5S рРНК-связывающиеся рибосомные белки семейства L25 являются эволюционным приобретением бактерий. Ранее нами было показано, что 1) одиночные замены в РНК-связывающем модуле белка данного семейства приводят к дестабилизации комплекса с 5S рРНК или к невозможности его образования in vitro; 2) AL25 рибосомы Escherichia coli менее эффективны в синтезе белка in vivo, чем контрольные рибосомы. В настоящей работе исследована эффективность встраивания белка L25 E. coli с мутациями в 5S рРНК-связывающем участке в рибосому in vivo. Показано, что мутации в белке L25, лишающие его способности связываться со свободной 5S рРНК, не препятствуют эффективному и правильному встраиванию белка в рибосому. Об этом свидетельствует то, что присутствие даже очень слабо удерживающегося мутантного белка L25 в рибосоме положительно влияет на активность аппарата трансляции in vivo. Это указывает на существование альтернативного пути встраивания данного белка в рибосому, исключающего предварительное образование комплекса с 5S рРНК. В то же время, стабильный контакт с 5S рРНК оказывается очень важен для удержания белка L25 в рибосоме, и в этом ключевую роль играют консервативные остатки РНК-связывающего модуля белка.

Пигмент-белковые взаимодействия обеспечивают высокую эффективность переноса и преобразования световой энергии при фотосинтезе. Наиболее удобным объектом для изучения механизмов первичных процессов фотосинтеза является реакционный центр (РЦ) пурпурной бактерии Rhodobacter sphaeroides. С помощью направленного мутагенеза можно исследовать влияние белкового окружения кофакторов переноса электрона на оптические свойства, стабильность, пигментный состав и функциональную активность РЦ. Предварительный анализ РЦ проводился с помощью компьютерного моделирования аминокислотных замещений L(M196)H + H(M202)L в пигмент-белковом интерфейсе и определения стабильности пространственной структуры полученного мутантного РЦ методом молекулярной динамики. Затем РЦ с указанной двойной мутацией был получен, очищен и закристаллизован, его пространственную структуру определили методом рентгеноструктурного анализа и сравнили с молекулярно-динамической моделью.