ε-聚赖氨酸是一种高安全性天然食品防腐剂,具有抑菌谱广、抑菌活性强的特点.该研究以大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为指标菌,利用荧光探针5-氰基-2,3-二甲苯基氯化四唑检测菌体细胞在ε-聚赖氨酸处理前后的代谢活性,计算相对活性,考察ε-聚赖氨酸的杀菌效果,利用Linear和Weibull模型拟合杀菌动力学过程.结果表明:液体体系条件下低质量分数(0.005%)ε-聚赖氨酸与大肠杆菌作用15 min,活性下降至起始活性的86.33%,120 min时为73.44%;ε-聚赖氨酸作用质量分数为0.025%时,处理15 min时活性为起始活性的21.06%,120 min时仅为3.61%.ε-聚赖氨酸杀灭枯草芽孢杆菌的效果与大肠杆菌相近.动力学分析显示ε-聚赖氨酸杀菌效果的Linear模型拟合度低,R2值低于0.70,Weibull模型在测试质量分数范围可精确拟合杀菌动力学过程,R2值大于0.97.该研究表明基于细胞代谢活性指标,Weibull模型可准确拟合ε-聚赖氨酸杀菌动力学过程.
该研究以米糠为原料,分别采用挤压膨化、米根霉发酵及发酵-挤压膨化技术处理制备米糠可溶性膳食纤维(Soluble Dietary Fiber,SDF),分析其SDF的微观结构、吸收峰特征、分子量和单糖组成,并进行抗氧化活性评价.结果表明,3种加工方式均显著增加了SDF含量,较未处理的SDF分别提高了51.49％、108.63％、118.15％;经加工处理后的米糠SDF的微观结构更为疏松多孔且分子量更低;4种米糠SDF具有相似的特征吸收峰,但其吸收峰强度存在一定差异.与未处理的米糠SDF相比,米根霉发酵及其联合挤压膨化处理的米糠SDF出现岩藻糖结构片段,且其鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖和半乳糖含量比例更高,而经挤压膨化处理后其葡萄糖含量更高;此外,挤压膨化和发酵的米糠SDF具有更高抗氧化活性,但二者联合处理的SDF抗氧化活性无显著差异.综合比较发现经三种加工处理的米糠SDF具有显著的结构差异及增强抗氧化活性能力,其中发酵处理对米糠SDF的影响最显著,该研究对开发米糠加工新工艺以制备高活性米糠SDF具有指导意义.
探究了四株益生菌对非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)的改善作用.30只小鼠随机分为正常组(N)、高脂饮食(HFD)模型组(M)及益生菌干预组四组:植物乳杆菌 LP45(Lactobacillus plantarum,LP)、嗜酸乳杆菌La28(Lactobacillus acidophilus,La)、鼠李糖乳杆菌LR519(Lactobacillus rhamnosus,LR)和乳双歧杆菌BAL531(Bifidobacteriumlactis,Bal).正常组给予常规饲料喂养,其它组给予HFD喂养;同时益生菌组每天给予对应菌液灌胃21 d,对照组给等体量生理盐水;期间监测小鼠体质量和摄食量.检测内脏脂肪、肝脏生化指标、组织病理和炎症因子表达水平.与N组相比,M组摄食量、体质量及内脏脂肪均显著增加,高达8.74 g/d、33.30 g、0.71 g.较于M组,益生菌干预组小鼠的摄食量和内脏脂肪均明显降低,Bal、La、LR和LP组摄食量分别为6.97、6.91、5.94和6.59 g/d;内脏脂肪0.41、0.40、0.27和0.36 g;ALT、CHO、TG和MDA水平也显著下降;肝脂肪变性明显缓解;炎症因子ELF3 和TNF-α的mRNA及IL-6 的蛋白表达水平显著降低(P<0.05).体外,四株益生菌也表现出一定抗氧化和降脂活性,其中Bal抗氧化活性最高,达16.81%;La降脂活性最高,为46.40%.Bal、La、LP、LR可有效改善小鼠的NAFLD,其机制至少部分归因于其降脂、抗炎、抗氧化和保肝等生物学活性.
该研究根据《GB 4789.28-2013 食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量控制》(以下简称 GB 4789.28-2013)的检测要求,从我国菌种库中筛选出1株鼠伤寒沙门氏菌可等效于GB 4789.28-2013中的标准菌株(ATCC14028),用于评价培养基的质量.该研究联合15家验证机构用7株不同分离源的鼠伤寒沙门氏菌,依据GB 4789.28-2013的检验方法验证不同品牌的培养基,将生长率、选择性与ATCC41028一致性最高的菌株选为标准的等效质控菌株.为确保结果的可重复性和一致性,各实验均采用同品牌同批次的培养基进行验证,每株菌株均由至少 5 家单位进行验证.综合生长率与选择性的结果,ATCC41028 在各品牌培养基上均可良好生长,CMCC(B)50976与ATCC41028结果的一致性最高,而CMCC(B)50976最难进行培养或分离.同时,结果显示,不同品牌、不同人员、不同实验室环境下进行的培养基验证结果均有差异.工作组从 7 株鼠伤寒沙门氏菌中筛选出CMCC(B)50976作为GB 4789.28的质控菌株,可等效于国外的标准菌株(ATCC14028),新菌株更具有代表性,且减少了国外菌株运输过程中的生物风险.
The effect of Random Amplified Polymorphic DNA（RAPD） on rapid typing of Enterococcus species was explored. An typing system of Enterococcus was constructed by screening the template, single primer, double primer and RAPD reaction system. The standard of strain taping was established by typing 32 strains of Enterococcus. On this basis, 46 strains of Enterococcus were distinguished between species and this result was checked through testing the house-keeping genes rpo A. The results showed that the genomic DNA extracted by microwave-assisted meet needs. Optimum double primer reaction system is 12.5 μL 2×PCR Taq Mix, 1 μL Template DNA and primer, 9.5 μL dd H2O. Optimum double primer is Primer 1 and Primer 5. Enterococcus can be distinguished at 80% similarity by using this pair of primer. The pair of primers of Primer1 and Primer3 can propagate specific DNA segment of Enterococcus hirae at 500 bp, which can be used as the identification index of Enterococcus hirae, which can be used as an identification indicator for the rapid identification index of Enterococcus hirae.
