目的 基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念,建立小续命汤提取液喷雾干燥工艺.方法 采用Plackeet-Burmann设计从药液相对密度、进料速度、进风温度、药液温度和雾化压力中筛选关键工艺参数(Critical Process Parameter,CPP),运用中心点复合设计实验对筛选得到的CPP进行优化,建立小续命汤提取液喷雾干燥工艺设计空间,同时建立物理指纹图谱并进行相似度评价.结果 药液相对密度和药液温度为关键工艺参数,CPP优化后构建的设计空间为药液相对密度1.07～1.10,药液温度30～33℃,5批验证试验的喷干粉物理指纹图谱相似度均大于0.99.结论 基于QbD理念建立的小续命汤提取液喷雾干燥工艺稳定可行,可为小续命汤颗粒中试放大研究提供参考.
再生生物学中一个基本且未解决的问题是组织在损伤后如何恢复稳态.回答这个问题对于理解炎症性肠病和癌症等慢性疾病的病因至关重要.研究人员使用果蝇中肠对此进行了研究,发现在再生过程中,胆碱能神经元亚群触发肠上皮细胞(肠细胞)中的Ca2+电流,以促进稳态的恢复.
探寻成分或处方间的最优配比是药物制剂研究的一个重要方向之一.近年来,D-最优混料设计被广泛应用于药物制剂的研究,通过合理选择试验点,全面、高效地优化药物制剂处方从而得到最优配比,以满足制剂成型工艺的要求.本文通过查阅文献,回顾了D-最优混料设计在国内外药物制剂研究中的应用情况,重点对其基本原理、步骤及适用性进行分析,为该方法在药物制剂研发中的合理应用提供参考.
在人类基因组中观察到的绝大多数错义突变具有未知的临床意义.研究人员开发了AlphaMissense,这是一种基于AlphaFold的新AI模型,它在人类和灵长类物种变异群体频率数据库上进行了微调,用于预测错义突变的致病性.
神经元细胞丢失是阿尔茨海默病(AD)的一个关键特征,但其潜在机制仍不清楚.研究人员将人类或小鼠神经元异种移植到AD小鼠模型的大脑中.只有人类神经元表现出缠结、Gallyas银染、颗粒空泡性神经变性(GVD)、磷酸化的tau血液生物标志物和大量的神经元细胞丢失.
目的 探究丁哌卡因对胰腺癌PANC-1细胞氧化应激和凋亡的影响.方法 以不同浓度(0.07、0.15、0.3、0.6、1.25、2.5、5、10、20、40、80 mmol/L)丁哌卡因处理胰腺癌PANC-1细胞,采用CCK8试剂盒检测其对细胞增殖能力的影响,筛选实验浓度.采用TUNEL染色观察细胞凋亡,生化试剂盒检测氧化应激指标,荧光探针检测活性氧(ROS)含量,流式细胞术检测线粒体膜电位,实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测生长标记物和细胞凋亡标记物的表达.结果 与对照组比较,2.5、5 mmol/L丁哌卡因组p21 mRNA及蛋白表达、细胞凋亡率、上清液丙二醛(MDA)含量、ROS含量、JC-1单体百分比、Bax/Bcl-2、cleaved cas3/cas3水平增加,Survivin、Ki67 mRNA及蛋白表达、上清液SOD、GSH含量、c-Myc蛋白表达减少(P<0.05).结论 高浓度丁哌卡因可诱导胰腺癌PANC-1细胞增殖抑制和凋亡,提高细胞内氧化应激水平.
目的 建立对道地阳春砂和非道地阳春砂快速鉴别的顶空-气相色谱-离子迁移谱(HS-GC-IMS)方法,为阳春砂的质量评价提供思路.方法 使用MXT-WAX强极性色谱柱检测40批道地阳春砂和10批非道地阳春砂的挥发性指纹图谱,分析其特征峰进行主成分分析,并采用K-临近算法建立阳春砂的辨别模型.结果 获得3个道地阳春砂挥发性特征峰,10个非道地阳春砂特征峰;主成分1和主成分2累计贡献率为88％;K-临近算法训练集和预测集的识别准确率为100％.结论 HS-GC-IMS结合化学计量学的方法表明道地与非道地阳春砂的挥发性特征物质存在差异,为中药的近源品种鉴别提供参考方法.
目的 探讨血清中TLR4、NF-κB水平对儿童难治性肺炎支原体肺炎(refractory mycoplasma pneumoniaepneumonia,RMPP)的预测价值.方法 选取2020年6月―2022年7月郑州市第一人民医院儿科、河南省人民医院儿科二病区住院治疗的确诊为肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿69例,其中RMPP组33例,普通MPP组36例.应用ROC(receiver operating characteristic)曲线预测RMPP的特异性指标.结果 两组MPP患儿血清TLR4、NF-κB水平比较差异有统计学意义(t=6.382、9.850,P<0.05).相关性分析显示TLR4、NF-κB水平与RMPP呈正相关(rs=0.642、0.791,均P<0.05).当TLR4值为8.36 ng/mL时,AUC(曲线下面积)为0.871,诊断出RMPP的敏感度是84.8％,特异度72.2％;当NF-κB值为572.12 pg/mL时,AUC为0.957,诊断出RMPP的敏感度是97.0％,特异度83.3％.两因子联合检测,预测RMPP的敏感度为90.9％,特异度为94.4％.多因素logistic回归分析显示:血清TLR4>8.36 ng/mL(OR=1.918,95％CI:1.058～3.479,P=0.032)及NF-κB>572.12 pg/mL(OR=1.028,95％CI:1.008～1.046,P=0.004)是发展为RMPP的独立危险因素.结论 RMPP患儿血清中TLR4、NF-κB表达水平增高,早期检测TLR4、NF-κB水平对RMPP有一定预测价值,且为发生RMPP的独立危险因素,两者联合检测诊断价值明显提升.
目的 探讨川续断皂苷Ⅵ在大鼠正畸牙移动、牙槽骨改建以及Notch1信号通路中的作用.方法 40只大鼠建立正畸牙移动模型,随机分为模型组、川续断皂苷Ⅵ组、抑制剂组和抑制剂+川续断皂苷Ⅵ组,每组10只,另设对照组.川续断皂苷Ⅵ组大鼠在双侧上颌第一磨牙近中牙龈黏膜下注射川续断皂苷Ⅵ10 mg/kg,抑制剂组大鼠在同样位置注射γ-外分泌酶抑制剂(DAPT)溶液0.6 mL/kg,抑制剂+川续断皂苷Ⅵ组大鼠在同样位置注射DAPT溶液0.6 mL/kg,1 h后再注射川续断皂苷Ⅵ10 mg/kg,1次/2 d,共注射7次.测量各组大鼠第一磨牙移动距离,HE染色观察牙周组织病理学改变,TRAP染色检测破骨细胞数,RT-PCR法和蛋白印迹法检测牙周组织中Nfatc、CTSK、MMP-9、Notch1、Jagged1 mRNA和蛋白水平.结果 模型组和抑制剂组大鼠牙周膜纤维排列紊乱,宽度增加,骨吸收陷窝少,抑制剂组表现的更明显;川续断皂苷Ⅵ组和抑制剂+川续断皂苷Ⅵ组牙周膜纤维排列较规则,增宽不明显,骨吸收陷窝增多,川续断皂苷Ⅵ组大鼠以上各变化更显著;与模型组比较,川续断皂苷Ⅵ组大鼠第一磨牙移动距离增长,破骨细胞数增多,Nfatc、CTSK、MMP-9、Notch 1、Jagged 1 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);与川续断皂苷Ⅵ组比较,抑制剂+川续断皂苷Ⅵ组大鼠第一磨牙移动距离缩短,破骨细胞数减少,Nfatc、CTSK、MMP-9、Notch 1、Jagged 1 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05);与抑制剂组比较,抑制剂+川续断皂苷Ⅵ组大鼠第一磨牙移动距离增长,破骨细胞数增多,Nfatc、CTSK、MMP-9、Notch 1、Jagged 1 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05).结论 川续断皂苷Ⅵ可加速正畸牙移动,增加牙周组织中破骨细胞数量,促进牙周改建,其可能是通过激活Notch1信号通路发挥作用.
胰岛素抵抗是代谢综合征和二型糖尿病的主要病理生理学基础.先前的宏基因组研究描述了肠道菌群的特征及其在胰岛素抵抗中代谢主要营养物质的作用.特别是共生菌的碳水化合物代谢被认为贡献了高达10％的宿主获取的总能量,从而在肥胖和糖尿病前期的发病机理中发挥作用.
目的 比较不同的定量方法和总DNA制备方法对实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)测定治疗性HBV DNA疫苗工程菌的质粒拷贝数(plasmid copy number,PCN)的影响,为建立快速简便的治疗性HBV DNA疫苗工程菌的PCN测定方法提供参考.方法 通过试剂盒提取法、Triton X-100煮沸法和培养基煮沸法分别制备总DNA样品用于qPCR检测,使用绝对定量方法和相对定量方法计算不同制备方法样品的PCN,并对测定结果进行统计学分析.结果 试剂盒提取法制备的样品经绝对定量和相对定量计算PCN,结果分别为43.10±4.02和42.92±3.98,显著低于Triton X-100煮沸法的结果(69.32±6.51和68.58±6.42)以及培养基煮沸法的结果(75.73±7.46和76.15±7.50).任一样品制备方法,比较其绝对定量和相对定量结果,差异均无统计学意义.结论 qPCR的绝对定量和相对定量计算方法都适用于治疗性HBV DNA疫苗工程菌PCN测定,Triton X-100煮沸法更适合于总DNA模板制备.
目的 建立积雪草标准汤剂指纹图谱以及同时测定3种成分含量的UPLC方法,对不同产地积雪草饮片制成的标准汤剂的质量进行评价.方法 采用UPLC方法进行测定,采用Waters CORTECS T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.6μm),乙腈-含0.15％磷酸的2 mmol/L倍他环糊精溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.30 mL/min,柱温为35℃,紫外检测波长为205 nm.建立19批积雪草标准汤剂的指纹图谱,同时测定槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、积雪草苷、羟基积雪草苷的含量,并采用相似度评价和主成分分析对结果进行分析.结果 积雪草标准汤剂指纹图谱标定了11个共有峰,并指认了其中5个色谱峰,相似度结果显示19批样品的相似度均大于0.900.主成分分析共提取了2个主成分,主成分得分图表明产地对积雪草标准汤剂质量的影响并不显著.槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷含量范围在0.12％～0.60％,积雪草苷和羟基积雪草苷总含量范围在1.86％～5.96％.结论 本研究建立的积雪草标准汤剂指纹图谱和含量测定方法简便、快速、准确,可为积雪草标准汤剂的质量评价提供参考.
目的 探讨硫化氢(H2S)对需氧菌性阴道炎的作用及其分子机制.方法 使用大肠埃希菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染分别制备细胞(VK2/E6E7)和大鼠需氧菌性阴道炎模型.硫氢化钠(NaHS)被用为H2S供体.采用CCK-8、蛋白印迹、qPCR和流式细胞术等分别检测细胞活性、蛋白表达、mRNA表达和细胞内氯离子水平.结果 E.coli和S.aureus感染促进VK2/E6E7细胞和阴道组织中IL-6和IL-1β的生成,NaHS能显著抑制这些促炎细胞因子的产生.NaHS显著抑制E.coli或S.aureus感染引起的NF-κB(p65)磷酸化.NaHS显著降低E.coli和S.aureus感染阴道上皮细胞内的氯离子浓度.结论 H2S可能通过降低细胞内氯离子浓度而抑制NF-κB信号通路的激活,从而抑制E.coli和S.aureus感染引起的阴道炎症反应.H2S可开发成为治疗需氧菌性阴道炎的潜在药物.
口腔崩解片(orally disintegrating tablets,ODT)因服用方便、起效迅速被广泛应用于临床,尤其是儿童用药领域.本文综述了ODT的应用特点、国内外上市的品种和临床应用情况,以及与儿童ODT相关性大的因素,如药片的直径大小、形状以及口感调整技术方法等方面的国内外研究现状,提出ODT研究的前景与安全性问题,为ODT的进一步研究与开发提供参考.
鲁拉西酮是一种新型抗精神障碍药(第二代抗精神病药SGA),是多巴胺2型D2和血清素5-HT2A和5-HT7受体完全拮抗剂和部分5-HT1A受体激动剂.鲁拉西酮对精神分裂症患者的精神病症状、感情症状、认知症状的治疗效果明显,同时对患者体重、代谢影响水平较小,具有良好的安全性及耐受性,广泛应用于临床治疗.本文综述了鲁拉西酮的作用机制和药动学、群体药动学、安全性、有效性及耐受性、治疗药物检测、基因多态性、药物相互作用研究现状,以期为后续研究及临床个体化用药提供参考.
目的 建立UPLC法有效控制硫酸羟氯喹中的有关物质.方法 采用Waters ACQUITY UPLC?BEH C18(2.1 mm×150 mm,1.7μm)色谱柱,以磷酸盐缓冲液(取庚烷磺酸钠0.25 g、KH2PO41.36 g,加水900 mL溶解,用三乙胺调pH值为7.0,加水稀释至1000 mL,摇匀)-甲醇(体积比90∶10)为流动相A、以磷酸盐缓冲液-甲醇(体积比15∶85)为流动相B(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为45℃,进样体积为4μL.结果 硫酸羟氯喹及12个杂质均能有效分离,硫酸羟氯喹在0.05～5μg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r为0.9999;检测限和定量限分别为0.18 ng和0.60 ng;杂质B的回收率在100.7％～104.3％范围内(RSD=1.6％),杂质C的回收率在100.1％～101.8％范围内(RSD=0.7％).结论 建立的方法能准确测定硫酸羟氯喹原料药的有关物质,专属性强、灵敏度高,为硫酸羟氯喹质量控制及生产企业改进工艺提供参考.
海洋来源的环亚胺类毒素portimine A和portimine B因其化学结构和显著的抗癌治疗潜力备受关注.然而,大量获得这些毒素目前是不可行的,并且其潜在活性的分子机制至今仍不清楚.为了解决这一问题,本研究提出了一种可规模化且简便的portimines合成方法,该方法受益于两相萜类化合物合成中使用的逻辑以及其他策略,例如利用环链互变异构化和骨架重组,以通过自我保护来最小化化学保护基团.
基于野外实地考察及文献梳理筛查,首次报道了中国五加科五加属一新记录种:太白大刺五加(Acanthopanax aspertus var.taibeiensis X.Q.Liu,H.Y.Choi,G.H.Lee et C.S.Yook),并提供详细形态特征图.该种形态上与刺五加[Acanthopanax senticosus(Rupr.Maxim.)Harms]和韩国特产植物大虾蛦五加(Acanthopanax aspertus var.koreanus Nakai)近似,但太白大刺五加叶柄末端轮生大刺,茎绿色且茎上无针状下向密生刺,3者容易区分.凭证标本保存于湖南中医药大学标本馆.
目的 基于TGF-β1/FOXP3/RORγt信号通路观察芦荟多糖对小鼠自身免疫性甲状腺炎的保护作用.方法 选用2月龄雌性小鼠30只,随机分为正常组、模型组和芦荟多糖组,每组10只.通过皮下多点注射猪甲状腺球蛋白(PTg)+高碘水法建立小鼠自身免疫性甲状腺炎模型,其中芦荟多糖组灌胃给药300 mg/(kg·d),其余两组灌胃给予等量生理盐水.药物干预4周后分别HE染色观察各组小鼠甲状腺组织病理形态学变化;ELISA法检测各组小鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(free thyroxine,FT4)、促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、白介素10(interleukin 10,IL-10)、白介素17(interleukin 17,IL-17)和甲状腺信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、维甲酸相关核孤儿受体γt(retinoic acid-related orphan receptorγt,RORγt)、叉头状转录因子P3(forkhead box P3,FOXP3)、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、IL-10和IL-17水平;免疫荧光法检测FOXP3和IL-17A水平;Western blot法检测TGF-β1/FOXP3/RORγt信号通路关键蛋白表达水平.结果 与模型组比较,芦荟多糖明显改善甲状腺组织病理学变化,降低血清TSH、TGAb、TPOAb、TNF-α、IL-1β和IL-17的水平(P<0.05),升高血清FT3、FT4和IL-10的水平(P<0.01),下调甲状腺组织STAT3、RORγt和IL-17水平(P<0.01),上调甲状腺FOXP3、TGF-β和IL-10水平(P<0.01).结论 芦荟多糖可能通过TGF-β1/FOXP3/RORγt信号通路对小鼠自身免疫性甲状腺炎具有较好的保护作用.
目的 研究八角莲Dysosma versipellis根茎的化学成分,并采用网络药理学方法对其抗癌活性进行分析.方法 运用硅胶柱层析色谱、凝胶色谱、ODS柱色谱等分离技术,现代波谱技术(NMR、MS、IR、UV)对八角莲的化学成分进行分离纯化及结构鉴定,采用GO、KEGG等方法对分离所得的化学成分可能的作用靶点、通路等信息进行富集分析.结果 分离得到了14个化合物,鉴定为:苦鬼臼脂毒酮(1)、异苦鬼臼酮(2)、苦鬼臼素-4-O-β-D-葡萄糖苷(3)、鬼臼毒酮(4)、苦鬼臼毒素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、苦鬼臼毒素(6)、4'-去甲基去氢鬼臼毒素(7)、4'-去甲去氧鬼臼毒素(8)、4'-去甲基鬼臼毒酮(9)、山荷叶素(10)、4'-去甲基鬼臼毒素(11)、山荷叶-4-O-β-D-葡萄糖苷(12)、鬼臼毒素-4-O-β-D-葡萄糖苷(13)、去氢鬼臼毒素(14).网络药理学研究结果表明上述成分可能通过对激素响应、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、胰岛素样生长因子受体信号通路等生物学过程,作用于AKT1、EGFR、HSP90AA1、MAPK3、MTOR等关键靶点,癌症通路、前列腺癌通路、脂质与动脉粥样硬化通路等发挥抗癌活性.结论 其中化合物1、2、5、7～9和14为首次从八角莲中分离得到;八角莲中的多种成分可以通过多个靶点、多个通路发挥抗癌作用.
