为了建立一种快速准确鉴别滑液囊支原体MS-Y分离株和活疫苗MS-H的方法,根据滑液囊支原体ppm和deoD基因的2个碱基突变位点序列,运用错配扩增突变分析(MAMA)PCR方法,设计了 2对特异性引物和1对通用引物,用于扩增目的基因,通过优化反应条件,建立一种能同时鉴别出MS-Y和MS-H的多重PCR检测方法,并检测了该方法的特异性和敏感性.结果显示,利用特异性引物的多重PCR方法能同时鉴别滑液囊支原体MS-H活疫苗株和滑液囊支原体MS-Y分离株的DNA,分别扩增出相应的特异目的条带,检测MS-H株的最低敏感度为4.21×105copies/μL,检测MS-Y株的最低敏感度为6.47×105 copies/μL;而利用通用引物对检测滑液囊支原体DNA的最低浓度为2.18×103 copies/μL,检测MS-H DNA的浓度下限均为1×105CCU/mL,检测MS-YDNA的最低浓度为1×103CCU/mL.本研究建立了一种能同时快速鉴别滑液囊支原体MS-H活疫苗株和MS-Y分离株的多重PCR方法.
RESEARCH HIGHLIGHTSMG infection causes a persistent inflammatory response by increasing the expression of immune response genes.The ERK-MLCK signalling pathway activated by MG infection regulates tight junction proteins in the tracheal mucosa.These data provide a basis for future prevention and treatment studies to control MG infection.
为了解福建白羽肉鸡中鸡毒支原体(MG)对临床常用药物的敏感性,本研究从2个商品代白羽肉鸡养殖场采集了疑似患慢性呼吸道病(CRD)的鸡喉拭子40份,接种于适宜的支原体培养基上进行纯化.通过对菌株生物学特性分析、细菌形态学观察、PCR测序及动物回归试验进行鉴定,并利用最低抑菌浓度(MIC)测定了分离株对临床常用抗菌药的敏感性.结果显示,本试验成功获得2株MG,命名为MX和HY.将分离株接种于含有酚红的支原体液体培养基中能分解葡萄糖产酸使培养基颜色由红变黄;固体培养基于低倍镜下观察到典型的"荷包蛋"状菌落;分离株经过Dienes染色后的菌落中心呈致密深蓝色,边缘淡蓝,且30 min后不褪色,并具有较强吸附红细胞的能力,呈现典型MG培养特征;动物回归试验和分离株pvpA基因测序结果显示,2株MG分离株均具有较强致病性,证实其与R株的亲缘关系最近;药敏试验结果显示,MX和HY对泰妙菌素、氟苯尼考和泰乐霉素表现出了高度敏感性,其次是盐酸恩诺沙星、盐酸大观霉素,而对具有与泰乐霉素类似分子结构和抗菌谱的畜禽专用抗生素替米考星敏感性较差,此差异可能与临床上长期应用该药有关.研究结果表明,福建地区商品代白羽肉鸡中存在致病性MG流行,泰妙菌素可以作为临床防治MG的首选药物.
