先天性骨骼发育不良(skeletal dysplasia,SD)是出生缺陷的重要组成部分,是包括骨骼生长发育异常的一系列疾病.由于骨骼分布广泛,由胎儿骨骼发育异常导致的骨骼畸形种类繁多,分类复杂.根据最近一版的《国际遗传性骨病的分类标准》,本文将就先天性骨骼发育不良的分类、分子机制、遗传学诊断进行综述.
目的 研究ERK和RSK通路影响人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)向内皮细胞分化的机制,探索提高内皮分化效率的策略.方法 利用三阶段法诱导iPS细胞向内皮细胞分化,期间用qRT-PCR检测分化相关基因的表达,Western blot检测ERK通路活化情况,免疫荧光、成管实验验证细胞分化效果,用ERK和RSK抑制剂分别抑制两个通路,比较两个通路对iPS细胞向内皮分化的影响.结果 iPS细胞可成功诱导分化为内皮细胞;iPS细胞向内皮分化具有阶段性;抑制ERK通路后会明显降低内皮分化效率,促使其向平滑肌细胞分化;抑制RSK通路无明显影响.结论 ERK通路是iPS细胞向内皮分化的重要信号通路,与RSK通路差异调控iPS细胞向内皮分化.
Zeste基因增强子人类同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)是多梳蛋白抑制复合物2(polycomb repres-sive complex 2,PRC2)的主要元件之一,利用组蛋白甲基化酶活性发挥经典作用,抑制靶基因的表达.此外,EZH2通过甲基化其他蛋白,作为蛋白支架分子募集转录相关分子介导转录激活,与lncRNA及miRNA相互作用等非经典途径调控各项生命活动,与干细胞分化和组织器官发育关系密切.EZH2及其功能相关分子在心脏发育、血管发生等过程中发挥着至关重要的作用.靶向敲除小鼠心脏Ezh2基因会影响心肌组织及内皮源性组织的正常发育,造成广泛性的心脏发育缺陷.EZH2参与调控正常组织和肿瘤组织的血管生成,维持新生血管完整性,并参与调控内皮间质化和内皮造血转化.本文探讨了EZH2在心脏和血管发生领域的影响效应、调控机制,及其与相关疾病的关系.
目的 探讨龙葵碱(solanine)对乳腺癌细胞多柔比星耐药性的影响及其机制.方法 选用乳腺癌细胞MCF-7细胞和对阿霉素(adriamycin,ADM)或多柔比星耐药的乳腺癌细胞MCF-7/ADR细胞,转染pcDAN-Med19过表达中介体19(mediator 19,Med19),应用CCK-8法检测细胞增殖水平,qRT-PCR和Western blot检测细胞中Med19和凋亡相关Bcl-2、Bax及Cleaved-Caspase-3表达水平,TUNEL染色和流式细胞术分析细胞凋亡水平.结果 龙葵碱显著降低MCF-7/ADM细胞活力.Med19高表达于MCF-7/ADM细胞,龙葵碱显著抑制MCF-7/ADM细胞中Med19表达,龙葵碱对多柔比星处理的MCF-7/ADM细胞活力的降低、凋亡的促进、凋亡相关蛋白Bax和Cleaved-Caspase-3水平的上调及Bcl-2水平的下调可被过表达Med19明显抑制.结论 龙葵碱通过抑制Med19表达而降低乳腺癌细胞MCF-7/ADM对多柔比星的耐药性.
青年教师是高校教学过程中的主要力量,如何提高青年教师的教学能力是一个急需解决的问题.数字切片是一种常见的数字化资源,目前在组织学实验课教学过程中表现出了诸多优点.本文将采用传统线下授课模式的五年制临床医学2020级学生的组织学实验成绩与采用基于数字化资源线上授课模式下五年制临床医学2021级学生的成绩进行分析比较,并且对青年教师的教学效果进行评价.分析不同的教学模式对青年教师教学能力的影响,为今后进一步提升青年教师教学能力提供重要的参考依据.
目的 探索冬凌草甲素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肠上皮屏障障碍的影响及其生物学机制.方法 将Caco-2细胞进行单层培养21 d使其分化后,分为对照组、LPS组(2μg/mL LPS处理24 h)、LPS+低剂量冬凌草甲素组(10μg/mL冬凌草甲素预处理30 min,2μg/mL LPS处理24 h)和LPS+高剂量冬凌草甲素组(40μg/mL冬凌草甲素预处理30 min,2μg/mL LPS处理24 h).采用跨上皮电阻法和FITC-dextran 4通量法评估细胞单层屏障功能;CCK-8法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)法检测LDH释放活性;DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧水平;ELISA法检测炎症因子IL-1β和TNF-α分泌水平;免疫荧光法检测细胞的屏障功能相关蛋白闭合蛋白(occludin)和闭锁小带蛋白1(zonula occludens protein 1,ZO-1)的表达分布情况;Western blot法检测SIRT1和p-eIF2α的相对表达水平.结果 与LPS组比较,冬凌草甲素能改善LPS诱导的肠上皮细胞单层屏障障碍,增加细胞活力并降低LDH的释放活性以及细胞中活性氧、IL-1β和TNF-α水平,还能促进闭合蛋白和ZO-1在细胞膜上的表达以及连续分布模式.Western blot检测显示,冬凌草甲素能增加SIRT1的表达,并降低eIF2α的磷酸化.以上作用以高剂量组更佳.结论 冬凌草甲素可缓解LPS导致的肠上皮细胞损伤和单层屏障障碍,SIRT1/eIF2α通路信号激活可能是冬凌草甲素发挥肠上皮细胞保护作用的机制之一.
目的 研究选择性雌激素受体调节剂克罗米芬在促进白质损伤模型动物大脑少突胶质前体细胞分化和髓鞘形成中的作用和对运动功能障碍的影响.方法 离体少突胶质前体细胞纯化培养;新生3 d小鼠连续缺氧(10％O2)7 d,模拟新生儿脑白质损伤;采用免疫荧光染色、运动协调功能检测等方法,观察克罗米芬对大脑皮质和胼胝体区域少突胶质细胞和髓鞘发育与运动功能的影响.结果 克罗米芬可促进纯化培养的少突胶质前体细胞分化为成熟少突胶质细胞,显著增加脑白质损伤模型小鼠脑组织2种髓鞘标志物——髓鞘碱性蛋白和髓鞘蛋白脂蛋白的表达,也显著增加成熟少突胶质细胞标志物腺瘤性结肠息肉病蛋白的表达;平衡杆实验证明克罗米芬治疗能够改善低氧导致的小鼠远期运动协调功能障碍.结论 克罗米芬能有效促进慢性缺氧诱导的白质损伤模型小鼠髓鞘形成和改善神经功能异常,为治疗脑白质损伤提供可能的临床药物.
目前,过程性评价虽已广泛应用于高校教学,但仍然存在着系统性不高、针对性不强、高阶性不足等问题,同时对学生能力的培养大多停滞于低阶水平.本研究以布鲁姆认知目标分类法为指导,聚焦金课标准,构建以能力为导向的评价体系,强化评价体系的系统性和针对性,并使过程性评价与医师胜任力紧密联系,以助力"两性一度"教学目标的实现.
糖尿病溃疡会影响患者的生活质量,给个人和医疗系统带来巨大的社会和经济负担.虽然对糖尿病溃疡的治疗方法已有大量探索,但仍无有效的治疗策略;因此,进一步探索替代方案很有必要.糖尿病溃疡的分子机制仍不完全清楚.长链非编码RNA(long chain non-coding RNA,lnc RNA)是长度超过200个核苷酸(nt)并且具有有限或没有蛋白质编码能力的RNA分子.过去10年中,lncRNA已被证明参与多种生物学过程,并在各种疾病的发病机制中发挥重要作用.本文总结了最近关于lncRNAs在糖尿病溃疡中的研究进展,主要关注它们在糖尿病溃疡微血管损伤、炎症、氧化应激等中的调节作用,并总结出相关潜在靶点,有望推动今后lncRNA作为调控糖尿病溃疡的生物标志物和治疗靶点,从而提供防治糖尿病溃疡的新思路.
目的 探讨Rosai-Dorfman病(Rosai-Dorfman Disease,RDD)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断,并查找相关文献对该疾病进行总结复习.方法 回顾性研究武汉大学人民医院2016-2021年诊断为Rosai-Dorfman病的病例,所有病例均由2位高年资诊断医师复阅.结果 13例患者,年龄16～71岁,男性4例,女性9例,男女比例1:2.25.9例为结外RDD,3例为混合型RDD,1例为肿瘤形成相关型.发生部位:鼻腔鼻窦5例,其中2例伴有颈部淋巴结无痛性肿大,皮肤型RDD 3例,降主动脉、颌下腺、回盲瓣、眼眶、肺各1例,其中发生于回盲瓣者并发非霍奇金淋巴瘤,发生颌下腺者伴有颈部淋巴结肿大.临床表现因发生部位不同而表现不一.镜下形态大致相同,可见大量组织细胞、淋巴细胞以及浆细胞,呈现交替排列的暗区和亮区,高倍镜下可见"伸入现象",即组织细胞内含有完整的淋巴细胞,大多病例可伴有明显的纤维化.免疫组织化学染色显示S-100、CD68阳性,CD1α阴性.结论 Rosai-Dorfman病发病率低,发病年龄广,女性患者较多见,易发生于鼻腔鼻窦,临床表现及影像学不具有特征性,诊断主要依靠镜下特征及免疫组织化学.
目的 探索miR-148a-3p对肺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响.方法 收集肺癌组织和配对癌旁组织以及肺癌细胞和正常肺上皮细胞株,RT-qPCR检测miR-148a-3p表达;Western blot和免疫组织化学检测谷氧还蛋白5(glutaredoxin 5,GLRX5)的表达.对A549细胞转染miR-148a-3p mimics和pcDNA-GLRX5后,分别用MTT、EdU、细胞划痕和Transwell实验检测细胞活性、细胞增殖、迁移和侵袭;Western blot和免疫荧光检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ki-67、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9表达.用生物信息学和荧光素酶测定法鉴定miR-148a-3p与GLRX5的靶向关系.结果 分别与癌旁组织或正常肺上皮细胞比较,肺癌组织和肺癌细胞中miR-148a-3p表达降低,GLRX5表达升高.转染miR-148a-3p mimics后,A549细胞活性、增殖、迁移和侵袭以及PCNA、Ki67、MMP-2和MMP-9表达均降低,而过表达GLRX5能显著逆转miR-148a-3p mimics的上述作用.GLRX5是miR-148a-3p的靶基因.结论 miR-148a-3p可通过靶向GLRX5来发挥对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用.
目的 探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中错配修复(mismatch repair,MMR)蛋白表达和KRAS/N-RAS/BRAF突变的临床特征和预后价值.方法 运用免疫组化及ARMS-PCR法检测694例CRC组织中MMR蛋白表达和KRAS/NRAS/BRAF突变情况,分析其临床特征及预后.结果 694例患者中,MMR蛋白表达缺失(deficient MMR,dMMR)62例(8.93％),KRAS突变333例(47.98％),NRAS突变31例(4.47％),BRAF突变20例(2.88％).dMMR状态在年龄<60岁,右半结肠,肿瘤长径≥5cm,隆起型,低分化及无淋巴结转移的患者中更常见.KRAS突变易发生于黏液腺癌中.NRAS突变在年龄≥60岁患者中更常见.BRAF突变在右半结肠,黏液腺癌及低分化组织中的检出率高,且其在dMMR肿瘤中的突变率较高.Kaplan-Meier分析显示:BRAF突变患者的总生存期(OS)明显低于KRAS/NRAS突变及完全野生型患者,且其无进展生存期(PFS)明显低于KRAS突变及完全野生型患者;MMR蛋白表达完整(proficient MMR,pMMR)的BRAF突变型患者的OS及PFS明显低于pMMR KRAS/NRAS突变、pMMR完全野生型、dMMR KRAS突变及dMMR完全野生型患者.COX分析显示:BRAF突变是CRC预后的独立影响因素.结论 MMR蛋白表达和KRAS/NRAS/BRAF突变与CRC的发生发展及预后密切相关,且其检测对于指导临床治疗和预测CRC患者预后具有重要意义.
目的 研究家鸽消化道黏膜酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、腺苷三磷酸酶(ATPase)、非特异性酯酶(NSE)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和过氧化物酶(POX)等6种酶的分布及组织定位.方法 在成体家鸽消化道中的8个部位取样,采用冷冻切片、酶组织化学染色和光密度定量分析技术检测ACP、ALP、ATPase、NSE、SDH和POX的分布及活力.结果 ACP在肌胃、空肠和十二指肠酶活力较高,而在腺胃、回肠、盲肠、直肠和食道酶活力较低.ALP在腺胃、十二指肠、空肠、回肠和直肠酶活力显著较高,盲肠和食道次之,肌胃酶活力最低.ATPase在除直肠外的其它部位酶活力均显著较高.NSE在肌胃酶活力最高,空肠、盲肠、回肠和食道次之,十二指肠、腺胃和直肠酶活力较低.SDH在食道、腺胃和肌胃酶活力显著较高,直肠次之,回肠、盲肠和空肠相对较低,十二指肠酶活力最低.POX在腺胃酶活力最高,肌胃、十二指肠、食道和回肠次之,直肠、空肠和盲肠酶活力较低.结论 家鸽消化道6种酶的分布与其不同部位的消化吸收功能相适应.十二指肠和空肠是进行蛋白质细胞内消化和吸收的主要部位;小肠各部位对脂类、葡萄糖、钙离子以及无机磷酸盐均有较强的吸收作用;空肠、回肠和盲肠是消化酯类物质的主要部位.
原发性高血压已经逐渐成为了我国现阶段最受关注的重要公共卫生问题之一,最常见的靶器官损害之一左心室肥厚(left ventricular hypertrophy,LVH)被认为是高血压诱发的心室重塑和高血压心脏病的关键转折点.近年来研究报道,miRNA在原发性高血压的发生与靶器官损害的发展中具有重要的调控作用.本文就miRNA在原发性高血压左心室肥厚发生、诊断、治疗中的研究进展展开综述,旨在为miRNA在原发性高血压左心室肥厚中的调控作用和应用开发理清思路.
目的 观察槐果碱(sophocarpine,SC)对糖尿病大鼠肾损伤的影响,并探讨其相关机制.方法 选用SD大鼠,以高脂饮食12周和链脲佐菌素处理制作糖尿病模型,灌胃给予槐果碱治疗12周.PAS染色以及纤连蛋白(fibronectin,FN)和Cleaved Caspase-3免疫组织化学染色评估肾组织损伤,ELISA检测肾组织中IL-1β及IL-6水平,Western blot检测肾组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、Cleaved Caspase-1和NF-κB p65蛋白表达水平.结果 糖尿病大鼠肾重指数、尿蛋白排泄水平、血清尿酸水平、肾小球系膜基质扩张系数均较对照大鼠明显升高,肾组织中FN、Cleaved Caspase-3、IL-1β、IL-6、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1和NF-κB p65蛋白水平均较对照大鼠明显上调,槐果碱干预能明显抑制糖尿病大鼠上述指标变化.结论 槐果碱可能通过抑制NLRP3炎性小体和NF-κB通路活化来减轻糖尿病大鼠的肾损伤.
目的 探讨Krüppel样因子7(KLF7)在创伤性颅脑损伤(TBI)后海马区细胞凋亡和神经功能障碍的保护作用及调控机制.方法 应用控制性皮质撞击(CCI)法建立小鼠TBI模型,侧脑室注射KLF7慢病毒(AAV-KLF7)过表达KLF7,Western bolt和实时荧光定量PCR检测小鼠海马内KLF7表达变化,Western bolt检测海马组织细胞凋亡因子、JAK2/STAT3信号通路关键因子及其磷酸化水平,TUNEL法检测海马组织神经元凋亡情况,甲酚紫染色检测各组动物大脑皮质损伤体积,神经功能评分和旋转杆实验检测神经功能障碍改变.结果 TBI后1 d,海马区KLF7蛋白和mRNA表达显著增高,3 d后恢复正常.TBI海马区Bax和Cleaved Caspase-3(C-Cas-3)水平、TUNEL阳性细胞百分比、脑皮质损伤体积百分比、p-STAT3/t-STAT3和p-JAK2/t-JAK2比值显著增加,Bcl-2水平显著降低,神经功能评分和旋转杆上运动时间均显著降低;侧脑室注射AAV-KLF7可促进TBI诱导的p-STAT3/t-STAT3和p-JAK2/t-JAK2比值增加,抑制TBI诱导的Bax和C-Cas-3水平增加.结论 KLF7可通过促进TBI对JAK2/STAT3信号通路的活化,减少TBI所致的神经元凋亡.
Objective Primary pulmonary enteric adenocarcinoma(PEA)is primarily composed of tall columnar cancer cells,arranged in irregular acinar or sieve-like patterns,with extensive central necrosis,closely resembling the appearance of colorectal carcinoma under a microscope.Therefore,distinguishing PEA from pulmonary metastases of colorectal carcinoma(PM-CRC)can be challenging,necessitating the exploration of new immunological markers.Methods four pathology experts preliminarily screened lung tumor cases according to WHO diagnostic criteria,combined with clinical history,radiographic examinations,and colonoscopic evaluations,to include cases of PEA and PM-CRC.Multiple immunohistochemical markers were stained on tissue samples from these cases.Results 28 PEA samples and 42 PM-CRC samples were included.The positive rates of SATB2 in PEA and PM-CRC were 0.00%and 92.86%,respectively.The sensitivity,specificity,and diagnostic accuracy of SATB2 in distinguishing PEA from PM-CRC were 92.86%,100%,and 95.71%,respectively,while for cytokeratin 7(CK7),they were 83.33%,96.43%,and 88.57%.Conclusion SATB2 has a higher diagnostic value for differentiating PEA from PM-CRC compared to CK7,making SATB2 the best immunological marker for distinguishing between PEA and PM-CRC,with CK7 serving as a reference.
目的 FUN14结构域蛋白2(FUN14 domain containing 2,FUNDC2)是一种线粒体外膜蛋白,调控缺氧条件下血小板的寿命.血管紧张素II(angiotensinⅡ,AngII)是血管内皮细胞衰老的重要始动因子.本研究目标在于探讨FUNDC2对于人静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)线粒体自噬的作用和其下游可能的信号通路.方法 带有GFP-LC3B标签的活细胞用Mito-Tracker染色以标记线粒体自噬.AngII刺激细胞诱导细胞衰老,采用β-galactosidase染色显示细胞衰老.采用免疫沉淀和Western blot检测FUNDC2蛋白的拟素化修饰和Akt/foxo3a信号通路的活化情况.结果 FUNDC2表达上调增加HUVECs细胞的线粒体自噬水平,并伴有Akt/foxo3a信号通路的活化.在此过程中FUNDC2发生由神经前体细胞表达的发育下调蛋白8(neuronal precursor cell-expressed developmentally down-regulated protein 8,NEDD8)介导的拟素化修饰,NEDD8的27位赖氨酸位点是其与FUNDC2结合必不可少的.AngII可抑制FUNDC2介导的线粒体自噬,与内皮细胞衰老密切相关.结论 FUNDC2发生拟素化修饰对于内皮细胞线粒体自噬非常关键.AngII可能由于干扰FUNDC2介导的线粒体自噬从而诱导内皮细胞衰老.
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶8(HDAC8)抑制剂PCI-34051对支气管哮喘小鼠气道旁血管生成的治疗作用.方法 BALB/C小鼠随机分作正常对照组、单纯哮喘组、地塞米松组和PCI-34051组,每组6只.应用卵白蛋白致敏和激发方法构建哮喘小鼠模型,HE染色观察气道炎症浸润水平,Masson染色观察气道壁周围胶原沉积水平,AB-PAS染色观察气道杯状细胞增生水平.免疫荧光双重染色观察α-SMA/CD31在肺组织中的表达分布,免疫组织化学染色观察VEGF、p-ERK1/2在肺组织中的表达分布,Western blot检测肺组织中VEGF、p-ERK1/2表达水平.结果 卵白蛋白所致哮喘组小鼠气道周围可见大量炎症细胞浸润,α-SMA、CD31、VEGF和p-ERK1/2表达上调;地塞米松和PCI-34051处理显著抑制上述变化.结论 HDAC8特异性抑制剂PCI-34051能缓解哮喘气道旁新生血管形成,其机制与抑制VEGF/ERK信号通路有关.
乳腺癌的进展高度依赖于肿瘤细胞与肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)之间的相互作用.前期发现T淋巴细胞、树突状细胞、肿瘤相关巨噬细胞等与乳腺癌的发生发展密切相关,但近期研究却认为肿瘤相关脂肪细胞(tumor-associated adipocytes,CAAs)与肿瘤相关嗜中性粒细胞(tumor-associated neutrophils,TANs)正在成为乳腺癌细胞的伴侣,促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移.它们可能通过不同于脂肪细胞与嗜中性粒细胞的方式参与肿瘤的促进和发展,并影响乳腺癌的预后.深入了解其与乳腺癌细胞之间复杂的恶性循环,对于设计新的治疗干预策略至关重要.本文对CAAs及TANs的生物学特性、在乳腺癌微环境中的相互作用以及在维持肿瘤微环境和肿瘤进展中的作用进行综述.
