对转基因玉米T25转化体特异性荧光定量PCR方法的关键参数进行了方法验证,选择了7家实验室采用经过验证的方法对3个水平的转基因玉米T25基体标准物质进行协同实验研究.通过比较分析各参与实验室的实验条件、标准曲线的参数,进一步证明该方法室间重复性好.经统计学分析各参与实验室的数据等精度,因此计算各实验室的总平均值做为标准物质的标准值.3个水平的基体标准物质的标准值和扩展不确定度(k=2)分别为1.17%±0.22%、2.17%±0.38%和9.81%±2.30%.
对转基因棉花Mon15985实时荧光定量PCR方法进行了方法确认,组织多家实验室进行协同实验验证,对该标准物质参考值进行测定.经统计分析,得出Mon15985质粒分子的参考值为1.02,扩展不确定度为0.04(k=2).质粒分子与转基因棉花Mon15985的基因组DNA相比,无论是扩增斜率还是线性相关性,均具有可替代性,该棉花转基因Mon15985质粒标准物质,可作为分析检测标准提供相关部门使用.