[目的]明确15种农药对家蚕的安全性,为蚕业生产使用农药提供科学依据,为桑园筛选新型农药提供参考.[方法]采用食下毒叶法测定15种农药对2龄蚕的急性毒性,根据农药对家蚕的毒性和风险大小分级.[结果]丁硫克百威、甲维·吡丙醚、噻虫胺、氯虫苯甲酰胺96 h LC50分别为0.200、0.014、0.122、0.008 mg/L,为剧毒级别,具有极高风险性;呋虫胺、溴氰·噻虫啉96 h LC50分别为1.505、2.292 mg/L,为高毒级别,具有极高风险性;吡唑醚菌酯、咪鲜胺96 h LC50分别为27.769、111.338 mg/L,为中毒级别,具有高风险性;丙环唑、噻呋酰胺、三唑酮、草铵膦96 h LC50分别为228.185、202.154、494.130、230.853m11g/L,为低毒级别,其中噻呋酰胺、三唑酮具有中等风险性,丙环唑、草铵膦为高风险性;螺螨酯、异菌脲、草甘膦96 h LC50分别为＞2400、＞4000、＞1200mg/L,为低毒级别和低风险性.[结论]丁硫克百威、甲维·吡丙醚、噻虫胺、氯虫苯甲酰胺在桑园及附近应禁止使用;呋虫胺、溴氰·噻虫啉、吡唑醚菌酯、咪鲜胺、丙环唑、草铵膦在桑园应禁止使用,在桑园周边应谨慎使用;噻呋酰胺、三唑酮、螺螨酯、异菌脲、草甘膦可作为桑园药物使用.

[Objective]By using BSA-Seq sequencing analysis to determine the resistance SNP markers and resistance genes of the resistant parent NC99R of the nuclear polyhedrosis resistant variety Guican N2,lay a foundation for the iden-tification of NC99R resistance genes and provide marker resources for silkworm nuclear polyhedrosis resistant molecular marker assisted breeding.[Method]A hybrid F1,F2,and BC1 genetic population were prepared using the disease resistant variety NC99R and the susceptible variety Furong as parents,and their genetic patterns were analyzed by feeding nuclear polyhedrosis virus(BmNPV).In the F2 population of NC99R near allelic gene line NC99R-NIL hybridized with Furong,high and low concentration feeding groups with virus concentration differences of 4000 times were set up.Non-diseased individuals were selected from the high concentration feeding group to construct an extreme resistance material DNA mixing pool.Individuals with typical disease symptoms were selected from the low concentration feeding group to con-struct an extreme susceptibility material DNA mixing pool.Then the resistance DNA mixing pool,susceptible DNA mixed pool and two parental genomes were completed sequencing using second-generation sequencing,and locating resistance linked regions with population segregation analysis(BSA).[Result]The results showed that NC99R exhibited stable high resistance to BmNPV,and the genome carried anti BmNPV genes,which were jointly regulated by significant resistance major genes or closely linked genes.A total of 19276670 SNP loci and 4789615 InDel loci were obtained through whole genome sequencing analysis of extreme resistance DNA mixing pool,extreme susceptibility DNA mixing pool and paren-tal DNA.Based on the LOESS regression fitting analysis of ΔSNP-index,two regions associated with resistance to nu-clear polyhedrosis were identified,Chr.25:150-11069kb and Chr.27:8700-11009kb respectively.When the ΔSNP-index was set to≥0.8,a total of 3865 SNP markers significantly related to resistance were identified.Among them,78 SNP markers were screened in the association interval of chromosome 25 and 2694 SNP markers were screened in the associa-tion region of chromosome 27.After screening for non-synonymous mutations at the amino acid level,the Zinc carboxy-peptidase gene on chromosome 25 and the Facilitated trehalose transporter Tret1 gene on chromosome 27 were identified.[Conclusion]Using BSA-Seq,3865 SNP marker resources related to resistance against nuclear polyhedrosis are found in silkworm NC99R,and two genes related to resistance against BmNPV are preliminarily identified(Zinc carboxypepti-dase gene on chromosome 25 and Facilitated trehalose transporter Tret1 gene on chromosome 27),providing marker re-sources for molecular marker assisted breeding of silkworms resistant to nuclear polyhedrosis.

以在桑园收集的越冬桑椹菌核为材料,调查其在湿度充足的自然气候条件下萌发形成子囊盘的发育历期.探索了不同温度、湿度和光照条件对菌核萌发和子囊盘生长发育的影响.结果表明,桑椹菌核病菌核在湿度充足的自然气候条件下从萌芽到子囊盘消亡历时38～52 d,平均历时45.0 d;其中萌芽抽生期16～23 d,平均18.7 d;杯盘膨大期6～12 d,平均8.4 d;平盘期8～20 d,平均14.1 d;消亡期1～6 d,平均3.3 d.菌核在10～20℃范围均可萌发形成子囊盘,最佳温度是15℃.土壤湿度对于菌核萌发有显著影响.土壤湿度25%时,菌核不能萌发;土壤湿度50%时,菌核萌发率为23.5%;土壤湿度75%时,菌核萌发率达78.0%;土壤湿度90%时,菌核萌发率达到100%.光照能刺激菌核萌发形成子囊盘,并能促进子囊盘的生长发育.菌核在全光照不遮光和黑膜遮光透光率5%的情况下均能萌发,全光照不遮光培养,单粒菌核萌发子囊柄的平均数量为4.1个,并且子囊柄顶端均能形成子囊盘;黑膜遮光透光率5%培养,单粒菌核萌发子囊柄的平均数量为1.2个,只有51.3%的子囊柄顶端能形成子囊盘.研究结果为桑椹菌核病的预报和防治提供了理论基础.

选取白花蛇舌草、广金钱草、金钱草、败酱草、蒲公英、薏苡仁等6种中草药进行家蚕血液型脓病防控试验,通过煎煮法提取中草药有效成分添食于家蚕,测定药物对家蚕血液型脓病的预防和治疗作用.试验结果显示,6种中草药对家蚕血液型脓病均具有显著的预防效果,白花蛇舌草、广金钱草、金钱草的效果较好,保护率分别为47.26%、35.62%、33.56%,蒲公英、败酱草、薏苡仁的保护率分别为21.92%、14.38%、4.11%;6种中草药对家蚕血液型脓病治疗效果相对较差,白花蛇舌草、广金钱草、金钱草、蒲公英、败酱草、薏苡仁的保护率分别为4.00%、9.33%、2.67%、22.67%、1.33%、4.67%.可对白花蛇舌草、广金钱草、金钱草进行深入研究,开发出预防血液型脓病新型药物.

桑赤锈病是由桑锈孢锈菌(Aecidium mori Barclay)引起的一种桑树真菌病害,广泛分布于中国及亚洲蚕区,是桑树的重要病害之一,可导致桑叶减产、叶质降低,严重影响蚕业健康发展.对桑赤锈病的分布与为害规律、病原菌、抗病桑品种及防治技术等方面的研究进展进行了综述,并对未来研究方向进行了展望,以期为桑赤锈病的防治提供科学依据.

基于广西贵港市覃塘区黄练镇发生了大批量家蚕中毒死亡的现象,为了科学查找蚕中毒原因,通过实地走访调研,发现中毒家蚕的饲养农户共同之处是使用同种桑树肥料,对各种涉蚕物资进行农药残留检测.结果显示,桑树肥料中含有高浓度噻虫嗪,家蚕添食试验显示噻虫嗪的浓度大于0.00156 mg/kg能够导致家蚕发生中毒;噻虫嗪16.5 mg/kg浓度根基施肥,40 d内采叶喂蚕可导致3龄蚕急性中毒,100 d后药物毒性消失.通过综合分析,认为桑园施用的肥料中残留有高浓度的噻虫嗪,其通过桑树根部吸收,传导到桑叶,导致家蚕农药中毒,继而引起大批量死亡.农药来源推测是甘蔗种植中使用噻虫嗪,农户购买的此批肥料使用了较多的甘蔗滤泥,导致肥料中噻虫嗪含量较高.针对噻虫嗪引起的家蚕农药中毒现象,建议更换新鲜无毒桑叶减少损失,可疑桑叶先行少量饲喂试验等措施,噻虫嗪肥料施肥后的桑树在100 d后再采叶喂蚕,可有效防止家蚕农药中毒的发生,减少经济损失.

[目的]摸清广西家蚕僵病发生流行规律,研究病原特性及遗传规律,为精准防控家蚕僵病提供科学依据.[方法]以2008—2021年广西家蚕僵病发病原始数据为基础,分析广西家蚕僵病的发病规律.收集广西五大蚕区(桂中、桂南、桂西、桂西北和桂东南)的病蚕、病虫及生物防控白僵菌株,经显微形态鉴定和产孢测定后采用滤纸接触法测试其对家蚕的致病力;基于ITS4/ITS5引物进行PCR扩增,并将双向测序结果输入GenBank进行BLAST比对分析;根据ISSR-PCR扩增结果以Quantity One绘制电泳模式图,使用NTsys计算遗传相似系数并进行UPGMA聚类分析,同时以PopGene32对供试材料的遗传多样性指数进行分析.[结果]2008—2021年广西家蚕僵病发病率整体上呈波动下降趋势,连续14年的平均发病率为5.19％.5月是广西家蚕僵病的发病率高峰,平均发病率为13.37％;其次是4月和10月,对应的发病率分别为7.91％和6.87％.山区地形的家蚕僵病发生率普遍高于平缓丘陵地区,其中,丘陵蚕区的家蚕僵病发病率排序为桂中(13.55％)>桂西北(12.66％)>桂南(11.56％)>桂西(11.05％)>桂东南(9.53％),山地蚕区的家蚕僵病发病率排序为桂中(18.91％)>桂西北(17.96％)>桂西(16.01％)>桂西(14.90％)>桂东南(11.61％).广西家蚕僵病病原包括白僵菌属、曲霉属、拟青霉属和虫草菌属,其中球孢白僵菌(Beauveria bassiana)为主要病原,占比达86.67％,且白僵菌ITS序列高度保守,序列相似性在97.83％～99.83％.不同白僵菌株对家蚕的致病力表现为崇左白僵菌株(农药)的72 h累计死亡率达100.00％,明显高于蚕区僵蚕菌株(8.89％～93.33％).筛选出的10条ISSR引物从50株菌株样本中扩增出152条清晰条带,其中多态位点147个,多态百分数为87.5％～100.0％;50株菌株样本的Nei?s基因多样性指数(H)为0.1740～0.3257,Shannon信息多样性指数(I)为0.2840～0.4880,均表现出极高的遗传多样性;基于遗传距离构建的UPGMA系统发育进化树显示,桂南、桂西北、桂东南、桂中等蚕区的病蚕白僵菌株与农药源白僵菌株存在非常近的亲缘关系.[结论]广西家蚕僵病危害高峰期为5月,球孢白僵菌是最主要的病原菌,且ITS序列高度保守.不同来源白僵菌对家蚕致病力的排序为农药源白僵菌株>松林白僵菌株>蚕区僵蚕菌株,但三者相互间存在非常高的基因关联性,提示广西家蚕僵病的病原遗传背景复杂,且蚕桑主产区应慎用白僵菌农药.

为了研究影响广西家蚕血液型脓病传染的主要因子,探索蚕病精准防控时机与策略,通过对气候条件、病蚕混育率、饲养密度、龄期经过以及药物防控等因子进行偏相关分析,分析各因子对蚕期血液型脓病发生危害的影响力.结果表明,当蚕群中有染病个体时,高温多湿环境是诱导和加快蚕座传染的主要因子;家蚕血液型脓病蚕座传染很强,病蚕混育率是主要传染因子,与发病率的相关系数最高;蚕座密度对病毒次生传染,显示过高的养蚕密度增加了传染发病率;感染龄期对病毒次生传染,表现为龄期越小,次生传染越严重;防控药物介入可降低次生传染发病率,新鲜石灰粉防控效果较好,增加施用次数可降低危害.所有影响因子中,偏相关分析结果显示,病蚕混育率是首要的因子,其次是混育龄期,第三是药物施用,呈现负相关,第四是饲养季节,最后是饲养密度.每天施用一次的药物处理仍然会出现病原逃逸的现象,宜增加施药次数减轻危害.本研究结果可为广西家蚕血液型脓病防治提供参考.

为了探索家蚕肠道微生物与家蚕健康生长之间的关系,增强家蚕抗病能力、提高桑叶转化率、提高蚕茧的产量和质量,基于国内外研究进展,系统地论述了家蚕肠道微生物的多样性及其影响因素,阐述了肠道微生物在家蚕体内发挥的作用,特别是在防御和解毒方面的功能.就目前家蚕肠道微生物研究存在的问题进行阐述,提出今后应建立更加丰富的家蚕肠道微生物多样性数据库,分离培养获得更多家蚕肠道微生物用于功能验证,阐明肠道菌在维护家蚕健康和抗病方面的机制.建议加大开发蚕用微生态制剂,识别家蚕肠道内与杀虫剂抗性相关的细菌种类的研究方向,以期为推动家蚕肠道功能微生物开发和应用提供参考.

为了有效防控蚕病发生,阐述和分析了广西近几年家蚕病毒病、细菌病、真菌病、微粒子病等主要蚕病以及家蚕农药中毒的发生情况.结果表明,各类蚕病的发生与温度、湿度有密切联系.高温多湿条件下各类主要蚕病均易发生,家蚕农药中毒与周边作物使用农药情况存在密切联系.针对蚕病防控过程出现的各种问题,提出加强饲养管理、确保正确消毒、合理使用蚕药、细化品种研究、加强桑园管理、规范蚕种生产经营及技术培训等建议,为有效防控蚕病发生,提高养蚕成功率,促进广西蚕业健康稳定发展提供理论参考.