目的 探讨甲基转移酶样蛋白7B(METTL7B)对人肝细胞脂滴形成的影响.方法 取5只8～10周龄雄性C57BL/6J小鼠的心、肝、脑、肺、肾、肌肉、皮肤等组织,检测组织中METTL7B蛋白表达情况.用不同浓度油酸(0、0.25、0.5、1.0 mmol/L)处理人正常肝细胞LO2,采用CCK-8法检测细胞活力,油红O染色检测细胞内脂滴含量.METTL7B siRNA转染LO2细胞,检测LO2细胞内脂滴含量以及三酰甘油和胆固醇代谢相关基因的表达情况.结果 METTL7B蛋白在小鼠肝脏组织中表达最高,在其他器官组织中表达较弱或不表达.与油酸0 mmol/L比较,油酸1.0 mmol/L能降低细胞活力(P<0.05).油酸0.5 mmol/L处理后,细胞内脂滴含量增多,且脂滴大小清晰,METTL7B mRNA和蛋白表达升高(P<0.05).干扰METTL7B后,细胞内脂滴含量减少(P<0.05),三酯甘油代谢相关基因载脂蛋白B100、Runt相关转录因子2、硬脂酰辅酶A去饱和酶mRNA表达上调(P<0.05),胆固醇代谢相关基因肉毒碱棕榈酰转移酶、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、SREBP2 mRNA表达下调(P<0.05).结论 METTL7B与人肝细胞脂滴形成密切相关,主要通过上调三酰甘油代谢相关基因和下调胆固醇代谢相关基因的表达来发挥作用.

目的 研究小鼠急性心肌梗死(AMI)后不同时间点心肌组织自噬水平的动态变化.方法 选取8～10周龄SPF级C57BL/6J野生型小鼠40只,随机分为假手术组(Sham组)、AMI组(永久结扎左前降支),每组20只,分别于术后7、14、28 d时,用心脏超声检测心脏功能及结构变化,Masson染色观察小鼠梗死周边心肌组织纤维化,Western blot检测自噬蛋白、透射电镜观察自噬小体、免疫组织化学检查凋亡蛋白表达.结果 Masson染色显示,AMI组梗死周边组织间质纤维化随着时间的推移加重;AMI组7、14和28 d时Bax蛋白较Sham组明显上调(0.71±0.08、0.77±0.05和0.86±0.06 vs 0.53±0.08,P＜0.05),Bcl-2和自噬微管相关蛋白轻链3蛋白降低(P＜0.05),P62蛋白表达增强(P＜0.05);透射电镜示,AMI组梗死周边心肌组织内 自噬小体数量明显减少.结论 小鼠AMI后梗死周边心肌组织自噬水平进行性降低,心室重构进一步恶化,自噬可能在AMI中起保护作用.

目的 分析小鼠心肌梗死(MI)后7、14、28d心肌组织mRNA表达谱的变化.方法 将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(S组)和MI模型组(MI组),每组10只.采用结扎小鼠冠状动脉左前降支方法建立MI模型,行心电图和组织病理学检查验证,心脏彩超观察心脏结构变化.取梗死边缘区心肌组织进行转录组测序,筛选差异表达mRNA基因,采用基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析参与重要信号通路的差异表达基因.结果 MI组建模后3个时间点左心室舒张末期内径及其容积、左心室收缩末期内径及其容积均大于S组,而左心室射血分数低于S组(P＜0.05).MI组建模后3个时间点共280个基因均表达上调,而40个基因均表达下调.GO分析显示,持续表达上调或下调的基因主要参与的生物功能为生物调节、对刺激的反应、代谢过程、发育过程等;细胞成分有细胞膜、细胞核、囊泡、细胞外基质等;分子功能有蛋白结合、转运激活等.KEGG分析显示,持续表达上调的基因参与信号通路多促进心室重塑,持续表达下调的基因参与信号通路多抑制和延缓心室重塑.结论 小鼠MI建模后心脏形态结构发生异常,心功能减低;不同时间点进行mRNA谱分析显示涉及基因数目众多且功能复杂.