目的 探究雷公藤红素(celastrol)诱导细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生在介导细胞DNA损伤中的作用及对肝癌细胞凋亡的影响.方法 人肝癌细胞经雷公藤红素处理后,镜下观察细胞形态变化;MTT法测定肝癌细胞的存活率;Hoechst 33258染色观察肝癌细胞核变化;流式细胞术检测细胞死亡;CM-H2DCFDA探针检测细胞内ROS水平;免疫荧光方法检测细胞内DNA损伤标志蛋白γ-H2AX的荧光强度;Western blot检测 γ-H2AX、caspase-3、PARP等蛋白表达水平.结果 雷公藤红素可显著抑制肝癌细胞的存活,并可升高细胞内ROS水平,呈浓度依赖性关系(P<0.05);Hoechst染色观察到细胞凋亡特点;Western blot结果显示,雷公藤红素组γ-H2AX表达增加,caspase-3被激活,PARP蛋白切割也明显增加;在加入ROS抑制剂NAC后,可逆转上述结果(P<0.05,P<0.01).结论 雷公藤红素可诱导肝癌细胞内ROS聚集,高水平的ROS引起细胞DNA损伤,最终诱导细胞凋亡.

小窝蛋白-1(Caveolin-1)是位于细胞膜上的一种重要的结构蛋白,能特异性地与细胞内多种信号蛋白结合,与细胞周期调控、细胞死亡、细胞代谢等多种活动有密切关系.Caveolin-1通过调控一些信号通路,可抑制肿瘤生长或者促进肿瘤的侵袭和转移,其在肿瘤中表现出双重效应.本文就Caveolin-1在各种常见肿瘤细胞中的作用机制综述如下.

为了研究去氢枞酸对PI3K/AKT/mTOR信号通路的抑制能力,本研究利用分子对接技术预测去氢枞酸对通路蛋白的结合能力和结合方式,用蛋白免疫印迹技术验证通路蛋白受抑制程度,用网络服务器进行类药性与药代动力学的模拟。预测结果发现,去氢枞酸对通路蛋白具有一定的结合能力,预测构像的最低结合能最高为-6.16 kcal/mol;蛋白免疫印迹结果显示,在去氢枞酸作用下,PI3K调控亚基p85的表达明显下调,AKT和mTOR的磷酸化被明显抑制,通路下游磷酸化蛋白的表达也被不同程度的抑制;类药性与药代动力学的模拟发现去氢枞酸通过了大部分的检验。总体上看,去氢枞酸可以作为治疗用PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂的候选化合物。

一氧化氮(Nitric Oxide,NO)是机体内重要的细胞信使分子、效应分子和免疫调节分子.已研究表明,NO广泛地参与血管和气管平滑肌的舒张、神经的传递、肿瘤细胞的凋亡、机体免疫防御等重要生理功能的调节等.近年来有关骨折愈合的分子生物学研究取得了较大的进展,但骨折愈合过程中的信息传递和诱导调节机理还尚不清楚.信使NO分子在骨折愈合中的调节作用的发现受到了广泛的重视.