为了探究北部湾养殖区域香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)体内的异养细菌和弧菌数量及其耐药概况变化,对不同养殖场牡蛎体内的异养细菌进行分离培养,并统计其数量,通过药敏纸片扩散等方法研究了细菌的耐药状况.结果显示:牡蛎在高死亡率养殖环境中体内的异养细菌[(8.6±0.4)×106CFU·g–1]和弧菌[(9.5±0.4)×105CFU·g–1]数量较高,在中死亡率环境中体内的异养细菌[(6.9±0.2)×106CFU·g–1]和弧菌[(4.5±0.6)×105CFU·g–1]数量次之,在低死亡率养殖环境中体内的异养细菌[(3.3±0.1)×106CFU·g–1]和弧菌[(2.5±0.6)×105CFU·g–1]数量最低.耐药细菌主要为革兰氏阴性菌,对β-内酰胺类(青霉素)、糖肽类(万古霉素)的耐药率较高,对四环素类(四环素、多西环素)的耐药率次之,对氨基糖苷类(链霉素、庆大霉素、妥布霉素、新霉素)、大环内酯类(红霉素)、喹诺酮类(诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、恩诺沙星)的耐药率较低.在高死亡率环境中牡蛎体内的多重耐药菌占79.7％,其耐药谱型(48种)较广;在中度死亡率环境中牡蛎体内的多重耐药菌占66.2％,其耐药谱型为30种;在低死亡率环境中牡蛎体内的多重耐药菌占58.4％,其耐药谱型为17种.本文探究了牡蛎死亡率与其体内异养细菌数量和细菌耐药性的关系,结果显示牡蛎在高死亡率环境中体内的耐药细菌数量多、耐药谱型较广,低死亡率环境中牡蛎体内的耐药细菌数量较少,异养细菌数量与牡蛎死亡率呈正相关关系,两者相关系数为0.996.

随着抗菌药物在水产养殖中用量的增加及混合使用现象的出现,水产病原菌表现出更强的耐药性甚至是多重耐药性,大大增加了水产养殖中细菌性病害防治的难度.细菌耐药性最常见的传递方式是耐药质粒的转移.本研究通过对多个水产致病弧菌质粒上新霉素及卡那霉素的耐药基因aph(3′)-IIa进行检测分析,并利用电穿孔法将筛选得到的3个受试菌株上的质粒分别转入大肠杆菌中,结果从3个转化子中检测到目的基因.进一步的药敏测试结果显示,3个转化子的最小抑菌浓度(MIC值)以及最小杀菌浓度(MBC值)均明显上升.可见,在特定条件下,水生致病性弧菌对氨基糖苷类(新霉素和卡那霉素)的耐药质粒可转移至大肠杆菌并参与介导其耐药性,大大降低了受体菌对新霉素和卡那霉素的敏感性.本研究将为环境弧菌与临床细菌对氨基糖苷类药物的抗性传递研究提供数据基础和参考依据.