选择信号是生物群体在选择进化的过程中,由于选择作用使得生物群体表型特征发生变化的对应基因组信息.本研究基于嵊县花猪等10个中外地方猪品种共计517个个体全基因组测序数据,利用群体分化指数(FsT)和核苷酸多态性(θπ)方法检测嵊县花猪群体与浙江省其他地方猪种群体间以及与西方猪种群体间的选择信号,找到17个落入选择信号区域的候选基因.其中与浙江省地方猪群体相比,检测出候选基因9个,分别是SYT1、FAM135B、GLIS1、GALNT2、BIN1、LOC1 0062 7093、TG、SOX9、CH2 5H;与西方猪群体相比,检测出候选基因8个,分别是MGAT5、MAPK4K4、KSR2、RBP5、HDLBP、KCNE2、KIRREL3、BTBDll.这些候选基因在脂肪代谢、免疫、胚胎发育、消化代谢等通路中发挥重要的作用,说明嵊县花猪在耐粗饲、抗病力强、高繁殖力等性状上经历了人工选择,为研究嵊县花猪的群体特征提供了参考价值.

建立并保存家畜的成纤维细胞在保护畜禽种质资源研究中发挥着重要作用.本研究以40日龄金华猪胚胎为实验材料,采用组织贴壁法建立了金华猪胎儿成纤维细胞系,并对所建细胞系进行生物学特性研究.结果表明,原代细胞生长迅速,贴壁后2～3d可长满培养瓶,获得的成纤维细胞生长态势良好；细胞生长曲线为典型的S形,细胞群体倍增时间(population doubling time,PDT)约为36h;细胞冻存前、复苏后的活率分别为95.2％和92.8％;细胞中期染色体二倍体(2n＝38)占主体约为91％,达到了建立成纤维细胞系的要求;苹果酸脱氢同工酶(malic dehydrogenase,MDH)和乳酸脱氢同工酶(lactic dehydrogenase,LDH)电泳结果表明,本细胞系没有被其他细胞污染,细胞纯度较高；细菌、真菌和支原体三类微生物检测结果均为阴性,细胞没有受到微生物的污染；15代细胞的凋亡率为2.0％,细胞没有大规模的凋亡现象发生；当阳离子脂质体(Lipofectamine 2000)剂量为0.3 μL、荧光蛋白报告质粒(pEGFP-N3)为0.5 μg时转染成纤维细胞的效率最高,可达32.4％.细胞系各项指标均达到美国典型培养中心(American Type Culture Collection,ATCC)标准.金华猪胎儿成纤维细胞系的成功建立使金华猪种质资源在细胞水平得到保存,并可为胚胎克隆以及转基因等研究提供必要的实验材料；也可以为以后其他种质资源在细胞水平上的保存提供理论与技术支持.

作为精原细胞和卵原细胞的祖细胞,由于其全能性的特点可作为体外胚胎发育研究的良好模型,而禽类独特的生理和发育特点使得其原始生殖细胞（PGCs）在转基因研究中有着巨大价值。本研究通过对孵化5.5d的梅岭土鸡（Gallus domesticus）胚生殖腺中分离得到的PGCs,接种于24孔培养板在温度37℃、95%空气和5%CO2的培养箱中进行体外培养;借助组织化学及免疫组织化学染色对PAS（高碘酸希夫氏染色）、AKP（碱性磷酸酶染色）、SSEA-1（胚胎阶段特异性表面抗原-1）以及TERT（端粒酶反转录酶）进行了鉴定;采用荧光定量PCR技术对PGCs阶段特异性表达基因Cvh（鸡Vasa基因同系物）、Cdh（鸡死端同系物）、Dazl（类无精症缺失）和干细胞多能性相关基因PouⅤ（POU结构域Ⅴ类转录因子1）、Nanog（nanog同源异型盒）、Sox-2（性别决定区Y盒2）基因表达进行了分析;利用脂质体介导法,将绿色荧光蛋白（pEGFP-N3）基因导入鸡PGCs细胞,结果表明,PGCs集落有典型的鸟巢状结构,且PAS、AKP、SSEA-1以及TERT染色阳性;PGCs阶段特异性表达基因Cvh、Cdh、Dazl和干细胞多能性相关基因PouV、Nanog和Sox-2在鸡PGCs中均远远高于在鸡成纤维细胞（CEF）中的表达;转染24h后,绿色荧光蛋白均匀的充满细胞质和细胞核,转染效率最高为16%,研究结果为禽类PGCs分化过程中基因调控及基因标记、转基因动物克隆等技术提供了良好基础。