目的:对遵义习水县虫草属药用真菌的菌株进行分离与鉴定,为进一步开发利用虫草奠定基础.方法:以遵义习水县所采集到的虫草属子实体为研究对象,采用组织分离法分离虫草菌株并纯化,ITS基因序列鉴定结合子实体标本鉴定分离的纯培养物.结果:从遵义习水共得到 6 株虫草属药用真菌菌株,编号 56b-1、SW57b 两株菌株为高雄山虫草(Cordyceps takaomontana Yakush.&Kumaz);编号67、CZ270、SL215 三株菌株为蝉花(Cordyceps cicadae(Miq.)Massee);编号SL219 为爪哇虫草(Cordyceps javanica(Bally)Kepler,B.Shrestha&Spatafora).结论:遵义习水县野生虫草属药用真菌资源丰富.
本研究运用组织分离法对采自贵州省都匀市斗篷山景区的地衣进行内生真菌分离,乙酸乙酯萃取菌株液体发酵物,通过打孔法筛选地衣内生真菌提取物并对9株临床致病菌株及耐药菌株进行抑菌活性实验.结果表明一株分离自星点梅衣属地衣Puncteliasp.的内生真菌DPS-165-9对其中的6株显示抑制活性.此6株菌为金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus 25923和6538、耐药表面葡萄球菌Staphylococcus epidermidis Z12、耐药布氏杆菌Brucella sp.B103、耐药枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 163和耐药藤黄微球菌Micrococcus luteus 261.经鉴定DPS-165-9为蔡氏轮层炭壳菌Daldinia childiae.本研究为下一步挖掘新的抗菌物质奠定基础.
本研究对分离自星点梅衣属地衣Punctelia sp.的一株内生真菌蔡氏轮层炭壳菌Daldinia childiae进行大米固体发酵培养,乙酸乙酯萃取发酵产物,采用硅胶柱色谱法、重结晶等方法分离纯化次生代谢产物,结合核磁共振波谱与质谱技术对单体化合物进行结构解析,运用DPPH法测定化合物的自由基清除能力.结果分离得到8个化合物,分别鉴定为4-hydroxy-benzeneethanol(1)、4-methoxy-5-car-bomethoxy-6-pentyl-2H-pyran-2-one(2)、1-(2,6-dihydroxyphenyl)butan-1-one(3)、8-methoxy-1-naphthol(4)、1,8-dimethoxynaphthalene(5)、methyl 2-undecenoate-3-undecanoate-cyclohexyl-1,4-dienyl ester(6)、uracil(7)和acetic acid(8),化合物1、6和8均首次从轮层炭壳菌属Daldinia中分离得到;化合物4在浓度为3mg/mL时具有较强的自由基清除活性,化合物3和5具有轻微的自由基清除能力.本研究为进一步挖掘轮层炭壳菌属的代谢产物奠定基础.