基于梁山慈竹转录组数据库,以梁山慈竹叶片为材料,克隆得到一个MYB转录因子,命名为DfMYB3,其开放阅读框长度为1 287 bp,编码428个氨基酸,GenBank注册号为KY963358.保守结构域分析显示,Df-MYB3有典型的SANT结构域,具有DNA-Binding结构域.系统进化树分析发现,DfMYB3与甘蔗、拟南芥、毛白杨等物种的R2R3-MYB转录因子聚集在一枝上.亚细胞定位结果显示,DfMYB3蛋白在细胞核以及细胞膜中均有表达,在细胞核上更为显著.通过染色体步移法克隆得到DfMYB3基因5'侧翼2 000 bp左右的序列.Plant-CARE在线软件分析表明,该序列具有典型的启动子特征,并含有GA、ABA、MeJA等激素以及干旱等胁迫响应元件.100μmol·L-1 GA、100μmol·L-1 ABA处理梁山慈竹后,显著上调了DfMYB3基因的表达,表明DfMYB3基因能对GA及ABA处理产生应答.为探究DfMYB3启动子的功能,构建了 DfMYB3启动子融合GUS基因的表达载体,并遗传转化烟草.在转基因烟草叶片及茎杆中都检测到了 GUS信号,在叶脉处最为显著.
糖外排转运蛋白(sugar will eventually be exported transporters,SWEET)在植物光合同化产物的运输中主要参与韧皮部糖的装载过程.该研究基于慈竹转录组库筛选出9条完整的BeSWEET序列,对其进行生物信息学分析,以慈竹茎和嫩叶的cDNA为模板对9条BeSWEET序列中的BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2进行基因克隆,采用实时荧光定量(qRT-PCR)分析其在叶肉、叶脉、根、茎中的表达水平以及外源糖诱导下的表达变化.结果表明:(1)系统进化分析显示,9条BeSWEET序列被分为4大类群,其中BeSWEET4-2与水稻SWEET4近缘,聚类到CladeⅡ,具有2个MtN3保守结构域;BeSWEET1a-2与水稻SWEET1a和SWEET1b近缘,聚类到CladeⅠ.(2)序列分析显示,慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2分别编码256个和222个氨基酸,分别具有7个和5个跨膜结构域.(3)亚细胞定位预测显示:慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2均定位于质膜.(4)qRT-PCR结果显示,慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2在叶肉、叶脉、根和茎中均有表达,分别在根和叶脉中最为显著,推测其可能协作参与了糖类从源到库的转运.(5)在外源己糖诱导下慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2均显著上调表达,显示出对己糖的偏好性.该研究结果为进一步探讨慈竹BeSWEET蛋白调控糖转运的生物学功能奠定了基础.
以秸秆的资源化利用为目的,制备秸秆农用保水剂.采用水溶液聚合法制备保水剂,并通过单因素实验和正交实验来确定最优的秸秆保水效果,对保水剂的吸盐倍率、吸水倍率、凝胶保水率的参数测定.结果表明:温度为70℃,去离子水的量为160mL,2%亚甲基双丙烯酰胺的用量8mL,过硫酸钾:硫代硫酸钠五水=3:0(引发剂)与丙烯酸单体比为1%,丙烯酸的中和度为65%,反应时间1h,,干燥时间3d,过筛,1g保水剂测得吸水倍率为279g/g,吸盐倍率为41.2g/g,凝胶保水率为71.34%.