目的:观察腰椎斜扳法联合体外冲击波治疗腰椎小关节紊乱症的临床疗效.方法:选取2021年2月至2022年2月门诊治疗的腰椎小关节紊乱症患者70例,依据患者选择的治疗方法分为观察组(腰椎斜扳法联合体外冲击波治疗)和对照组(腰椎斜扳法治疗).其中观察组35例,对照组35例,比较两组患者治疗前、治疗后即刻和治疗7 d后的视觉模拟量表(VAS)评分、日本骨科协会(JOA)评分和疗效优良率.结果:与治疗前相比,两组患者治疗后的VAS评分均降低,JOA评分均增加,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗前,观察组的VAS评分和JOA评分与对照组的差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后,观察组的VAS评分和JOA评分与对照组的差异均有统计学意义(P＜0.05),两组的疗效优良率差异有统计学意义(P＜0.05).结论:腰椎斜扳法联合体外冲击波治疗腰椎小关节紊乱症能更好地减轻患者疼痛症状和改善腰部功能状态,增强关节的稳定性,值得临床推广应用.

目的:观察三七总皂苷(PNS)干预股骨头坏死(ONFH)大鼠模型后,PNS对ONFH大鼠股骨头组织成骨作用的影响.方法:36只SPF级雄性6个月龄SD大鼠按照随机数字表法分为对照组(Ctrl组)、模型组(M组)和干预组(PNS组),每组大鼠12只;M组和PNS组行液氮冷冻法股骨头坏死造模,造模3个月后,M组大鼠每日腹腔注射生理盐水2 mL;PNS组大鼠腹腔注射12.0 mg/mL浓度PNS生理盐水溶液2 mL,1次/日,连续两周;Ctrl组不干预.干预后8周各组大鼠处死,采集血清、股骨头标本,行苏木精-伊红(HE)染色、OPG (Osteoprotegerin)及RANKL(Receptor Activator of NF-kB Ligand) Western Blot蛋白质电泳,ELISA法测定PINP(Procollagen Type-I N Propeptide)及TRAP-5b(Tartrate Resistant Acid Phosphatase-5b)血清浓度.结果:PNS干预液氮法ONFH大鼠可降低股骨头空骨陷窝率(P＜0.01),可下调骨组织RANKL(P＜0.01)及血清TRAP-5b(P＜0.05)表达,上调骨组织OPG(P＜0.01)表达,可提高血清PINP水平,但差异无统计学意义.结论:PNS可抑制破骨细胞活性,促进成骨,在骨坏死中发挥保护作用.

目的 观察柚皮苷对骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化能力的影响,并且确定促进MSCs成骨分化的最佳柚皮苷浓度.方法 用不同浓度的柚皮苷培养MSCs后,QPCR检测骨形态发生蛋白(BMP-2)表达量,同时CCK-8法检测不同浓度柚皮苷对MSCs增殖能力影响,确定最佳柚皮苷浓度.将最佳浓度柚皮苷与成骨诱导液分别或共同培养MSCs,观察其对成骨信号轴中Smad1/5/8,Runx2(Runt-related transcription factor-2),成骨细胞特异性转录因子(Osterix) mRNA及蛋白表达的促进作用.结果 柚皮苷对BMP-2 mRNA表达具有明显促进作用(P＜0.05),并且其促进作用与浓度梯度相关.较高浓度(浓度＞1×103mol/L)的柚皮苷能够降低MSCs增殖能力,差异有统计学意义(P＜0.05),而1×104mol/L及以下柚皮苷浓度对MSCs增殖无明显影响,差异无统计学意义(P＞0.05).确定1×10-4mol/L为最佳柚皮苷浓度.柚皮苷组的Runx2、Smad1/5/8及Osterix mRNA及蛋白表达水平显著高于空白组(P＜0.05).而单一成骨诱导液组对MSCs成骨促进作用较单一柚皮苷弱,差异有统计学意义(P＜0.05),柚皮苷与成骨诱导液共培养MSCs后,表达水平较单一柚皮苷组升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 柚皮苷能够促进MSCs成骨分化,并且这一促进作用与成骨信号轴BMP-2/Smads/Runx2/Osterix表达密切相关.

目的 研究桃红四物汤对跟骨关节内骨折内固定术后患者的应用效果.方法 选择2014年1月～2017年1月湖北省中医院骨科接诊的72例跟骨关节内骨折患者进行研究.所有患者随机均分为研究组与对照组.研究组36例患者,采用常规跟骨关节内固定术联合桃红四物汤进行治疗.对照组36例患者,采用常规跟骨关节内固定术进行治疗.术后,对两组患者的骨折愈合情况,临床治疗效果和骨骼形态等情况进行观察比较.结果 研究组患者的疗效优良率(91.67％)明显高于对照组(72.22％),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者的骨折愈合时间显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组(52.78％)的愈合优良率明显低于研究组患者(75.00％),两组数据差异有统计学意义(P<0.05);研究组Gissane角显著大于对照组,两组比较有统计学意义(P<0.05);研究组患者的并发症发生率明显较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 桃红四物汤联合跟骨关节内骨折固定术在治疗跟骨关节内骨折患者时,能够提高临床疗效和愈合优良率,缩短术后愈合时间、改善骨骼形态的恢复、降低并发症发生率.

Objective To screen an ssDNA aptamer for rabbit mesenchymal stem cells (MSCs) and to identify the ability of the aptamer to recognize MSCs of a variety of species origin.Methods MSCs were isolated from the thigh bone of immature rabbits and identified by induced osteogenic and adipogenic differentiation,respectively.Aptamers were screened by cell SELEX (systematic evolution of ligands by exponential enrichment) technique targeting to isolated MSCs.Enrichment of the 5th pool was evaluated through binding assay of FAM modified pool to MSCs by confocal microscopy.The enriched 5th pool was then cloned into pGE-T vector and the cloned sequences were determined randomly.The candidates were chosen based on primary sequence conservation and predicted secondary structure by RNA structure and MEME online analysis.Flow cytometry analysis was used to identify the aptamers binding to MSCs of rabbit, rat, and human origin.Results The isolated MSCs had the potential of osteogenic differentiation and adipogenic differentiation under certain conditions.Aptamer 5-1-12 from 5th enriched pool was characterized as MSCs recognizing aptamer binding to MSCs of rabbit, rat and human origin.Conclusion Aptamer 5-1-12 that recognizes MSCs of different species origin is obtained through live cell-SELEX.

目的:构建趋化因子CXCL12的重组腺病毒表达载体,观察其对间充质干细胞(MSC)中成骨特异性转录因子Runx2表达的影响.方法:将目的基因CXCL12全长cDNA模板进行PCR扩增、酶切后与pHBAd-MCMV-GFP载体结合,获得pHBAd-MCMV-CXCL12-GFP重组载体;将重组载体和包装质粒共转染HEK293细胞进行包装、扩增;利用所携带的绿色荧光蛋白基因测定病毒滴度,观察基因转染效率,QPCR和Western印迹检测CXCL12重组腺病毒转染后MSC中CXCL12和Runx2的表达.结果:酶切、PCR及测序结果证实CXCL12重组腺病毒载体构建成功,转染MSC后CXCL12和Runx2的表达明显升高,AMD3100可以降低CXCL12基因转染后MSC中Runx2的表达.结论:趋化因子CXCL12和MSC表面的CXCR4结合对MSC中成骨特异性转录因子Runx2的表达具有促进作用.

目的:观察Runt相关转录因子2(Runx2)基因过表达对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外迁移能力的影响.方法:分离培养兔MSCs,用已构建的携带Runx2基因的腺病毒载体Ad-Runx2、单纯腺病毒及AMD3100处理MSCs;应用Transwell小室检测MSCs体外迁移能力的变化,QPCR检测基质细胞衍生因子(SDF-1)和趋化因子受体(CXCR4)mRNA的表达,ELISA检测各组细胞培养液上清中SDF-1的含量,Western印迹检测CXCR4蛋白表达水平.结果:Ad-Runx2转染MSCs组细胞迁移数明显增多(P＜0.01),AMD3100处理MSCs后细胞迁移数明显降低(P＜0.01);QPCR、ELISA、Western印迹结果显示Ad-Runx2转染能促进MSCs中SDF-1及CXCR4的表达(P＜0.01).结论:Runx2基因过表达能促进MSCs的体外迁移,这与其激活SDF-1/CXCR4信号轴相关.