目的:采用网络药理学分析和实验验证相结合的方法,研究芪蛭通络胶囊对脑缺血再灌注损伤的治疗作用和作用机制.方法:利用网络药理学的方法获取芪蛭通络胶囊中的化学成分和潜在靶点并获得脑缺血再灌注病理过程相关的靶点,构建"中药-化合物-疾病网络图",同时对核心靶点进行京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes Genomes,KEGG)富集分析;采用线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉缺血90 min再灌注模型,观察芪蛭通络胶囊0.8、1.6、3.2 g/kg和阳性药尼莫地平30 mg/kg给药7 d后的治疗作用;采用神经行为学评分和矿场试验检测大鼠神经功能和运动能力;TTC染色、苏木素伊红(hematoxy-lin-eosin,HE)染色、尼氏染色检测以及酶联免疫吸附法检测脑组织损伤和相关指标的变化;Western Blot检测Toll样受体4/髓样分化因子/核因子 κB(toll-like receptor 4/myeloiddifferentiationfactor88/nuclear factor kappa-B,TLR4/MyD88/NF-KB)通路和 NOD 样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体相关蛋白的变化.结果:网络药理学分析揭示,芪蛭通络胶囊治疗脑缺血再灌注的主要活性成分包括常春藤素、异欧前胡素、芒柄花黄素等19种化合物,其中涉及磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinos-itol-3-kinase/protein serine threonine kinase,PI3K/AKT)信号通路、炎症信号通路、Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路等.实验研究表明,与模型对照组相比,芪蛭通络胶囊各组和尼莫地平30 mg/kg组均能明显改善脑缺血再灌注后大鼠神经功能和运动能力,减小缺血部位脑梗死体积(P＜0.05或P＜0.01),有效改善病理损伤,明显调控MyD88、NFκB、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase1)蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:网络药理学及实验验证表明芪蛭通络胶囊可能通过TLR4/MyD88/NFKB通路及NLRP3炎症小体治疗脑缺血再灌注损伤.

目的 采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法对脑震宁颗粒无机元素组成进行分析,为其产品质量均一性和安全性评价奠定基础.方法 脑震宁颗粒样品进行微波消解处理,采用ICP-MS法定量测定10批样本中18种无机元素的含量,通过Heatmaps图谱、Pearson相关系数图对结果进行分析;通过无机元素指纹图谱、主成分分析(PCA)结合聚类分析对质量均一性进行评价.结果 脑震宁颗粒中无机元素以K、Ca、P、Na、Mg、Fe为主,且不同元素含量之间存在着一定正相关性.As、Hg、Cd、Pb、Cu这5种重金属元素的限量符合《中国药典》2015年版限度规定.采用平均数和中位数法分别建立无机元素对照指纹图谱,从指纹图谱相似度、聚类分析、PCA结果来看,脑震宁颗粒无机元素的质量均一性较好.PCA结果显示,K、Mg、Sr、Mn、P、Pb等元素可能是影响脑震宁颗粒无机元素质量波动的特征元素.结论 本研究初步明确了脑震宁颗粒的无机元素组成,为其质量均一性和安全性评价奠定了基础.

脑震宁颗粒是由11味中药组成的复方制剂，临床主要用于治疗脑震荡、脑外伤综合征等。针对其复杂的物质组成，本研究采用UHPLC-Q Exactive轨道肼高分辨质谱建立了脑震宁颗粒化学成分的快速识别方法，通过分析色谱保留行为、精确分子质量、裂解碎片信息，结合文献及对照品数据对照，并借助Compound Discover 2.0自动指认，共鉴定出脑震宁颗粒中161个化合物，并对这些成分的来源进行了归属。所鉴定的成分包括环烯醚萜苷类9个、丁基苯酞类8个、黄酮及黄酮苷类26个、酚酸类8个、单萜苷类8个、生物碱类9个，以及有机酸、氨基酸、糖类等中药材共性成分。本研究首次对脑震宁颗粒的化学组成进行了全面表征，所构建的脑震宁化学成分物质组为其进一步的质量控制和药效物质基础研究奠定了基础。

目的 借助网络药理学技术预测脑震宁颗粒主要成分的潜在作用靶点,探讨其治疗脑外伤多成分-多靶点-多通路的作用机制.方法 依据反向分子对接服务器(DRAR-CPI)和CooLGeN数据库预测和筛选脑震宁颗粒主要成分的作用靶点;采用Cytoscape软件ClueGO插件对靶点进行GO富集分析,借助生物信息学注释数据库(DAVID)对获取的靶点信息进行KEGG通路注释分析;采用Cytoscape软件构建药材-成分-靶点-通路-疾病网络.结果 脑震宁颗粒的33个主要成分涉及丝裂原活化蛋白激酶-1 (MAPK1)、胱天蛋白酶-3(CASP3)、糖原合成酶激酶-3β (GSK3B)等34个靶点,GO富集分析和KEGG通路注释分析提示脑震宁颗粒可作用于活性氧的生物合成、平滑肌细胞增殖等生物过程,以及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、MAPK通路、JAK/STAT、mTOR等信号转导通路;网络分析显示脑震宁颗粒的作用机制可能与调控氧化应激、抑制炎症反应和神经细胞凋亡、调节脑内硫化氢生成和纤溶酶原(PLG)活性、改善认知功能及脑外伤后抑郁等相关.结论 揭示了脑震宁颗粒多成分、多靶点、多通路的作用机制,为进一步深入研究脑震宁颗粒药效物质基础及作用机制奠定了基础.