人星状病毒(Human astrovirus,HAstV)属于星状病毒科,包含多种基因型,是引起急性胃肠炎散发病例的重要病原之一,偶尔也可在人员密集场所引起疫情的暴发.除消化系统以外,HAstV还可以在其他系统中被检出,其中中枢神经系统相关的研究最为广泛.目前HAstV的检测方法较前有所完善,已有多种分子检测技术和细胞模型被用于HAstV的研究和检测.本文就HAstV的病原学特征、常用检测方法、所致疾病、流行病学特征以及防控措施进行综述.
疱疹性咽峡炎(Herpangina,HA)和手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD)是婴幼儿最常见的由肠道病毒(Enteroviruses,EVs)感染引起的病毒性传染病,同时HA和HFMD的病原体谱也因地区和年份不同而异.为了确定引起2021年承德市HA和HFMD的病原体组成及其临床特征,本研究收集2021年6月-12月在承德医学院第二临床学院儿科就诊的HA和HFMD患者咽拭子标本69份,通过逆转录-聚合酶链式反应扩增EV的5'UTR区和5'UTR-VP4-VP2区进行EV的鉴定、型别分析及临床特征分析.结果显示,共有30例HA和HFMD患者呈现EV阳性;共计25份EV阳性标本获得655bp的EV 5'UTR-VP4-VP2区扩增产物和序列测序完成,EV型别分析为48.0％(12/25)患者为柯萨奇病毒 A4(Coxsackievirus-A4,CV-A4)感染、52.0％(13/25)患者为CV-A6感染,其中CV-A4感染引起的HA和HFMD各为11例和1例、CV-A6感染引起的HA和HFMD各为5例和8例.CV-A4主要集中在7-9月且以5岁以下儿童为主要感染对象,其中7月份最多(7例);CV-A6则在6-11月均有分布且各年龄段儿童均可感染.与CV-A4感染者相比,CV-A6感染者的C-反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)显著升高(P＜0.05).CV-A4和CV-A6引起承德市2021年HA和HFMD的暴发,应该加强HA和HFMD患者非肠道病毒A71型(Enterovirus-A71,EV-A71)和CV-A16病原体的监测,以便于HA和HFMD的防控.
通过真核系统表达纯化新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的全长核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,N蛋白),分析其抗原性与应用性能.将SARS-CoV-2N蛋白表达质粒转染HEK-293T细胞后,通过Western Blot和免疫荧光验证蛋白表达以及表达定位.对N蛋白进行纯化后,通过Western Blot和ELISA并采用多种血清样本(WHO参比品血清、正常人血清、新冠灭活疫苗接种后血清、新冠感染者恢复期血清)对该N蛋白在血清抗体检测中的应用性能进行分析.比较真核系统与原核系统表达的N蛋白抗原性上的差异,并分析基于真核系统表达N蛋白构建的IgG抗体ELISA检测体系与获批的商品化新冠RBD(Receptor binding domain)IgG抗体ELISA检测试剂盒及用于检测中和抗体的活病毒微量中和试验结果间的相关性.结果显示,真核系统表达的全长N蛋白主要定位于胞质,作为抗原检测新冠IgG抗体,具有比原核系统表达的N蛋白更高的检测灵敏度.针对新冠感染者恢复期血清,基于哺乳动物细胞表达的N蛋白构建的ELISA体系检测的IgG抗体滴度与试剂盒检测的RBD-IgG抗体滴度以及中和抗体滴度之间具有良好的相关性.本研究表明真核系统表达纯化的SARS-CoV-2N蛋白具有良好的抗原性与检测性能,为SARS-CoV-2血清学检测方法的建立与优化以及进一步明确N蛋白诱发的免疫反应特点提供了参考.
本文将高通量测序技术应用于新型冠状病毒感染(COVID-19)的疫情防控当中,从基因组水平上了解新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的分子学特征及变异情况,从而为疫情的防控提供科学的参考及准确的研判依据.我们选取2022年8月-9月庆阳市报告的新冠疫情本土感染者标本作为研究对象,对标本进行核酸检测和病毒全基因组测序并进行序列比对,使用MEGA分析软件基于邻接法构建病毒进化树,从而了解病毒的分子学特征及相关性.本研究所选取的9例病例均为普通型病例,核酸检测Ct值均较低.Nextclade分型结果显示:9条序列均属于21L型Omicron变异株;Pangolin分型结果显示:9条序列均处于Pangolin谱系中的BA.2.76进化分支上.与武汉参考株Wuhan-Hu-1(NC_045512.2)相比,9条SARS-CoV-2序列的核苷酸同源性中位数为94.6％,核苷酸突变类型包括76～78个替换突变和3处缺失突变,氨基酸突变位点共涉及10个基因编码框,按氨基酸错义突变总数由多到少依次为:S蛋白区,ORF1ab区,N蛋白区,M蛋白区,E蛋白区和ORF3a、ORF6、ORF8、ORF9b区.进化分析结果显示:本研究获得的9条SARS-CoV-2全基因组序列处于Omicron变异株BA.2.76谱系.SARS-CoV-2在流行传播过程中,不断出现传播能力增强、抗体有效性降低及免疫逃避的新毒株,未来也将可能出现新的变异株,庆阳市首次将高通量测序技术应用到新冠病毒感染的疫情防控当中,从基因组水平上了解病毒的分子学特征,对监测庆阳市疫情防控及准确的研判具有重要意义.
为了解安徽省2016-2020年手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)流行特征与病原谱构成,及分析CVA6(Coxsackievirus A6,CVA6)VP1区基因进化情况.本研究收集2016-2020年安徽省HFMD病例流行病学资料,描述性流行病学方法分析病例三间分布情况.随机选取480份HFMD其他肠道病毒阳性咽拭子样本,RT-PCR扩增肠道病毒VP1基因片段,测定基因序列并鉴定其他肠道病毒基因型别.生物软件分析部分代表性CVA6基因序列相似性并构建系统发育树.流行病学结果显示,2016-2020年安徽省HFMD发病率仍处于较高水平,但重症病例与死亡病例数有所减少,5个年度均以其他肠道病毒流行为主,五岁以下散居儿童为主要患病人群,男女性别比为1.50:1.2016-2019年度发病均呈现为双峰流行模式.病原分型鉴定结果为CVA6 215例(215/245,87.76％),CVA10 16 例(16/245,6.53％),CVA4 12 例(12/245,4.90％),CVA5 1 例(1/245,0.41％),CVA2 1 例(1/245,0.41％).选取的60株代表性CVA6 VP1区序列相似性分析表明,各序列间VP1核苷酸序列相似性为91.6％～100％,氨基酸序列相似性为97.4％～100％;与D3基因型代表株之间核苷酸序列相似性为90.7％～98.9％,氨基酸序列相似性为96.7％～100％;与CVA6原型株核苷酸序列相似性为82.3％～83.9％,氨基酸序列相似性为95.1％～96.7％.进化分析显示,CVA6划分为A-D四个基因型,60株CVA6毒株均属于D3基因亚型中的D3a分支,为中国大陆地区优势流行型别.应加强对安徽省CVA6及其他肠道病毒监测,这对制定减轻HFMD疾病负担以及防控HFMD策略具有重要意义.
本研究针对新冠病毒Omicron BA.4/5的受体结合域(Receptor binding domain,RBD)构建一个连接Fc受体的二聚体蛋白BA.4/5-RBD-Fc(BRF)并评价其免疫原性.结果显示,两种佐剂组小鼠的二免后血清均可产生高滴度的IgG抗体且显著高于一免后血清(P＜0.0001),BRF+A1OH/CpG组小鼠血清产生较为平衡的IgG1和IgG2a抗体应答,而BRF+BFA03组小鼠血清能产生更多的偏向Th2应答的IgG1抗体,且IgG1/IgG2a比值显著高于BRF+AlOH/CpG组(P＜0.0001).BRF+AlOH/CpG组产生的 Thl应答的细胞因子干扰素 γ(Interferon-γ,IFN-γ)高于BRF+BFA03组(P＜0.01),而产生的Th2应答细胞因子白介素4(Interleukin-4,IL-4)IL-4显著低于BRF+BFA03组(P＜0.01).BRF蛋白结合不同佐剂两次免疫小鼠后的血清均可以有效中和目前Omicron主要的流行亚型BA.2与BA.4活病毒,产生高达19 334598和17 224096的中和抗体滴度.因此,BRF蛋白诱导小鼠血清产生的中和抗体针对Omicron系列变异株具有一定的广谱性,AlOH/CpG佐剂可以使BRF蛋白产生偏向Th1的免疫应答反应,而BFA03佐剂产生明显偏向Th2的免疫应答反应.本研究为新冠Omicron变异株亚单位疫苗的研发提供有效的科学依据.
本文综述了近年来热休克蛋白70(Heat shock protein 70,Hsp70)各亚型在RNA病毒感染中的作用及机制研究进展,以期总结梳理可能规律并发掘潜在抗RNA病毒途径.通过Scifinder,PubMed及中国知网等数据库检索高相关度文献,对Hsp70在RNA病毒感染的作用及机制研究进行分析比较归纳及讨论.Hsp70在RNA病毒感染中的作用机制呈现两重性:作为促感染因子辅助病毒感染,或作为免疫因子协助宿主抵抗病毒感染.Hsp70是对抗致病RNA病毒的切入点之一,在RNA病毒感染预防治疗上具有发展潜力.
收集11种不同厂家的灭活型样本保存液,将甲型流感病毒加入保存液和生理盐水中,在4℃、25℃和37℃条件下保存0 h、2 h、4 h、6 h和24 h后,分别提取各组的病毒核酸,并通过逆转录实时荧光PCR检测病毒载量变化,以探究不同样本保存液对病毒核酸保护效果是否存在差异.结果发现不同样本保存液中的病毒载量随保存时间和温度变化存在显著差异.据此可将11种灭活型样本保存液的保存效果分为四类:①优秀产品:在任一温度(4℃、25℃、37℃)条件下,即使保存24h时病毒核酸都未发生明显降解,占比27.2％(3/11);②良好产品:低温(4℃)和室温(25℃)情况下核酸未出现降解,但在高温(37℃)条件下6 h后保存效果明显下降,占比27.2％(3/11);③合格产品:低温(4℃)条件下对病毒核酸具有较好的保护效果,但在室温(25℃)和高温(37℃)情况下随保存时间延长其保护效果显著下降,占比18.1％(2/11);④不合格产品:任一保存条件下对病毒核酸的保护效果都较差,甚至加入病毒后立即导致病毒核酸发生快速降解,占比27.2％(3/11).以上结果说明不同厂家样本保存液对病毒核酸的保护效果存在显著差异,可能会导致病毒核酸检测出现假阴性结果.因此,需重点加强对样本保存液的质量监管,以有效保障病毒核酸检测,尤其是新冠核酸检测质量,以更好地做好疫情防控工作.
建立寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)、登革病毒(Dengue virus,DENV)和黄热病毒(Yellow fever virus,YFV)3种蚊媒传染病核酸快速实时荧光定量检测方法.以寨卡病毒polyprotein gene基因,登革病毒NS5基因,黄热病毒3'UTR基因作为靶区域设计相应的引物探针,探针的5'端分别标记不同的荧光基团,3'端标记相应的淬灭基团,对扩增体系中引物探针浓度、热启动Taq酶浓度、逆转录酶浓度、RNA酶抑制剂浓度分别进行优化.构建了一种可同时用于寨卡病毒、登革病毒和黄热病毒三重快速荧光PCR检测体系,25μL扩增体系中ZIKV、DENV和YFV的引物浓度分别为 200 nmol/L、240 nmol/L 和 240 nmol/L;探针浓度分别为 200 nmol/L、240 nmol/L 和 80 nmol/L;热启动Taq酶、逆转录酶和RNA酶抑制剂的终浓度为分别为2.5U/反应、60U/反应和80U/反应.该检测体系对3种病原体的最低检测限均为1.0×103拷贝/mL,在MIC IAT C2-48和ABI7500两种不同型号的实时荧光定量PCR仪上检测结果一致,对登革热、寨卡和黄热病毒血清样本检测均为阳性扩增,与丙型肝炎病毒、乙型脑炎病毒、副流感病毒、腺病毒等无交叉反应.因此,本研究建立的寨卡病毒、登革病毒和黄热病毒的三重快速荧光PCR检测体系可用于对上述3种病毒的定性或定量检测.
新型冠状病毒Omicron变异株出现之后,在全球暴发流行过程中不断进化出传播速度更快、免疫逃逸能力更强的进化分支,为了探究BA.1变异株在全球暴发流行的特征及刺突蛋白(Spike,S)基因的进化特征,本研究对其全基因序列的全球报告情况和S基因的进化特征进行了分析.本文通过全球共享流感数据倡议组织(Global Initiative of Sharing All Influenza Data,GISAID)获取 Omicron BA.1 系列变异株的全基因序列信息,分析 BA.1 系列变异株S基因氨基酸突变并构建系统进化树和进行贝叶斯系统进化分析.本研究提示全球约有1.2亿人被BA.1系列变异株感染,全球提交的BA.1系列变异株序列数在其出现2个月后达到高峰,5个月后占新型冠状病毒的比例下降到4.38％,累计提交BA.1全基因序列最多的区域是欧洲、美洲;截止2022年10月,BA.1系列变异株中序列提交数占绝对优势的是BA.1.1(42.07％),其次是BA.1(18.81％).对S基因的氨基酸变异分析显示BA.1有56个进化分支,其中48个分支稳定遗传了 Omicron原始株S蛋白中的18个氨基酸突变位点.对BA.1 S基因的进化分析显示其共同祖先形成时间(TMRCA)可追溯到2020年11月,S基因平均碱基替代速率为9.36×10-4替换/位点/年,2021年3月BA.1流行过程中形成两个独立簇,推测G346K、G446S突变位点可能是提高病毒传播力的主要突变.本研究分析了 BA.1系列变异株的流行及进化特征,其在短时间内迅速替代Delta毒株,成为全球绝对优势流行株,并有迅速被BA.2亚型代替的潜力.此外,BA.1在全球3～4个月的流行中,逐渐演变出56个进化分支,在全球流行时间短、出现部分稳定遗传的氨基酸突变、进化速率较快.因此,需密切关注Omicron系列变异株基因序列变异变迁、监测新增突变位点,及时研判新变异株的传播力、免疫逃逸能力和致病力.
了解2011-2019年G1P[8]型A组轮状病毒(Group A rotavirus,RVA)在我国腹泻住院患儿中的流行病学和临床特征.收集2011年1月-2019年12月我国病毒性腹泻监测网络数据.监测网数据的采集和整理采用EpiData 3.0软件和Excel 2010,应用SPSS 26.0软件进行数据分析.2011-2019年共采集到我国5岁以下急性胃肠炎住院患儿标本共计47 386份,结果显示G1P[8]型RVA阳性率为1.98％(938/47 386),G1P[8]型RVA感染不具有明显的性别分布特征.G1P[8]型RVA的流行季节为秋冬季,夏季该基因型有小暴发的情况发生.G1P[8]型RVA住院患儿在腹泻严重程度(x2=0.177,P=0.915,P＞0.05)与非G1P[8]型RVA住院患儿无明显差异,G1P[8]型RVA相对于非G1P[8]型RVA患儿在发热(x2=22.572,P=0,P＜0.05)、皮疹、肺炎、败血症等并发症(x2=12.921,P=0,P＜0.05)少且轻.2011-2019年我国G1P[8]型RVA流行趋势逐渐下降,季节高峰为秋冬季,夏季偶有暴发,G1P[8]型RVA发热等并发症较非G1P[8]型RVA轻.本研究为RVA疫苗候选毒株选择提供数据参考,为G1P[8]型RVA防控和治疗提供基础数据支持.
新型冠状病毒感染者在康复后可能会出现长期且持续的症状,受累器官系统广泛,给感染者造成健康损害.新型冠状病毒仍可能在全球范围内持续流行且免疫逃逸突变株不断出现,新冠肺炎后综合征已成为人类与新冠病毒抗衡道路上的又一重要挑战.本文对新冠肺炎长期健康损害的发生风险、临床表现及影响因素进行综述,以期为新冠肺炎后综合征的管理及疫情防控策略制定提供参考.
由呼吸道病毒引起的疾病严重威胁着人类的生命健康,为了建立一种快速高通量的呼吸道病毒核酸检测方法,本研究将多重PCR技术同液相芯片技术结合起来,针对呼吸道合胞病毒A型和B型、乙型流感病毒Victoria系和Yamagata系、甲型流感病毒H1型和H3型以及新冠病毒等常见的七种呼吸道病毒,初步建立了七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术,评价了方法的特异性、敏感性和重复性,并使用来自安徽省疾控的25份临床急性期样本核酸对方法进行验证.结果显示,建立起的基于液相芯片多重核酸检测方法可特异性识别七种目标呼吸道病毒的靶基因序列,与包括副流感病毒在内的9种非目标呼吸道病毒无交叉反应.对七种病毒核酸进行十倍稀释液相检测,其中H3、BV、RSVB可以检出 102拷贝/μL,BY、RSVA和SARS-CoV-2可以检出 103拷贝/μL,对H1的检测限为104拷贝/μL.25份样本核酸检测结果与实际相符.结果表明,本研究建立的七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术具有特异性强、敏感性高、稳定性好等特点,可用于临床样本的快速检测,为呼吸道类传染病的液相芯片诊断奠定了实验室基础.
各种病毒的持续暴发提示我们必须准备好广谱抗病毒药物.病毒复制必须通过宿主细胞提供原料,因此靶向宿主抗病毒(Host-targeting antiviral,HTA)药物具有广谱性、前瞻性和低耐药性,其前景广阔.研究发现,宿主二氢乳清酸脱氢酶(Dihydroorotate dehydrogenase,DHODH)是许多急性感染性病毒复制所必需的普遍宿主因子之一.DHODH是一种限速酶,催化嘧啶从头合成途径的第四步反应.因此,它也被开发为许多依赖细胞嘧啶资源疾病的治疗靶点,如自身免疫性疾病、病毒或细菌感染.值得注意的是,DHODH抑制剂(Dihydroorotate dehydrogenase inhibitor,DHODHi)对新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)也有抑制作用.本文综述了 DHODHi抗病毒的原理和抗病毒机制,期待能为DHODHi的开发提供帮助,早日研发出更多广谱抗病毒新药.
限制性酶切-组装是构建和改造腺病毒载体的一种简便方法,本研究用该方法构建同时携带GFP和萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase,Fluc)报告基因的猴1型腺病毒(Simian Adenovirus 1,SAdV-1)载体.PCR分别扩增GFP和Fluc基因,重叠延伸PCR将两个目的基因通过T2A短肽编码序列串联得到融合基因GFluc.限制性内切酶SpeI酶切腺病毒质粒pKSAV1-EG,去除原有的外源基因,将载体片段与GFluc片段进行限制性酶切-组装,产物转化大肠杆菌感受态细胞,获得腺病毒质粒pKSAV1-GFluc.通过限制性内切酶酶切分析、PCR产物测序证实质粒构建正确.pKSAV1-GFluc质粒经SwaI酶切线性化后转染SAdV-1包装细胞系293SE13,4 d后GFP+细胞形成荧光灶,并持续增大,表明重组病毒拯救成功;对重组病毒基因组进行了限制性酶切鉴定.扩增病毒并进行纯化,在细胞水平和动物模型中检测到目的蛋白GFP和Fluc的表达.本研究成功构建同时携带GFP和Fluc报告基因的SAdV-1载体,显示了限制性酶切-组装方法的易用性和可靠性,并为研究SAdV-1载体在小鼠模型的组织分布奠定基础.
人源诺如病毒(Human norovirus,HuNoV)是全球范围内最重要的食源性病毒之一,牡蛎是其主要的食源性传播载体.已有研究发现:牡蛎热休克蛋白70(oyster Heat shock protein 70,oHSP70)可吸附不同基因型HuNoV,但oHSP70吸附病毒的功能域不清楚.本研究对oHSP70的N端和C端分别进行克隆表达纯化,并采用ELISA方法测定其与不同基因型HuNoV主要衣壳蛋白P功能域的结合能力.实验结果表明:成功获得N端和C端oHSP70的原核表达产物;N端oHSP70与不同基因型HuNoV P蛋白结合能力显著强于C端(P＜0.05).因此,N端oHSP70是结合HuNoV P蛋白的主要结构域.本研究结果为进一步揭示oHSP70与HuNoV互作的分子机制提供了理论支撑.
2021年11月在南非首次发现严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)Omicron变异株(B.1.1.529),随后世卫组织将该毒株定义为第五种关注变体(VOC).与其他四种VOC(Alpha、Beta、Gamma和Delta)相比,Omicron是突变最多的毒株,更易传播和发生免疫逃逸.如今Omicron正发展成为全球许多国家的主要毒株,给预防和控制2019年冠状病毒病(COVID-19)带来新的挑战.本文章旨在对Omicron变异株的流行病学、突变及来源、传染性、核酸和抗原检测、临床致病性、疫苗反应性等信息作一简要综述,以期为监测、预防和疫苗研发策略提供科学参考.
肠道病毒A71型(Enterovirus-A71,EV-A71)能够活化宿主细胞的自噬并依赖自噬促进其复制,然而EV-A71的亚单位蛋白对自噬的活化目前仍不清楚.为探讨EV-A71亚单位蛋白对人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞自噬活化的影响,将EV-A71的亚单位蛋白重组真核质粒转染至RD细胞,采用抑制剂MK-2206阻断PI3K/Akt途径,共聚焦显微镜和免疫印迹检测自噬活化.过表达EV-A71亚单位蛋白的RD细胞中PI3K/Akt途径、p38、JNK和ERK途径均呈现不同程度活化,同时RD细胞呈现出绿色荧光表明自噬发生活化,特别是EV-A71的VP2和2A.EV-A71亚单位蛋白使LC3-Ⅱ/LC3-I的转化水平提升,EV-A71亚单位蛋白(VP2、VP3、VP4、2A、2B和2C)显著提升p62的表达水平,EV-A71 VP1显著下调p62的表达水平但显著上调LAMP-I和LAMP-2的表达水平.阻断PI3K/Akt途径后,过表达EV-A71亚单位蛋白的RD细胞绿色荧光强度显著减弱、自噬被阻断,同时LC3-II/LC3-I的转化水平显著降低而p62的表达水平提升,过表达EV-A71 VP1能提升p62表达水平但降低LAMP-1表达水平.因此,EV-A71亚单位蛋白能够不同程度依赖PI3K/Akt途径活化细胞自噬.
为了解我国关于西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)文献的各项研究特征,本文应用文献计量学方法对1942-2021年中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)数据库收录的WNV文献进行分析.由于1999年美国出现WNV暴发流行,全球发文量显著增加,2006年达到峰值,将发文情况总体分为3个阶段:1999年之前对于WNV的关注度有限;1999-2006年,全球整体发文量大幅增加,国内文献数量随之增加,以综述和国外疫情介绍类为主;2006年后全球发文量在300篇/年左右,国内文献类型以实验研究类为主.当前研究热点主要集中在病原学机制研究、暴发疫情、监测与检测、传播媒介和传播模式等方面,而国内以检测方法的建立为主.国内WNV研究主要局限在数家国家级研究机构.鉴于中国已在局部地区发现WNV流行,在今后的研究工作中,亟需在开展WNV病原学、致病机制研究的基础上,建立全国监测体系、提高检测能力、扩大监测范围、增加检测内容,为WNV病防控策略的制定及潜在暴发流行的应对提供科学依据.
利用序贯免疫具有较高中和效价以及较低副反应效果的特性,探讨一种具有Wuhan株序列的小剂量S1蛋白编码mRNA疫苗和具有变异株突变特征的蛋白疫苗的序贯免疫策略.制备自主设计序列的mRNA和蛋白疫苗,经测序,转录表达及抗原鉴定后免疫小鼠,分别检测不同免疫策略诱导的中和抗体、抗S蛋白IgG抗体以及特异性T细胞增殖情况.实验用mRNA疫苗能够在293细胞中有效翻译且呈现明显的量效关系;具有多种变异株突变位点的蛋白疫苗能够为患者恢复期血清和抗S蛋白抗体所识别.两种疫苗组合经皮内和肌肉序贯免疫小鼠能够诱导较单剂免疫或同源加强策略更高的,包括中和抗体的抗体反应,其可以维持至加强免疫后的140d.另外,其诱导的血清能够识别不同变异株的S1蛋白.序贯免疫诱导的特异分泌IFN-γT细胞增殖反应亦显示了类似的结果.mRNA/蛋白抗原组合疫苗进行序贯免疫的策略具有能够产生较高中和抗体、维持时间较长和易于针对不同变异株设计快速反应的优点,可以作为应对新冠变异株的候选疫苗策略.
