缺血性脑血管病（ICVD）具有高患病率、高发病率、高致残率和高死亡率的特点,其病因繁多,病理机制复杂,且脑缺血与再灌注会引起一系列细胞、分子及调节过程的变化,导致脑功能损伤。DNA甲基化是一种重要的表观遗传调控机制,多发生在基因启动子区CpG岛上,在DNA甲基转移酶的作用下建立和维持其他表观遗传学现象。DNA甲基化在ICVD的发生发展及后续治疗中发挥着作用。本文介绍了DNA甲基化在缺血性脑损伤中发挥作用的机制,对DNA甲基化成为ICVD治疗靶点的潜力进行了展望。

目的:探究1,4,5-三磷酸肌醇受体（IP 3 R）在促黄体素-表皮生长因子受体（LH-EGFR）信号诱导卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用及机制。方法:构建小鼠卵丘-卵母细胞复合物（COCs）体外培养模型以及卵泡培养模型,研究IP 3 R特异性抑制剂2-氨乙基二苯基硼酸脂（2-APB）及heparin对LH/EGF诱导减数分裂恢复以及EGF诱导卵丘扩展的影响,利用real-time PCR技术检测卵丘扩展因子的表达,钙离子荧光探针Fluo 3-AM检测胞内钙离子水平变化,酶联免疫法检测胞内cGMP水平变化。结果:IP 3 R抑制剂2-APB和heparin能够有效抑制EGF诱导的减数分裂恢复（P＜0.05）,同时显著降低了COCs内cGMP的含量（P＜0.05）;2-APB和Heparin还能够抑制EGF诱导的卵丘扩展,同时显著降低卵丘扩展因子的mRNA表达水平（P＜0.05）;激活IP 3 R可升高细胞内钙离子水平,而2-APB及heparin能够有效降低EGF升高的卵丘细胞内钙离子水平（P＜0.05）;利用卵泡培养模型进一步的研究表明,2-APB及heparin同样显著抑制了LH诱导的卵母细胞减数分裂恢复（P＜0.05）。结论:LH-EGFR信号通路通过IP 3 R升高卵丘细胞内钙离子水平,诱导卵母细胞第一次减数分裂的恢复。

目的:研究小鼠小胶质细胞在氧糖剥夺/复氧不同时间基因的表达,探讨SOCS3及DNMT1是否参与了缺氧缺血性脑损伤后小胶质细胞的状态变化.方法:构建小胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,观察小胶质细胞的形态变化,采用凝胶电泳半定量方法检测SOCS3、DNMT1 mRNA在复氧不同时间的表达情况.结果:氧糖剥夺2 h(OGD2h)后细胞由静息状态变为激活状态,复氧不同时间细胞仍有不同程度的损伤.OGD/R组SOCS3、DNMT1的表达水平随复氧时间延长呈动态变化,其中OGD2 h/R6 h后小胶质细胞SOCS3 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),达到表达高峰;OGD2 h/R6 h后小胶质细胞DNMT1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),OGD2h/R12h明显升高(P<0.05).结论:SOCS3、DNMT1可能参与了OGD/R损伤后小胶质细胞的活性变化,在其损伤过程中发挥着调控作用.

目的 探究磷脂酶(PLC)Cγ1在卵母细胞减数分裂恢复中的作用及机制,进一步阐明卵母细胞成熟的分子机理,为与相关的人体临床应用提供理论基础.方法 利用Real-time PCR检测PLC不同亚型在颗粒细胞与卵丘细胞中的表达情况,构建体外卵泡培养模型及COC培养模型研究PLCγ1特异抑制剂U73122对LH及EGF诱导的减数分裂恢复的影响,利用钙离子荧光探针Fluo 3-AM检测胞内钙离子水平变化,酶联免疫法检测胞内cGMP水平变化,利用Real-time PCR、Western blot以及免疫组化检测不同亚型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R)的表达变化情况.结果 研究表明,颗粒细胞与卵丘细胞中Plcγ1 mRNA的表达均显著高于其它亚型(P<0.05),U73122能够有效抑制LH和EGF诱导的卵母细胞减数分裂恢复(P<0.05)以及EGF诱导的卵丘细胞内钙离子水平升高(P<0.05),U73122还显著逆转了EGF介导的胞内cGMP水平下降(P<0.05),此外,研究还发现在颗粒细胞,卵丘细胞与卵母细胞中Itpr1 mRNA的表达量显著高于其它亚型(P<0.05),Western blot与免疫组化的结果也表明IP3R1在三种细胞中均有表达.结论 LH-EGFR信号通过PLCγ1-IP3R1升高胞内钙离子水平诱导卵母细胞减数分裂恢复.