Toxoplasma gondii is an intracellular protozoan parasite that infects all nucleated cells except the red blood cells. Currently, nucleic acid vaccines are being widely investigated in Toxoplasma gondii control, and several nucleic acid vaccine candidate antigens have shown good protection in various studies. The aim of this study was to construct a nucleic acid vaccine with Toxoplasma gondii SRS29C as the target gene. We explored the nucleic acid vaccine with Toxoplasma surface protein SRS29C and the combined gene of SRS29C and SAG1 and evaluated its immunoprotective effect against Toxoplasma gondii. To amplify the gene fragment and clone it to the expression vector, the recombinant plasmid pEGFP-SRS29C was constructed by PCR. Eukaryotic cells were transfected with the plasmid, and the expression of the target protein was assessed using the Western blot method. The level of serum IgG was determined via ELISA, and the splenic lymphocyte proliferation ability was detected using the CCK-8 method. The percentages of CD4+ and CD8+ T cells were measured by flow cytometry. Mice were immunised three times with single-gene nucleic acid vaccine and combination vaccine. Splenic lymphocytokine expression was determined using ELISA kits. The mice's survival time was monitored and recorded during an in vivo insect assault experiment, and the vaccine's protective power was assessed. The outcomes showed that PCR-amplification of an SRS29C gene fragment was successful. The 4,733-bp vector fragment and the 1,119-bp target segment were both recognised by double digestion. Additionally, after transfection of the recombinant plasmid pEGFP-SRS29C, Western blot examination of the extracted protein revealed the presence of a target protein strip at 66kDa. The test results demonstrated that the IgG content in the serum of the pEGFP-SRS29C group and the co-immunization group was significantly higher than that of the PBS group and the empty vector group. The IgG potency induced by the co-immunization group was higher than that of the pEGFP-SRS29C group and the pEGFP-SAG1 group, the number of splenic lymphocyte proliferation number was higher than that of the PBS group and the empty vector group. The CD4+/CD8+ T ratio was higher than that of the PBS group and the empty vector group. The expression of IFN-γ and TNF-α in the splenocytes of the pEGFP-SRS29C group and the combined immunisation group was significantly higher following antigen stimulation. In the worm attack experiments, mice in the PBS and empty vector groups perished within 9 days of the worm attack, whereas mice in the pEGFP-SRS29C group survived for 18 days, mice in the pEGFP-SAG1 group survived for 21 days, and mice in the co-immunization group survived for 24 days. This demonstrates that the constructed Toxoplasma gondii nucleic acid vaccine pEGFP-SRS29C and the combined gene vaccine can induce mice to develop certain humoral and cellular immune responses, and enhance their ability to resist Toxoplasma gondii infection.
在豆粕价格居高不下的当下,开发新型蛋白质饲料是降低饲料成本的重要途径.水飞蓟粕是水飞蓟提取水飞蓟素或榨油后的副产物,具有丰富的营养物质,是一种潜力巨大的区域性蛋白质饲料.水飞蓟粕可以直接饲喂家畜,但适口性较差、蛋白质含量较低、粗纤维含量较高,还需进一步开发.文章综述了水飞蓟粕、发酵水飞蓟粕在生产上的应用及其综合性能的开发现状,旨在为我国畜牧业豆粕减量替代和新型蛋白质饲料资源开发提供新的思路.
为了探究抗菌肽、寡糖和有机酸复合制剂对肉鸡养分利用率、屠宰性能和免疫功能的影响,试验将390只1日龄科宝肉鸡随机分为对照组、抗生素组和低、中、高剂量复合制剂组,每组6个重复,每个重复13只鸡;对照组饲喂基础日粮,抗生素组在基础日粮中添加200 mg/kg恩拉霉素,低、中、高剂量复合制剂组分别在基础日粮中添加200,400,600 mg/kg抗菌肽、寡糖与有机酸复合制剂,试验期为42 d;试验结束后测定养分利用率(粗蛋白、干物质、有机物、磷、钙利用率)、屠宰性能指标(屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重、屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率)、免疫器官指数(胸腺、脾脏、法氏囊指数)及血清中IgA、IgG与IgM含量.结果表明:抗生素组和中、高剂量复合制剂组粗蛋白利用率显著高于对照组和低剂量复合制剂组(P＜0.05),高剂量复合制剂组有机物利用率显著高于对照组和低、中剂量复合制剂组(P＜0.05),抗生素组、高剂量复合制剂组钙利用率显著高于对照组和低剂量复合制剂组(P＜0.05),各组间干物质利用率、磷利用率差异不显著(P＞0.05);抗生素组和低、中、高剂量复合制剂组腿肌率分别比对照组提高9.7％(P＜0.05)、2.6％(P＞0.05)、8.9％(P＜0.05)、10.4％(P＜0.05),抗生素组和低、中、高剂量复合制剂组胸肌率分别比对照组显著提高10.8％、5.0％、9.1％、9.5％(P＜0.05),各组间平均活重、屠体重、屠宰率、半净膛重、半净膛率、全净膛重、全净膛率、腿肌重和胸肌重差异不显著(P＞0.05);抗生素组和低、中、高剂量复合制剂组胸腺指数显著高于对照组(P＜0.05),抗生素组和中、高剂量复合制剂组脾脏指数显著高于对照组(P＜0.05),抗生素组和中、高剂量复合制剂组血清IgG和IgA含量显著高于对照组(P＜0.05),各组间法氏囊指数和IgM含量均差异不显著(P＞0.05).说明在肉鸡日粮中添600 mg/kg的抗菌肽、寡糖和有机酸复合制剂可有效提高肉鸡养分利用率、屠宰性能和免疫器官指数,增加肉鸡血清中免疫球蛋白含量,改善肉鸡免疫功能.
菊苣酸又称二咖啡酒石酸,是一种咖啡酸衍生物,对免疫系统具有重要的调节作用,可以增强机体免疫、促进固有免疫和适应性免疫、提高免疫细胞功能、调控细胞因子与抗体、调节免疫器官生长发育.文章主要综述了菊苣酸调节免疫系统的作用机制,以期为菊苣酸在兽医临床免疫方面的开发与应用提供参考.
为了探索发酵全混合日粮(FTMR)对贵州黑山羊淘汰母羊生产性能、瘤胃发酵参数、血清免疫指标及育肥效果的影响,试验选择健康、平均体重为(35.00±1.63)kg的贵州黑山羊淘汰母羊33只,采用完全随机区组设计(RCBD)将试验羊分为3组,每组11只,各组单栏饲养.试验Ⅰ组饲喂市售商品颗粒TMR,试验Ⅱ组饲喂现加工的常规TMR,试验Ⅲ组饲喂FTMR,预试期为10 d,正试期为75 d.试验开始前试验羊空腹称初始重,然后每间隔14 d称重1次,计算日增重(ADG)、干物质采食量及料重比,统计增重饲料成本和增重效益.试验结束后,试验羊颈静脉采血,检测血清免疫指标[免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、胰岛素样生长因子(IGF)、干扰素(IFN)、生长激素(GH)、白细胞介素-2(IL-2)、游离三碘甲状腺原氨酸(T3)、游离四碘甲状腺原氨酸(T4)].用导管法采集各组试验羊瘤胃液样品30 mL,测定总挥发性脂肪酸(TVFA)、氨态氮(NH3-N)、乙酸、丙酸、丁酸含量及pH值,统计主要挥发性脂肪酸(VFA,乙酸、丙酸、丁酸)占TVFA比例,并计算乙酸与丙酸比(乙丙比).结果表明:试验Ⅲ组ADG为(196.43±36.28)g/d,与试验Ⅱ组相比差异不显著(P＞0.05),但试验Ⅰ组日增重显著高于试验Ⅱ组(P＜0.05).试验Ⅲ组料重比显著高于试验Ⅰ组(P＜0.05).试验Ⅲ组增重饲料成本为8.87元/kg,分别比试验Ⅰ组和试验Ⅱ组低6.58元/kg和0.22元/kg;试验Ⅲ组增重效益为370.16元/只,分别比试验Ⅰ组和试验Ⅱ组高51.91元/只和25.41元/只.各试验组间的干物质消化率差异不显著(P＞0.05),试验Ⅲ组的粗蛋白、中性洗涤纤维和粗脂肪消化率高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组(P＞0.05).各试验组间瘤胃液pH值,TVFA含量,乙酸、丙酸、丁酸占TVFA比例及乙丙比差异不显著(P＞0.05),试验Ⅰ组NH3-N含量极显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组(P＜0.01).试验Ⅲ组IgA含量极显著高于试验Ⅱ组(P＜0.01),其他免疫指标各组间差异不显著(P＞0.05).说明饲喂FTMR可提高贵州黑山羊淘汰母羊养分消化率,提升体液免疫功能,促进其生长发育,同时能降低增重饲料成本,提高育肥经济效益.
为了探究川射干提取物对急性肺损伤的防治效果及其对TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响,试验将 24 只雌性 Balb/c 小鼠随机分为空白对照(CTR)组、模型(LPS)组、地塞米松(DEX)组及川射干提取物(ITR)组,每组 6 只.ITR 组每只每天灌胃 12.5 mg/mL 川射干提取物0.2 mL,其他组灌胃等体积生理盐水,连续7 d.末次给药 1 h后,LPS组、DEX组和ITR组每只小鼠腹腔注射1 mg/mL脂多糖0.2 mL造模,CTR组腹腔注射等体积生理盐水.DEX组于造模前 1 小时每只小鼠腹腔注射0.5 mg/mL地塞米松0.2 mL.造模6 h后采集血液,制备血清;处死各组小鼠,分别采集肺泡灌洗液(BALF)和肺脏,通过ELISA法检测血清和肺泡灌洗液中趋化因子 1(CXCL1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8 和IL-10 的含量;对肺脏组织进行H.E.染色,观察肺脏病理变化;通过Western-blot检测Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达情况.结果表明:与LPS组相比,ITR组血清和肺泡灌洗液中CXCL1、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 含量均显著或极显著下降(P<0.05 或P<0.01),IL-10 含量显著或极显著升高(P<0.05 或P<0.01);与LPS组比较,ITR组肺泡内炎症细胞浸润程度明显减轻,仅局部肺泡腔内出现少量巨噬细胞或淋巴细胞浸润.与LPS组比较,ITR组肺脏TLR4、MyD88、TRIF和NF-κB p-p65 蛋白表达量显著或极显著降低(P<0.05 或P<0.01).说明川射干提取物可通过调节TLR4/NF-κB信号通路缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤.
为了探讨鸡舍温度、湿度传感器的布置数量和位置选择,从而提高对鸡舍环境监测的效率,试验将90 个温度、湿度传感器分三层均匀分布在鸡舍中,分析舍内温度和湿度变化规律,并运用主成分分析法将监测结果进行线性变换,根据监测点优化率与累计方差贡献率的调和评价指标确定监测点的最佳数量,计算主成分与原始数据的累计因子负荷量并以此确定最终传感器监测点位置.结果表明:八层叠层笼养鸡舍内不同监测点温度差和湿度差变异大,分别可达5～8℃和25%～35%.基于主成分分析方法剔除邻近点后,确定了6 个温度监测点(25,35,52,61,79,83 号)和7 个湿度监测点(1,16,32,50,52,61,79 号)为最优监测点,其中 52,61,79 号既是温度监测点又是湿度监测点,共 10 个监测点,在这10 个监测点处安装传感器,对应的温度和湿度累计方差贡献率分别为 0.94 和 0.89,并通过温度和湿度的变化规律验证了选择结果的合理性.说明主成分分析法获得的监测点数量和位置可有效代表蛋鸡舍温度、湿度的空间变异性,提高蛋鸡舍环境监测效率.
2022 年7 月份黑龙江省某养殖场的北极狐陆续出现食欲下降、呕吐及腹泻等症状,个别北极狐精神倦怠、食欲废绝、腹泻、粪便呈黑色、便血甚至死亡等.采用一般临床检查、实验室检查、病理解剖、现场调查等方式进行鉴别诊断,对自配料原料进行了检测,并进行了相应的治疗.结果表明:病狐食欲减退,毛质枯燥,腹部触诊未见明显异常;常见传染病抗原阴性,未见肠道寄生虫;病理解剖发现胃底黏膜严重脱落、出血明显,十二指肠出血、坏死,胰腺水肿、充血,脾脏充血,肾脏水肿,部分肺叶淤血及水肿.自配料原料鲐鱼中组胺含量为 1.90 mg/g,确诊为北极狐组胺中毒.结合养殖场的实际情况,采取停止饲喂鲐鱼,肌肉注射西咪替丁,口服马来酸氯苯那敏等措施对中毒北极狐进行治疗,对北极狐群采取调整饲料配方、促进营养物质摄入等措施,成功地控制住了北极狐中毒.说明在使用自配料时应经常检查原料品质,避免发生群发性食物中毒.
褪黑素(melatonin,MLT)是从牛的松果体中提取出的一种重要激素.褪黑素不但在动物体内广泛分布,而且影响动物的生殖机能.文章综述了褪黑素分子结构、作用特点及其在雌性生殖系统中的分布,褪黑素在雌性动物生殖机能中的生物学作用及可能的机制,以期为褪黑素在畜牧生产实践中的应用提供参考.
为了研究杜洛克猪和杜长大猪校正115 kg眼肌面积(corrected loin eye area at 115 kg)的遗传参数及相关的候选基因,试验收集 2783 头杜洛克猪和 2424 头杜长大猪的LEA115 数据,使用Gene Seek GGP 50K芯片对杜洛克猪与杜长大猪进行基因分型.对杜洛克猪的基因型数据进行质量控制,去除个体基因型检出率<0.95 的样品,去除单核苷酸多态性(single-nucleotide pdymorphism,SNP)基因型检出率<0.99、最小等位基因频率<0.05、哈代-温伯格平衡检验P值<1×10-6 的SNP 位点;对杜长大猪不进行哈代-温伯格平衡检验,其余质量控制条件同杜洛克猪.利用ASReml软件对杜洛克猪与杜长大猪的 LEA115 进行遗传参数估计,使用 rMVP 软件包提供的 FarmCPU(fixed and random model circulating probability unification)模型对杜洛克猪与杜长大猪的LEA115 进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS),筛选显著的SNP 位点,在显著SNP 位点上下游 500 kb范围内挖掘潜在候选基因.通过 NCBI 和 Animal QTL 等数据库最终鉴定出杜洛克猪和杜长大猪LEA115 的候选基因.结果表明:杜洛克猪和杜长大猪的LEA115 均为低等遗传力,分别为 0.13 和0.09.与杜洛克猪LEA115 显著相关的显著SNP位点有11 个,分布在5,6,7,8,13,14,15,16 号染色体上;与杜长大猪LEA115 显著相关的SNP位点有10 个,分布在1,2,6,7,8,9,13 号染色体上.KLHL21、NUDT3、PACSIN1、SPDEF、SNRPC、ANKS1A、ENSSSCG00000043323、CHCHD6 基因可作为杜洛克猪 LEA115 的候选基因;ENSSSCG00000052059、SLC39A7、ABHD4 基因可作为杜长大猪LEA115 的候选基因.说明与猪LEA115 显著相关的SNP 位点和候选基因为猪LEA115 的标记辅助选择提供了分子遗传标记.
近年发展起来的人工核酸酶技术可引起特定位点的DNA双链断裂,断裂后通过同源重组修复机制使精准单碱基编辑成为可能.基于CRISPR/Cas9 将Cas9n与胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶融合而开发出的单碱基编辑系统可进一步提高单碱基编辑的效率和精确度,在不造成DNA双链断裂的情况下实现精准单碱基编辑.对动物进行单碱基编辑不仅有望提高其生产性能,而且能为人类疾病研究作出重要贡献.文章回顾了单碱基编辑系统的发展历程,重点介绍了单碱基编辑系统在动物中的应用,并对单碱基编辑系统在动物中的应用前景进行了展望,以期为动物基因编辑技术的研发和应用提供理论依据和应用案例.
在我国生猪养殖向集约化、规模化高速转型的背景下,猪粪排放日益集中,排放量不断增加,猪粪的处理问题逐渐成为制约养猪业发展的瓶颈.猪粪还田作为传统的处理猪粪的主要手段,显现出越来越重要的地位.文章总结了猪粪还田的主要处理方法并提出将猪粪转化为液态肥进行资源化利用的思路,以期为实现农牧循环、限制猪粪污染、提高猪粪的利用率、促进我国农牧行业的健康发展提供参考借鉴和理论依据.
为了从连翘中提取出高效低毒的抗肿瘤活性物质,试验采用水煮提取、乙醇沉淀、大孔吸附树脂柱层析、薄层层析的方法从连翘中分离提取到连翘抗肿瘤活性物质FS-4,通过超高效液相色谱仪串联四级杆飞行时间质谱仪鉴定FS-4 的化学成分,并研究了FS-4 对SGC-7901 的增殖抑制作用及超微结构的影响.结果表明:从连翘中分离提取到 14 种化学成分,分别由咖啡酸、齐墩果酸、白桦脂酸、熊果酸、软脂酸、硬脂酸6 种已知成分和8 种未知成分组成.FS-4 对SGC-7901 的增殖具有抑制作用,FS-4 浓度越高,时间越长对其增殖抑制作用越大,具有剂量时间依赖性;在 6,12,24,36 小时时,FS-4 作用于SGC-7901 的半数抑制浓度(IC50)分别为 87.38,56.10,34.45,3.23 μg/mL.FS-4作用SGC-7901 后,其核浆比明显减小,核仁消失,胞浆中出现明显的空泡,染色质密集边缘化,细胞表面绒毛脱失,且质膜呈现叶片样突起,并有凋亡小体形成.说明从连翘中分离、提取得到的FS-4具有抗肿瘤活性,可抑制SGC-7901 的增殖及诱导其凋亡.
为了建立一种快速检测牛免疫球蛋白G(IgG)的方法,试验从牛血清中提取和纯化IgG,用微量紫外分光光度计检测浓度,并每2 周1 次、分4 次用牛IgG分别免疫 2 只大耳白兔制备兔抗牛IgG多克隆抗体,用酶联免疫吸附试验检测抗体效价.分别以上转发光颗粒(UPT)和量子点(QD)作为生物示踪物,结合双抗体夹心法和双抗原竞争法原理制备 4 种试纸条,分别为UPT-LF-夹心法、UPT-LF-竞争法、QD-LF-夹心法和QD-LF-竞争法试剂条;4 种试纸条层析膜质控带均为 2 mg/mL羊抗兔抗体,夹心法和竞争法检测带分别为 3 mg/mL兔抗牛IgG多克隆抗体和 2 mg/mL牛IgG;配制 0,0.1,0.3,0.5,0.7,1,3,5,7,10,30,50,70,100 μg/mL浓度的牛IgG标准品,分别用4 种试纸条进行检测,对试纸条的检出限、线性和精密性进行研究,筛选最优试纸条.用筛选到的最优试纸条和折光仪同时检测52 份乳样中牛IgG含量,并抽取 7 份乳样用液相色谱进行检测.结果表明:提取的牛IgG浓度为67.6 mg/mL,2 份血清中兔抗牛IgG多克隆抗体浓度分别为 34 mg/mL和 70 mg/mL,兔抗牛IgG多克隆抗体效价均为1∶102400.UPT-LF-夹心法、UPT-LF-竞争法、QD-LF-夹心法和QD-LF-竞争法试纸条的检出限分别为 0.3,3.0,0.1,0.5 μg/mL,线性拟合的相关系数(R2)分别为 0.976,0.990,0.945,0.974,4 种试纸条的精密性由大到小依次为UPT-LF-夹心法、UPT-LF-竞争法、QD-LF-夹心法和QD-LF-竞争法,QD-LF-竞争法试纸条为最优的试纸条.折光仪和QD-LF-竞争法试纸条检测50 份牛初乳样中牛IgG含量分别为20～80 mg/mL和50～230 mg/mL.7 份乳样的QD-LF-竞争法试纸条与液相色谱检测牛IgG含量的相关性高达0.9759,而折光仪与液相色谱检测牛IgG含量的相关性仅为0.8274.说明与折光仪相比,QD-LF-竞争法试纸条检测牛IgG含量的准确性更高.
为了探究烟酰胺(NAM)对牛骨骼肌卫星细胞(BSMSCs)增殖与分化的影响,试验以体外培养的BSMSCs成肌分化模型为研究对象,用 0,1,2,4,8 mmol/L烟酰胺处理BSMSCs(对照组及 1,2,4,8 mmol/L烟酰胺组),采用CCK-8 法筛选烟酰胺对BSMSCs作用的最适浓度,后续试验均以不添加烟酰胺作为对照组,最适浓度作为试验组,采用EdU试剂盒检测最适浓度烟酰胺对BSMSCs增殖的影响;光学显微镜下观察最适浓度烟酰胺处理的 BSMSCs 分化 24,48,72 小时时的肌管形态,采用Western-blot检测BSMSCs中肌球重链蛋白(MyHC)和肌原蛋白(MyOG)的表达水平,分析烟酰胺对BSMSCs分化的影响.结果表明:与对照组比较,BSMSCs的OD450 值随着烟酰胺浓度的上升而下降,4 mmol/L烟酰胺组OD450 值显著降低(P<0.05),8 mmol/L烟酰胺组OD450 值极显著降低(P<0.01),但8 mmol/L烟酰胺组的细胞存活率低于50%,超过药物对细胞的半数致死浓度,最终以4 mmol/L作为烟酰胺作用于BSMSCs的最适浓度.4 mmol/L烟酰胺处理BSMSCs后,增殖率没有发生显著变化(P>0.05).与对照组比较,4 mmol/L烟酰胺组BSMSCs融合形成的肌管数量增多且肌管直径变大,MyHC和MyOG蛋白的相对表达量显著或极显著上升(P<0.05 或P<0.01).说明烟酰胺对BSMSCs增殖没有影响但可促进其分化.
为了探究低蛋白日粮中功能性添加剂对育肥猪生产性能、养分表观消化率和粪便中微生物的影响,试验选取112 头80 kg左右健康"大×长"二元育肥阉公猪,根据窝别、体重采用随机区组设计分为7 个处理,分别为对照组(13.5%CP 标准日粮)、SD+C 组(标准日粮+75 mg/kg 金霉素)、LP 组(10.5%CP低蛋白日粮)、LP+C 组(低蛋白日粮+75 mg/kg 金霉素)、LP+OO 组(低蛋白日粮+100 mg/kg牛至油)、LP+SP组(低蛋白日粮+0.16%小肽)、LP+SP+FAP组(低蛋白日粮+0.16%小肽+0.2%发酵穿心莲),每个处理4 个重复,每个重复 4 头.试验结束后测定各组生产性能指标、养分表观消化率、粪便中微生物群落Alpha多样性指数和门水平上的微生物数量.结果表明:SD+C组的平均日增重(ADG)显著高于LP组、LP+C组、LP+OO组和LP+SP 组(P<0.05),LP+C组的料重比(F/G)显著高于对照组和SD+C组(P<0.05).与对照组相比,SD+C组钙(Ca)和磷(P)的表观消化率均极显著降低(P<0.01);LP组的干物质(DM)、Ca、P 和粗蛋白(CP)的表观消化率均极显著降低(P<0.01);LP+C组DM和Ca 的表观消化率均极显著降低(P<0.01),P 的表观消化率显著降低(P<0.05);LP+OO组Ca的、DM和CP的表观消化率极显著或显著降低(P<0.01 或P<0.05);LP+SP 组DM的表观消化率极显著降低(P<0.01),Ca的表观消化率显著提高(P<0.05);LP+SP+FAP 组DM和Ca的表观消化率均极显著降低(P<0.01).与LP组相比,LP+C组Ca和CP的表观消化率均显著提高(P<0.05);LP+OO组DM和P 的表观消化率均极显著提高(P<0.01);LP+SP 组DM、Ca、P 和CP的表观消化率显著或极显著提高(P<0.05 或P<0.01);LP+SP+FAP 组DM、P 和CP 的表观消化率显著或极显著提高(P<0.05 或P<0.01).与对照组相比,LP+OO组、LP+SP 组和LP+SP+FAP 组粪便中微生物群落的Shannon指数均显著提高(P<0.05),LP+SP组拟杆菌门的微生物种类数量极显著提高(P<0.01),LP组、LP+C组、LP+OO组、LP+SP+FAP 组拟杆菌门的微生物种类数量均显著提高(P<0.05).说明低蛋白日粮对育肥猪生产性能和养分表观消化率有不利影响;在低蛋白日粮中添加小肽、牛至油、小肽+发酵穿心莲均可提高养分表观消化率和粪便中微生物群落的多样性,同时可提高拟杆菌门的微生物种类数量;低蛋白日粮、小肽与发酵穿心莲结合可替代添加抗生素的标准日粮.
为了验证从紫花苜蓿根际土壤中分离出的 1 株对根腐病致病菌——镰刀菌(Fusarium spp.)具有抑制作用的菌株T2,试验通过形态学、生理生化试验、16S rDNA基因鉴定确定菌株种属,通过平板对峙试验及孢子萌发试验验证菌株T2 对镰刀菌的抑菌能力,通过盆栽试验验证菌株T2 对紫花苜蓿根腐病的防效.结果表明:经形态学观察、生理生化鉴定及 16S rDNA基因序列分析,确定菌株T2为田无链霉菌(Streptomyces tanashiensis).在平板对峙试验中田无链霉菌T2 对腐皮镰刀菌(Fusarium solani,F.solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum,F.oxysporum)、轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides,F.verticillioides)的抑制率分别为 37.33%、53.33%和 37.00%.田无链霉菌T2 无菌发酵液对腐皮镰刀菌、尖孢镰刀菌及轮枝镰刀菌孢子萌发抑制率分别为42.11%、43.94%和44.96%.盆栽试验中,田无链霉菌T2 对苗期紫花苜蓿根腐病的防效为50.21%.说明单独接种田无链霉菌T2 可以促进紫花苜蓿生长,田无链霉菌T2 在紫花苜蓿根腐病防控中具有一定潜力.
为了明确重庆市某规模猪场舍内环境中葡萄球菌的病原特性及耐药情况,试验采用空气细菌培养自然沉降法和物体表面采样法采集猪场舍内环境样本 20 份,进行葡萄球菌的分离纯化,提取分离株基因组DNA,扩增 16S rRNA基因序列,构建系统进化树,检测其生化指标,确定敏感药物,并分析病原菌耐药基因的携带情况.结果表明:分离纯化得到2 种革兰氏阳性球菌,分别与头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌相似性较高(均为 99%),在系统进化树中也分别与其聚为一簇,两种菌的硝酸盐还原、MR-VP和甘露醇等7 种指标检测结果均为阳性,确定为头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌,均对多西环素、复方新诺明和阿奇霉素耐药;头状葡萄球菌携带vanA、rpoB、ermB和tetM 4 种耐药基因,沃氏葡萄球菌携带ileS、rpoB、blaZ、ermC、aacA-aphD、tetK和tetM 7 种耐药基因,两种菌均含有rpoB和tetM基因,并证实头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌的耐药类型与耐药基因具有相关性.说明该猪场舍内环境中存在头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌,在生猪养殖和人畜共患病防控方面应加强对环境中病原微生物的监测.
为了明确非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)JX21 毒株的基因组变化及其生物学特性,试验采用PCR检测、病毒分离培养、病毒全基因组测序、红细胞吸附试验及动物感染试验等对从江西省某菜市场采样分离到的ASFV自然变异毒株JX21 进行研究.结果表明:与ASFV SY18 毒株序列比较,JX21 毒株全基因组序列中出现110 处碱基差异和 8 个基因的自然缺失.其中EP402R基因(编码CD2v蛋白)第395 位碱基后插入1 个碱基"A",导致翻译提前终止,JX21 毒株丧失了红细胞吸附特性.试验组5 头健康家猪感染JX21 毒株后,28 d内全部死亡,期间均出现较高水平的病毒血症,剖检后均出现ASFV阳性组织,病程较长.说明分离的JX21 毒株属于自然变异株,基因组中存在多处变异,其中EP402R基因变异可引起病毒失去红细胞吸附特性,其毒力未见明显减弱,仍为 100%致死,但病程延长.
