实验动物作为"替难者"为人类的医学生命科学发展做出了重要贡献.尽管全世界范围内针对实验动物福利伦理的各种举措和法规不断被提出和应用,但随着实验动物的需求量和使用量的持续增加,实验动物的福利伦理矛盾和争议更加凸显.我国实验动物福利伦理工作起步较晚,具有亟需发展的必要性和紧迫性.现阶段需在参考国际标准和要求的基础上,结合我国的文化和现状,完善我国的法律法规.从实验动物行业出发,加快推进实验动物福利伦理认证和评价工作、完善伦理审查并逐步实现全程监督、提升兽医的工作地位和水平、加强从业人员的教育培训和意识建立等多方面着手,从而对践行实验动物的福利和权益产生实际效益.
功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)是以胃和十二指肠区域功能障碍为主的非器质性疾病,中医学将其归为"痞满"和"胃脘痛"等范畴,并分为脾虚气滞、肝郁(肝胃不和、肝郁脾虚、肝郁气滞)、脾胃湿热、脾胃虚寒(弱)与寒热错杂等证型.中医药治疗FD效果明显且接受度高,而病证结合的动物模型是开展相关研究的基础和前提.因此,本文对现有的FD病证结合动物模型的研究进行整理和归纳,对具体造模方式和评价指标的选择原因进行探讨,同时提出目前研究的不足之处,以期为今后FD病证结合动物模型的研究提供支持.
随着老龄化社会的进程加快,神经退行性疾病发病率呈现逐年上升趋势.斑马鱼因拥有其他模式动物所不具备的优点,作为模式动物被广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域.本文就近年来斑马鱼在常见的神经退行性疾病,如阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿舞蹈症、肌萎缩侧索硬化、脊髓性肌萎缩、遗传性痉挛性截瘫及其他神经系统相关疾病的研究应用进行综述.
许多肽或蛋白质药物治疗的一个主要挑战是血浆半衰期短.通过将该类药物与白蛋白结合获得的药物称为白蛋白相关药物,有效延长血浆半衰期.动物模型作为研究药物药代动力学的重要工具是药物研究中不可或缺的一部分.本综述概括了两大类动物模型:啮齿类(野生型小鼠、大鼠模型,基因修饰小鼠模型)与非啮齿(猴)在白蛋白相关药物药代动力学研究中的应用与发展,为其进一步研究发展提供参考.
动物模型广泛应用于研究疾病的发病机制及药物干预的安全性、疗效、作用机制等研究.选择和制备符合疾病发病规律的动物模型是开展实验研究的基础和前提.糖尿病大血管病变的特征为广泛且进展迅速的血管壁动脉粥样硬化,小鼠是动脉粥样硬化实验研究中运用最广泛的动物.本文基于最新研究结果根据1型和2型糖尿病的特征、糖尿病动脉粥样硬化斑块发展规律以及相关评估技术对糖尿病动脉粥样硬化小鼠模型进行系统性综述.
在肿瘤发生机制及预防诊断和治疗的研究中,动物实验作为介于体外细胞实验和临床试验之间的中间环节,是至关重要的.动物福利与动物实验的结果密切相关,动物福利的改善可以影响动物实验的合理性、可行性和伦理可接受性并提高实验结果的可靠性.本文整理了肿瘤研究中涉及实验动物的相关方面,主要包括:肿瘤动物模型、肿瘤模型相关动物福利及人道终点等.
目的 探讨胶原蛋白肽(collagen peptide,CP)联合海藻酸钠(sodium alginate,SA)对子宫内膜损伤的修复作用及机制.方法 将 48 只SPF级雌性C57BL/6N小鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组各 16 只.模型组采用微创法经小鼠子宫颈向宫腔注射 95%乙醇造成子宫内膜损伤,制备小鼠宫腔粘连模型;假手术组向宫腔注射 0.9%生理盐水;治疗组向宫腔注射 95%乙醇后给予宫腔注射CP+SA混合液.于造模 7d后每组分别取8 只小鼠采集样本用于各项检测.HE染色观察小鼠子宫组织病理形态学变化;改良Masson三色染色观察子宫内膜纤维化情况;Western Blot检测子宫组织中炎症因子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 蛋白表达水平;ELISA检测小鼠血清中炎症因子IL-1β、IL-18 的表达.各组剩余的 8 只小鼠按照雄雌比例为 1∶2合笼,记录各组小鼠妊娠数量,于妊娠第 14 天处死妊娠小鼠,记录胚胎数量.结果 (1)与假手术组相比,模型组小鼠子宫内膜厚度变薄,子宫内膜纤维化增加,并有炎症细胞浸润.此外,模型组子宫组织中炎症因子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白表达水平以及血清中炎症因子IL-1β和IL-18 水平均显著高于假手术组(P＜0.05).(2)与模型组相比,治疗组小鼠子宫内膜损伤程度、子宫内膜纤维化程度及炎症细胞浸润均减轻;此外,治疗组子宫组织中炎症因子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达水平及血清中炎症因子IL-1β和IL-18 水平均显著低于模型组(P＜0.05).(3)与假手术组相比,模型组小鼠生殖能力下降(P＜0.01);与模型组相比,治疗组小鼠生殖能力明显改善(P＜0.01).结论 CP和SA联合应用可有效改善宫腔粘连模型小鼠子宫组织病理改变,减轻子宫内膜损伤、炎症反应及纤维化程度,改善小鼠生殖能力,其作用机制可能与下调NLRP3 炎症小体表达有关,为CP和SA联合应用治疗宫腔粘连提供可靠的实验依据.
元认知曾被认为是人类独有的高级认知能力,动物是否具有元认知是比较心理学领域争论的热点问题之一.对该问题进行探讨,有助于研究者们揭示元认知的系统发育根源,绘制人类高级认知功能的进化历程.本文对过去二十五年间主要的动物元认知研究进行了梳理,总结了不确定性监控范式、信息搜寻范式与信心判断范式三种常用的研究范式与对应的测量指标,概述了动物元认知研究领域中联想模型和元认知模型两种对立的解释倾向及其依据.针对联想模型与元认知模型的争论,提出改进研究范式来检验元认知模型与创新理论以整合模型两种未来的研究方向.
鱼类性别受环境与基因共同调控,两者均可影响鱼类性腺分化、发育,但环境如何影响性腺发育基因来调控鱼类性别尚不明确.现有研究认为,上游基因sox9、amh高表达可诱导鱼类原始性腺分化为精巢,sox9促进精母细胞增殖,amh抑制精原细胞增殖,下游基因ar、er表达水平升高可诱导鱼类精原细胞分裂、分化、精母细胞增殖以及精子发生过程;外源雌激素抑制sox9、amh表达,对ar、er则表现为低浓度诱导,高浓度抑制.综上,鱼类雄性性别分化受sox9、amh、ar、er共同调控,环境因子的改变可影响这一分化过程.因此,本文对鱼类性别分化上游主要调控基因sox9和amh,下游主要调控基因ar和er以及它们与精巢发育的关系、环境因子胁迫对这些基因和精巢组织结构的影响展开综述,以探讨鱼类精巢发育以及环境因子对这一发育过程的基因调控作用.
全身型幼年特发性关节炎(systemic juvenile idiopathic arthritis,sJIA)是最常并发巨噬细胞活化综合征(macrophage activation syndrome,MAS)的风湿性疾病,可威胁患儿生命.目前的动物模型仅显示出部分sJIA及MAS的特性,尚没有一个完美的动物模型能够复制sJIA及MAS整个过程.本文对目前已提出的sJIA和MAS动物模型模拟的临床特征、优点及存在的不足进行综述,旨在为探索代表性更佳的sJIA及MAS的动物模型提供思路.
目的 建立小鼠血浆中黄卡瓦胡椒素B的高效液相色谱-质谱联用(HPLC/MS-MS)定量分析方法,并研究其在小鼠体内的药代动力学特征.方法 KM小鼠采用尾静脉注射(20 mg/kg)、腹腔注射(20、40 和 60 mg/kg)和灌胃(200、400 和 600 mg/kg)给药后,在 0、5、30 min及 1、2、4、6、8、12、16 和 24h眼底静脉丛取血,分离血浆样品,HPLC-MS/MS分析样品中黄卡瓦胡椒素B的浓度,计算药代动力学参数,并评价不同途径给药下黄卡瓦胡椒素B的生物利用度.结果 在0.2～800.0 ng/mL浓度范围内,黄卡瓦胡椒素B线性关系良好(r = 0.9995),定量下限为 0.2 ng/mL,准确度在-8.50%～12.50%,精密度在 1.73%～12.03%,且无明显基质效应(88.68%～102.04%),确证该方法适用于小鼠血浆中黄卡瓦胡椒素B的定量分析.药代动力学结果显示,黄卡瓦胡椒素B腹腔注射和灌胃给药后在体内吸收迅速,血药浓度在给药 0.083 h即为峰值,在腹腔注射 20～60 mg/kg和灌胃 200～600 mg/kg给药范围内呈现良好的线性药代动力学过程.黄卡瓦胡椒素B的绝对生物利用度腹腔注射给药为53.29%,灌胃给药为 1.38%.结论 本研究建立的HPLC-MS/MS定量分析方法,操作简便、准确、灵敏度高,成功应用于小鼠血浆中黄卡瓦胡椒素B的药代动力学特征研究.
目的 本研究拟对比两种不同高脂饮食方式诱导的高脂血症大鼠肠道菌群变化与短链脂肪酸代谢特征,以宿主-肠道菌群-代谢角度探讨高脂血症可能的微观机制.方法 SPF级SD大鼠分为:正常饮食组(CG组):饲喂大鼠维持饲料;高脂饮食组(HFD1 组):每天足量饲喂高脂饲料;限饲高脂饮食组(HFD2 组):每天限量饲喂高脂饲料 80 g,不限量饲喂维持饲料.8 周后检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织和肾周脂肪病理学变化;取结肠内容物进行 16S rDNA高通量测序,观察肠道菌群结构与功能的变化,并检测结肠内容物中短链脂肪酸的含量.结果 与CG组相比,HFD1 组和HFD2 组大鼠摄食量下降,体重升高;血清中TC、TG、LDL-C均显著升高;肝组织发生明显脂肪变性,肾周脂肪出现炎性病变;高脂干预后大鼠肠道菌群相对丰度显著变化,其中乳杆菌属相对丰度明显降低,菌群结构和功能变化明显,总短链脂肪酸、乙酸、丁酸、异丁酸下降显著.结论 两种高脂饮食方式均能引起大鼠高脂血症,且发病机制基本一致,均与脂质代谢以及肠道菌群紊乱有关.每日限制一定的高脂饲料饲喂量不仅能够降低高脂饲料对大鼠食欲的影响,还能提高大鼠高脂血症模型制备的稳定性,是一种值得推广应用的大鼠高脂模型制备方法.
目的 通过血清非靶向代谢组学技术研究黄连解毒汤对健康SD大鼠生理功能的影响.方法 大鼠 24 只适应性喂养 7d后,随机分为空白组(N组)、黄连解毒汤高剂量组(H组)、中剂量组(M组)、低剂量组(L组),每组 6 只.N组灌胃生理盐水,H组、M组、L组分别按照每次 6.250 g/kg、3.125 g/kg、1.560 g/kg剂量灌胃1 mL、每天 2 次、连续 21 d.采取大鼠血清样本前禁食禁水 12 h,经麻醉后腹主动脉取血并分离血清.通过GC-TOF-MS检测各组大鼠血清中代谢产物的变化,采用多元分析OPLS-DA以及单变量统计学方法筛选其差异代谢物,再经过MetaboAnalyst平台进行代谢通路分析.结果 与N组相比,H组、M组、L组大鼠血清中显著改变的代谢小分子主要有胆固醇、胆酸、核糖、白皮杉醇、皮质醇、油酸、琥珀酸、亚麻酸、醋酸和丙酮醇等(P＜0.05).相关分析表明黄连解毒汤能显著影响机体的初级胆汁酸代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、α-亚麻酸代谢、甘油磷脂代谢,且其发挥体内作用可能与摄入的剂量有关,为深入揭示黄连解毒汤促进胆汁酸代谢的作用机制提供一定参考.结论 黄连解毒汤能促进体内初级胆汁酸生成并增强胆汁酸代谢通路的作用.
胃溃疡是一种常见的消化系统疾病,中医药治疗该病效果显著,但其治疗机制至今尚未明确.建立一套科学客观的胃溃疡中医证候动物模型及模型评价体系,对促进中医药在此领域的发展以及进一步的研究具有重大意义.笔者对近 10 年中医药治疗胃溃疡相关文献进行整理,总结和分析了胃溃疡中医证候动物模型的制作与评价方法,对肝胃不和证、脾胃湿热证、胃络瘀阻证、脾胃虚寒证、胃阴不足证、肝郁脾虚证等动物模型的制作方法进行总结,发现目前的胃溃疡动物模型存在中医辨证分型不够统一、造模思路与证型局限、造模方法标准不一、模型病证结合不紧密、模型评价体系不规范等问题,并提出模型改进意见,以期为此领域的研究提供参考.
支气管肺泡灌洗术是研究呼吸系统疾病的一项重要技术,已经在疾病研究中得到广泛运用.目前,临床患者的支气管肺泡灌洗操作流程已经逐步规范化,而小鼠作为研究肺部疾病重要的模型动物之一,尚缺乏针对小鼠的支气管肺泡灌洗液标准采集和检测流程,不规范的流程会导致该技术在研究中的推广和应用受阻,同时也会影响实验结果的准确性和可靠性.本文对国内外研究中小鼠支气管肺泡灌洗方法进行了系统总结,以期为今后运用并建立规范的灌洗流程提供参考和指导.
目的 研究卵巢癌动物模型的特点及应用现况,为当下卵巢癌模型的规范化制备提供参考指导.方法 通过从中国知网、万方、维普以及PubMed数据库中以"卵巢癌"和"动物模型"为主题词,PubMed数据库中检索建库至 2023 年 3 月 1 日的卵巢癌动物实验性期刊文献,均进行建库至今的文献搜索,共收集相关文献共 1428篇.从实验动物种类、年龄、实验造模方法、检测指标等方面进行总结,建立数据库进行系统分析.结果 筛选后共获得符合标准的实验性研究文献 178 篇.构建建立卵巢癌动物模型多选用BALB/c品种的雌性鼠;大部分周龄选择 4～6 周龄、6～8 周龄;造模方法使用最普遍的是异位移植,多接种在腋部皮下;在卵巢癌动物模型造模方法的使用上,以移植性模型使用最多,其中异位移植远高于原位移植的使用量;使用的细胞株或卵巢癌组织多为人源.检测指标检测最多的是肿瘤组织的外观指标、肿瘤病理及免疫组化.结论 卵巢癌动物模型在卵巢癌研究中应用广泛,但缺少专业规范的制备和评价标准,本文通过文献整理、数据归类分析,对卵巢癌的动物模型应用现状进行了详细分析,以期为构建规范化卵巢癌动物模型提供参考.实验多选用BALB/c品系鼠,以浓度为1×107/mL的人卵巢癌SKOV3 细胞注射于腋部皮下进行为期 10d异位移植造模,短时间内能获得大量模型,成瘤率高且个体差异小,可为研究卵巢癌提供参考.
目的 建立与评价慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并慢性肾病(CKD)大鼠模型.方法 将 40 只雌雄各半SPF级SD大鼠随机分为对照组(Control组)、COPD组、CKD组、COPD合并CKD模型组(COPD+CKD组),每组10 只.采用香烟烟雾暴露联合细菌滴注法制备COPD大鼠模型,利用腺嘌呤诱导建立CKD大鼠模型,两种方法协同制备COPD合并CKD的大鼠模型,8 周后取材检测肺、肾功能,观察组织形态学及血清炎症因子的表达水平.结果 造模成功后COPD+CKD组大鼠肺功能指标FVC、FEV0.1及FEV0.1/FVC显著降低(P＜0.01),肺组织病理学表现为肺泡壁断裂、融合的肺气肿改变及炎细胞浸润;血Cr、BUN及 24h尿蛋白显著升高(P＜0.01),肾组织病理学表现为肾小球系膜增生,基底膜增厚,肾小管扩张及间质纤维化,超微结构显示肾小球毛细血管襻部分闭合,足突融合,肾小管线粒体融合崩解,溶酶体增多;血清IL-6、IL-13、IL-1β和TGF-β1 水平显著升高(P＜0.01),且明显高于单一模型组(P＜0.01).结论 采用香烟烟雾暴露联合细菌感染合并 2.5%腺嘌呤诱导的方法可成功构建COPD合并CKD的大鼠模型,炎性反应可能在COPD合并CKD过程中起关键作用.
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是常见心脑血管疾病的潜在危险因素,严重威胁着人类的健康和生命.AS的防治和抗AS新药的研发是医药学界一直关注的热点.选择理想的AS动物模型是研究AS防治措施及新药研发的关键.理想的AS动物模型应是与人类AS发病机理相似,病理及生化反应一致,且AS模型复制的重复性高、操作简便、易于推广.小鼠具有繁殖性强、遗传性高、可塑性好、AS成模性快等特点,成为了AS研究的理想动物.本文就不同干预因素建立小鼠AS模型的复制方法进行了比较分析,以期为开展AS防治和中药新药研发提供参考和思路.
目的 强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种免疫介导的累及中轴关节、周围关节和肠道的慢性疾病,但外周膝关节和肠道的病因病机未明.本研究旨在研究AS食蟹猴膝关节和肠道主要病理变化及机制.方法 通过组织形态学分析及免疫组化实验,研究AS外周膝关节及肠道组织的关键特征并初步分析其发病机制.结果 AS食蟹猴外周膝关节病理特征在早期主要表现为关节表面软骨侵蚀、软骨下骨暴露、关节表面呈锯齿状;晚期主要表现为软骨表层肥大软骨细胞异位增生,通过软骨成骨和纤维成骨形成骨赘,软骨基本丢失.软骨和血管中MMP-3的表达上调,引起软骨破坏并刺激血管增生.AS食蟹猴小肠绒毛严重萎缩且隐窝增生明显,空肠和回肠的黏膜肠腺中可见大量γδT细胞.结论 本研究通过对AS食蟹猴膝关节和肠道的病理分析,获得了该自发模型膝关节与肠道组织的关键特征,并提出可能的发病机制.为探讨AS的骨骼病变与外周疾病间的潜在关联,以及AS的治疗提供新的见解.
目的 为了解明熊胆粉在肝癌早期阶段的抑制作用,利用大鼠短期致癌模型进行了熊胆粉(bear bile powder,BBP)的抗癌药效实验.方法 40只5周龄雄性SD大鼠分成4组:DEN单独组(DEN-alone),模型组(DEN+PBO),低剂量组(DEN+PBO+BBP-L)(200 mg/kg),高剂量组(DEN+PBO+BBP-H)(400 mg/kg).实验开始时,大鼠腹腔注射200 mg/kg二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN),模型组、低剂量组及高剂量组动物饲喂了 0.5％胡椒基丁醚(piperonyl butoxide,PBO)粉末饲料.低剂量组和高剂量组动物同时灌胃200或400 mg/kg BBP 8周.结果 饲喂PBO粉末饲料的动物绝对及相对肝重量显著大于DEN单独组.但是,DEN+PBO+BBP-L组的GST-P阳性病灶的数量和面积与DEN+PBO组相比显著减少.同时,因DEN和PBO处理显著增加的Ki-67阳性细胞率在BBP处理组显著减少.但是,细胞周期相关的Ccne1、Cdkn1b和细胞凋亡相关的Caspase 8、Caspase 9仅在DEN+PBO+BBP-H组中显著增加,在DEN+PBO+BBP-L组中没有变化.结论 BBP在肝癌形成早期阶段通过抑制癌前病灶发挥抑制作用,且它的抗癌机制中包含着抑制细胞增殖活性和诱导细胞凋亡作用.同时,高剂量的BBP可能影响其抗癌前病灶作用.
