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论文（6）

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1Prokaryotic expression and purification of porcine heat shock protein 40 (Hsp40) and preparation of its polyclonal antibody

Qi-zhuang LYU,Chang LIU,Qiu YAN,Yan CHEN,Ye-wen ZHANG,Xu-jian CHEN,Xu DENG

克隆猪热休克蛋白40 (heat shock protein 40,Hsp40)基因并构建其原核表达载体,以纯化的猪Hsp40蛋白为抗原免疫兔制备抗猪Hsp40多克隆抗体.参照GenBank收录的猪Hsp40全基因序列,设计1对特异性扩增其CDS区全序列的引物,利用RT-PCR方法扩增猪Hsp40基因;扩增产物经双酶切后定向克隆至原核表达载体pCzn1-His,测序无误后转化Arctic Express (DE3) RP感受态高效表达宿主菌,优化其表达条件(时间、IPTG浓度、温度)后,将可溶性的猪Hsp40重组蛋白用His-Band Ni+层析柱进行纯化,用纯化的His-Hsp40重组蛋白免疫兔以制备多克隆抗体.采用抗原亲和纯化法对制备的多抗进行纯化,并采用间接ELISA法检测抗体效价.利用Western blot检测重组蛋白的免疫原性和反应原性,以及抗体的特异性.结果显示,克隆得到的猪Hsp40基因片段长度为1 485 bp,表达出的可溶性His-Hsp40重组蛋白相对分子质量约为57 800,制备出的猪Hsp40蛋白多克隆抗体效价为1∶512 000,且该多抗能够特异性识别His-Hsp40重组蛋白和猪肺泡巨噬细胞中的Hsp40蛋白.结果表明,成功克隆了猪Hsp40基因,表达并纯化了猪Hsp40蛋白,制备的兔抗猪Hsp40蛋白多克隆抗体能够有效地应用于猪Hsp40蛋白抗原的检测.

2019Chinese Journal of Veterinary Science（2019）引用：4

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2Progress on PCV-2 Vaccines Based on Cap Protein

Chang LIU,Yan CHEN,Qiu YAN,Qi-zhuang LV

猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)是危害世界养猪业的主要疫病之一,主要由猪圆环病毒2型(PCV-2)引起.该病毒可引起感染猪免疫系统的破坏,造成严重的免疫抑制,继而引发多种病毒/细菌的混合感染与继发感染,给世界养猪业造成了巨大经济损失.近年来疫苗免疫接种是防控PCVAD的有效手段,由于衣壳蛋白(capside,Cap)是PCV-2的主要免疫保护性抗原,因此常被用作研制PCV-2基因工程疫苗的理想靶抗原.论文就PCV-2 Cap蛋白基因工程疫苗的研究进展进行综述,以期为今后PCV-2新型疫苗的研究提供参考.

2019Progress in Veterinary Medicine（2019）引用：4

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3热休克蛋白40在病毒生命周期中作用的研究进展

颜秋,陈艳,刘畅,吕其壮

热休克蛋白(Hsps)又称热激蛋白,其种类多、分布广,具有高度的保守性.Hsp40作为Hsp70的辅助分子伴侣,拥有自主的分子伴侣活性,参与调节细胞的多种生理生化过程.文章以近年来国内外最新研究资料为基础,对Hsp40在几种典型病毒生命周期中的作用进行了总结,以期为有关Hsp40在病毒免疫中作为检测标志物、治疗靶点、免疫佐剂或发挥其他功能的研究提供理论参考.

2018Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine（2018）

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4DETECTION AND GENETIC VARIATION ANALYSIS OFORF2 GENE OF PORCINE CIRCOVIRUS TYPE 2 IN GUANGXI BEIBU GULF REGION

Qi-zhuang LV,Juan LIU,Yan CHEN,Chang LIU,Qiu YAN,Wei-wei CAO,Pei-lun LI,Zhao-zhan MO

为了解猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)在广西北部湾地区的流行情况和其ORF2基因的遗传变异规律,本研究采用PCR方法对2016年采自广西北部湾地区规模猪场和农村散养户的306份疑似PCV2感染猪的血液和组织样品进行了PCV2的病原学检测,同时对分离的4株PCV2ORF2基因进行PCR扩增、克隆和测序,并与GenBank中登录的34株国内外PCV2参考株ORF2序列进行比对和遗传进化分析.结果表明:PCV2检测阳性样品为129份,阳性率为42.16％.随机选取的4份阳性病料PCV2ORF2基因测序结果显示,4个毒株遗传关系上均属于Group 1(PCV2b),其中BBW-1和BBW-2分离株属于1A分支且分别与Fd3株(AY321984)和NL_PMWS_3株(AY484415)同源性较高,BBW-3和BBW-4分离株属于1B分支且BBW-4分离株与HuZhou0301株(AY536756)和NL_Control_1株(AY484407)同源性较高,其ORF2基因核苷酸和氨基酸同源性分别为98.9％～99.5％和93.9％～95.4％,说明该地区PCV2的优势基因型是PCV2b.研究结果不仅有利于掌握广西北部湾地区PCV2流行毒株同源性情况,而且将为该地区(porcine circovirus associated disease,PCVAD)的防治和新型疫苗的研制提供依据.

2018Chinese Journal of Veterinary Parasitology（2018）引用：5

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5Research Progress of Antiviral Effects of Microelement Selenium in Animal Body

Qizhuang LV,Qiu YAN,Yan CHEN,Yanling ZHUO, Daobo WANG

人体正常生命活动离不开微量元素硒,硒具有良好的抗氧化性、抗肿瘤性和抗重金属性,不仅能参与调节机体免疫反应和激素水平,而且可以抑制多种病毒的复制.人体对硒摄取过多或不足都会导致相应疾病.由于自然界硒分布不均,我国人口普遍缺硒,适当且有效地补硒对打造全民健康极其重要.本文以近年来国内外最新研究资料为基础,对硒的几种典型抗病毒作用进行了系统的总结,以期为硒抗病毒作用相关研究提供理论参考,为富硒食品、含硒药物、富硒保健品等硒产品的研发与推广提供理论支撑.

2018Soils（2018）引用：5

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6Research Progress on Cellular Interacting-proteins of Capsid Protein of PCV2

Yan CHEN,Qiu YAN,Chang LIU,Qi-zhuang LV

猪圆环病毒Ⅱ型(porcine circovirus virus type 2,PCV2)可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征等疾病的综合感染.PCV2负义链上第2个开放阅读框编码的Cap蛋白是唯一的结构蛋白.目前,对PCV2致病机理的研究也都集中于Cap蛋白,尤其是Cap蛋白与其胞内互作蛋白之间的相互作用等方面.文章结合国内外最新研究进展,对PCV2 Cap蛋白的胞内互作蛋白进行了综述,以期为揭示Cap蛋白在PCV2致病中的作用提供参考.

2018Acta Ecologae Animalis Domastici引用：1

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