Wir beschreiben eine neue Methode zur Proteinsynthese, die das bestehende Repertoire an Möglichkeiten zur Proteinmodifikation erweitert: Eine chemoselektive Reaktion induziert Reaktivität für eine nachfolgende Biokonjugation. Hierbei reagiert ein azidmodifizierter Baustein zunächst mit einem Ethinylphosphonit in einer Staudinger‐Phosphonit‐Reaktion (SPhR) zu einem Ethinylphosphonamidat. Die so entstehende elektronenarme Dreifachbindung modifiziert anschließend in einer cysteinselektiven Reaktion Proteine und Antikörper. Wir zeigen, dass Ethinylphosphonamidate eine herausragende Selektivität für Cysteine aufweisen, gepaart mit einer überragenden Stabilität der Thiol‐Addukte im Vergleich zu klassischen Maleimid‐Konjugaten. Diese Erkenntnis macht unsere Technik zu einer vielseitigen und leistungsstarken Methode für die mühelose Herstellung von stabilen, funktionalen Proteinkonjugaten.

We describe a new technique in protein synthesis that extends the existing repertoire of methods for protein modification: A chemoselective reaction that induces reactivity for a subsequent bioconjugation. An azide-modified building block reacts first with an ethynylphosphonite through a Staudinger-phosphonite reaction (SPhR) to give an ethynylphosphonamidate. The resulting electron-deficient triple bond subsequently undergoes a cysteine-selective reaction with proteins or antibodies. We demonstrate that ethynylphosphonamidates display excellent cysteine-selective reactivity combined with superior stability of the thiol adducts, when compared to classical maleimide linkages. This turns our technique into a versatile and powerful tool for the facile construction of stable functional protein conjugates.