transwell)和流式细胞术,检测LINC00092对神经胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.最后,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测过表达LINC00092对胰岛素样生长因子2结合蛋白1(IGF2BP1)表达水平的影响.结果 公共数据库的分析显示LINC00092在肿瘤中普遍低表达,且LINC00092与多形成性胶质细胞瘤(GBM)和脑低级别胶质瘤(LGG)的预后存在相关性.体外实验表明过表达LINC00092显著降低了神经胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,神经胶质瘤细胞的凋亡增加.过表达LINC00092减低了IGF2BP1的表达水平.结论 LINC00092可能通过靶向IGF2BP1抑制神经胶质瘤的增殖、迁移和侵袭,促进神经胶质瘤细胞的凋亡.
目的 运用磷酸钙纳米颗粒包裹DNA转染皮肤鳞癌细胞,以靶向干扰LIM结构域蛋白4(LMO4)表达,探讨转录因子LMO4在皮肤鳞癌中作用和机制.方法 采用逆转录-定量PCR技术(RT-qPCR)、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹技术检测目的分子表达.利用经典方法制备磷酸钙纳米颗粒,包裹含有靶向干扰LMO4的shRNA表达载体,转染人皮肤鳞癌细胞A431.采用噻唑蓝(MTT)方法检测细胞增殖能力;运用流式细胞分析技术检测细胞周期变化.结果 LMO4在皮肤鳞癌组织和A431细胞中高水平表达.磷酸钙纳米颗粒与DNA的最佳包裹比例为10:1.此纳米颗粒包裹的DNA可以有效转染A431细胞并有效干扰LMO4表达,与脂质体转染后的干扰效率相比,差异无统计学意义(P=0.21).在A431细胞中干扰LMO4后的24、36和48 h,细胞的增殖能力较对照组均显著降低.细胞周期分析显示:干扰组G0/G1期细胞为39.82％±1.86％,与对照组G0/G1期细胞(30.76％ ±1.96％)相比,差异有统计学意义(P=0.003);干扰组的S期细胞为39.56％±0.65％,与对照组的S期细胞(50.65％±0.62％)比较,差异有统计学意义(P=0.002).干扰LMO4表达可以抑制细胞周期素蛋白E和周期素蛋白激酶2(CDK2)的表达.结论 磷酸钙纳米颗粒能有效包裹DNA,并具有较高的转染效率;干扰LMO4表达可抑制细胞周期素蛋白E和CDK2的表达,抑制细胞增殖.
目的 分析circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达与临床意义,探究circ-RACGAP1对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制.方法 通过TCGA数据库探究circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达,分析circ-RACGAP1表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法分析细胞系5637、T24、J82、RT-4、UM-UC-3中circ-RACGAP1表达.通过脂质体转染技术将circ-RACGAP1敲降质粒转染T24细胞.克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别分析敲降circ-RACGAP1对T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响.采用deepBase、Circbank、Cir-cInteractome、circRNABase数据库和荧光报告系统验证circ-RACGAP1和miR-4324之间的靶向结合.qPCR检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中miR-4324表达的影响.采用Western blot法检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中Rac-GTP酶激活蛋白1(RACGAP1)蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响.结果 膀胱癌组织中circ-RACGAP1呈高表达(P<0.01),其表达随着患者临床分期恶性程度增高而升高(P<0.01).膀胱癌细胞系中circ-RACGAP1表达明显高于人正常膀胱上皮细胞(均P<0.01).与对照组比较,sh-sh-circ-RACGAP1组T24细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(均P<0.01).circ-RACGAP1可靶向抑制miR-4324的表达(P<0.01).与对照组比较,sh-circ-RACGAP1组T24细胞中RACGAP1蛋白表达水平降低(P<0.01),PI3 K/AKT信号通路蛋白磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3 K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、核因子κB(NF-κB)表达水平均降低(均P<0.01).结论 膀胱癌组织和细胞系中circ-RACGAP1呈高表达,敲降circ-RACGAP1能够抑制T24细胞的恶性生物学行为,circ-RACGAP1是通过抑制miR-4324表达激活PI3K/AKT信号通路来发挥作用.
目的 探讨低氧、高糖单因素和低氧高糖复合因素对大鼠肾小球足细胞焦亡的影响.方法 体外培养大鼠肾小球足细胞,随机分为对照组、高糖组、低氧组及低氧高糖组,EdU法检测各组细胞增殖情况,透射电镜观察细胞核与线粒体形态及大小的变化,Western blot法检测焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)及炎症因子白细胞介素-1β前体(Pro-IL-1β)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的表达水平,分析低氧和高糖环境对大鼠肾小球足细胞焦亡的影响.结果 EdU结果显示低氧和高糖抑制了大鼠肾小球足细胞的增殖能力(P<0.05).透射电镜结果提示低氧和高糖条件促进大鼠肾小球足细胞焦亡的发生.West-ern blot显示低氧和高糖条件促进大鼠肾小球足细胞焦亡,使焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD的表达增加,其中低氧高糖组焦亡蛋白的表达量增加最为显著(P<0.05).同时也促使炎症因子Pro-IL-1β、IL-1β、IL-18的表达增加(P<0.05).结论 低氧、高糖条件可诱导大鼠肾小球足细胞发生焦亡,其中的机制之一可能是通过影响NLRP3-Caspase-1-GSDMD及其下游炎症因子而发挥作用.
目的 观察电针与双歧杆菌对单纯性肥胖大鼠生存状态、肠源性信号物质水平及脂代谢的影响,并比较其优效性.方法 购入体质量40～60 g范围内的4周龄SPF级SD大鼠60只,10只(雌雄各半)予普通饲料设为空白组,50只(雌雄各半)予高脂饲料制备单纯性肥胖大鼠模型,8周后高脂组造模成功的30只肥胖大鼠随机分为肥胖模型组、电针组、双歧杆菌组,每组10只(雌雄各半),治疗组分别予电针、双歧杆菌溶液灌胃治疗4周,实验期间固定时间称取大鼠体质量;治疗周期结束后采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肥胖大鼠5-羟色胺(5-HT)、组胺(HIS)水平;采用银染色法检测肠嗜铬细胞(ECC)水平;采用生化法检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平.结果 干预后,电针组与双歧杆菌组较模型组大鼠体质量、结肠ECC、结肠与下丘脑5-HT、HIS、血清TC、TG、LDL水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),血清HDL水平虽升高,但差异无统计学意义,且电针组较双歧杆菌组各指标更接近于空白组.结论 电针对单纯性肥胖大鼠疗效优于双歧杆菌.电针可能是通过调整单纯性肥胖大鼠肠源性信号物质刺激下丘脑机体做出反应减少摄食、加快脂代谢,减缓肥胖.
目的 观察创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达及脑区之间的差异变化.方法 采用改良Feeney自由落体法制备大鼠TBI模型,将其随机分为假手术组(Sham组)和模型组(TBI组).采用免疫组化染色、Western blot和RT-qPCR实验方法,观察TBI后不同脑区活化星形胶质细胞的形态学变化以及GFAP表达情况.结果 免疫组化染色结果显示,TBI右侧各脑区的星形胶质细胞均发生激活,并且波及到对侧(左侧)的脑区仅有皮质1区和中脑区.RT-qPCR结果显示,TBI右侧各脑区GFAP的mRNA均出现高表达,并波及到对侧的皮质和中脑区.Western blot结果显示,TBI右侧各脑区GFAP蛋白均出现高表达,并波及到对侧的中脑区.结论 TBI会引起右侧各脑区的星形胶质细胞激活以及GFAP表达增多,同时会累及对侧(左侧)的皮质1区和中脑区.
目的 研究乳源五肽脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-异亮氨酸-脯氨酸(PGPIP)缓解小鼠慢性酒精性肝损伤及其相关的分子机制.方法 40只C57BL/6小鼠,随机均分为对照组、模型组、谷胱甘肽(GSH)组、PGPIP组.采用10 d Lieber-Decarli酒精饲料喂养加1次急性酒精灌胃的方法建立小鼠慢性酒精性脂肪肝模型,造模的同时给予药物干预.根据已有的基因表达综合(GE O)数据库中RN A测序数据,采用聚类热图对肝脏内质网应激相关基因差异表达分析.肝脏苏木素-伊红(HE)染色分析各处理组对小鼠酒精性肝损伤的病理学影响,油红O染色分析各处理组对小鼠肝脏脂滴积累的影响.透射电子显微镜分析酒精代谢引起的脂滴积累对肝细胞显微结构的影响并验证PGPIP的作用效果.蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激相关信号转导蛋白表达变化.结果 PGPIP组病理学检查类似正常对照组,小鼠肝脏损伤明显减轻.模型组小鼠肝脏中有明显的脂滴积累,表现为大小不同程度的混合型脂滴,PGPIP处理后明显减少酒精诱导的肝脏脂滴积累.PGPIP对PERK-eIF2α-ATF4通路有较大影响,且对转录激活因子6(ATF6)和Cleaved Caspase 3蛋白的表达有显著性的效果.结论 五肽PGPIP能缓解小鼠慢性酒精性脂肪肝和肝损伤,其机制可能是通过减少肝细胞中的脂滴积累,并且减少内质网应激和肝细胞凋亡从而发挥作用.
目的 基于宫腔粘连松解术(TCRA)后患者冻融胚胎移植(F-ET)的基本信息建立活产预测模型.方法 选取491个TCRA术后进行F-ET治疗的周期,以7:3随机分为训练集(n=347)和验证集(n=144),首先基于训练集数据通过单因素逻辑回归筛选出相关影响因素,再纳入多因素逻辑回归分析建立列线图模型,并对预测模型进行校准与验证.结果 年龄、体质指数(BMI)、流产史、子宫内膜厚度与活产显著相关.根据上述指标建立列线图,训练集的ROC曲线下面积为0.713(95％CI:0.519～0.815),Hosmer-Lemeshow拟合优度检验结果为x2=7.062,P=0.530,校准曲线观察斜率接近1,验证集的ROC曲线下面积为0.609(95％CI:0.660～0.561).模型具有良好的拟合效果和稳定性.结论 基于年龄、BMI、流产史和子宫内膜厚度建立的列线图模型可较好地预测TCRA术后患者F-ET的活产概率.
